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文檔簡介
1、本研究針對禽白血病，采集種雞場血樣進行血清學(xué)檢測，并采集病雞的組織樣品進行病理組織學(xué)觀察。針對禽白血病病毒(ALV)的保守基因，設(shè)計引物建立常規(guī)PCR體系，將PCR產(chǎn)物克隆測序，并以重組質(zhì)粒作為定量檢測的模板，選取ALV病毒的LTR序列，利用Primer Express2.0軟件設(shè)計引物和探針，建立檢測ALV的實時熒光定量RT-PCR方法。
血清學(xué)試驗證明所檢測的種雞場有疑似禽白血病臨床癥狀的禽白血病的陽性率為53.3％。
2、通過病理組織學(xué)觀察，病雞的肝臟、脾臟，法氏囊和腺胃中有大量的髓細胞樣腫瘤細胞。建立的熒光定量PCR方法最低可檢出30個拷貝的重組質(zhì)粒。該方法具有特異性，對新城疫病毒，禽流感病毒、傳染性支氣管炎病毒、傳染性法氏囊病毒、雞傳染性貧血病毒、傳染性喉支氣管炎病毒和馬立克氏病毒核酸都沒有擴增反應(yīng)。利用建立的實時定量PCR方法對臨床90個待檢樣品進行檢測，檢出56個陽性，陽性率為62.2％。實時定量RT-PCR檢測ALV的方法，靈敏度高，特異性好，
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