雨生血球藻高濃度培養(yǎng)及其產蝦青素的研究.pdf

1、蝦青素具有很強的抗氧化性和清除自由基的能力,可有效地防止組織、細胞和DNA被氧化損傷,具有廣泛的應用。雨生血球藻是目前公認的蝦青素的最好生物來源。本文以實驗室保藏的一株雨生血球藻為出發(fā)藻株,通過兩輪紫外誘變,在添加有機碳源的培養(yǎng)基上篩選出一株適合混合營養(yǎng)的高生物量、高蝦青素產量藻株ZW-Ⅱ-6。藻生物量由0.1877 g/L提高到0.3176g/L,提高了約69.2％,蝦青素產量由2.0835 mg/L提高到了5.2706mg/L,約提

2、高了1.405倍。經傳代培養(yǎng),其生物量及蝦青素產量穩(wěn)定,說定誘變獲得的藻株ZW-Ⅱ-6性狀能穩(wěn)定遺傳。
　　 實驗以干重法測定雨生血球藻的生物量,以藻生物量為指標,優(yōu)化了誘變藻株ZW-Ⅱ-6的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。分別添加乙酸鈉和葡萄糖進行混合營養(yǎng)培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中添加葡萄糖所獲得的藻生物量更大。因此選擇葡萄糖作為誘變藻株的有機碳源。在單因素實驗的基礎上,進行正交實驗,確定其生長的最佳培養(yǎng)基為:葡萄糖3 g/L,KNO30.6 g/

3、L,KH2PO40.03 g/L,MgSO4·7H2O0.2g/L,CaCl20.04 g/L。對與雨生血球藻生長關系密切的環(huán)境條件光照、溫度、pH分別進行了研究,得出雨生血球藻最適生長的光照強度為25001x,溫度為22℃,初始pH為8。在最適培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件下培養(yǎng)8d雨生血球藻的生物量達到1.1274 g/L。
　　 探討了添加有機碳源進行自養(yǎng)及混合營養(yǎng)培養(yǎng)情況下,有機碳源和光照強度對雨生血球藻生長的影響。發(fā)現(xiàn)光強度對雨生血

4、球藻的光合自養(yǎng)和光合異養(yǎng)生長都有明顯影響,最適光強為25001x,有機碳源葡萄糖更利于藻株ZW-Ⅱ-6的生長。光照和葡萄糖添加量對雨生血球藻的生長是相互影響的,在光照為0及光照為5001x左右時,葡萄糖添加量為5g/L時,雨生血球藻獲得最大生物量。而光照上升到25001x時,獲得最大雨生血球藻生物量時的葡萄糖添加濃度降為3g/L。通過中心組合實驗得出,葡萄糖添加量為3.1113g/L,光照強度為22591x,雨生血球藻產量最高為1.23

5、75g/L。
　　 采用二甲基亞砜提取法測定蝦青素的產量,研究混合營養(yǎng)條件下產蝦青素情況。光照強度和葡萄糖添加濃度對雨生血球藻的蝦青素產量具有交互影響,光照為0時,添加葡萄糖培養(yǎng)時的蝦青素產量小于對照,在添加不同濃度葡萄糖的培養(yǎng)基中,葡萄糖添加5g/L時的蝦青素產量最高,當光照上升到25001x,獲得最高蝦青素產量的葡萄糖濃度降為3g/L。通過中心組合實驗得出,蝦青素產量最高的條件為:葡萄糖添加濃度3.1616 g/L,光照強度