普通小麥春化基因VRN2的克隆及表達特性分析.pdf

1、以6個不同春化發(fā)育特性的普通小麥品種為試驗材料，通過RT-PCR擴增技術克隆了春化基因VRN2的CCT保守區(qū)，分析了保守區(qū)43個氨基酸中3個關鍵位點的突變情況；克隆了6個品種啟動子部分區(qū)域，分析其序列特征；研究了春化過程中ZCCT基因在遼春10號和京841中的表達特性。主要研究結果如下：
　　 1.以6個不同春化發(fā)育特性普通小麥品種為試驗材料，通過RT-PCR技術克隆了ZCCT-A1/A2、ZCCT-B1/B2和ZCCT-D1/

2、D26個基因編碼區(qū)，分析了CCT保守區(qū)中43個氨基酸16位、35位和39位氨基酸的突變情況。結果表明：不同品種間ZCCT-A1的CCT功能域的序列存在差異，肥麥有R35W突變，遼春10號、鄭麥9023、周麥18、豫麥49-198和京841五個品種均有R39C突變；ZCCT-A2均存在R16C突變；B和D組均未發(fā)現(xiàn)突變。表明VRN2基因編碼區(qū)的等位變異主要體現(xiàn)在A染色體組上，而B、D染色體組上的VRN2基因在參試品種中都為顯性。
　

3、　 2.通過半定量RT-PCR技術，分析了春化過程中強春性遼春10號和冬性京841的ZCCT-A1/A2、ZCCT-B1/B2和ZCCT-D1/D26個基因的表達特性。結果顯示：ZCCT-A1/A2的表達均較低，ZCCT-B1/B2和ZCCT-D1/D2隨著春化天數(shù)的增加，表達量均有逐漸下降趨勢，且ZCC-B1的表達量較高；而且，京841的表達水平顯著高于遼春10號，表明在參試品中的冬性品種的VRN2抑制春化作用明顯大于春性品種。

4、r>　　 3.通過PCR特異擴增技術，克隆了6個品種啟動子部分區(qū)域，分析其序列特征。結果顯示：均擴增到目的條帶，說明均不是無效形式(null form)；ZCCT-A1啟動子存在3個SNP；ZCCT-D1啟動子也存在3個SNP；除鄭麥9023外的5個品種ZCCT-A1在啟動子上游97bp處有三個連續(xù)的TCT重復序列，而6個品種ZCCT-B1啟動子上游97bp處有2個連續(xù)的TCT序列。6個品種ZCCT-B1缺失一個TCT，推測這一缺失可