金魚Striatin基因對金魚胚胎發(fā)育的調控功能分析.pdf

1、蛋白磷酸酶-2A(PP2A),是真核生物體內最主要的一種蛋白磷酸酶,它是一個異源三聚體,包括支架蛋白A亞基、催化C亞基以及調節(jié)亞基B。目前的研究表明調節(jié)亞基B,由超過16個不同基因編碼,因此,除了有調節(jié)PP2A活性的功能之外,很可能還有其它的功能。
　　 為了研究PP2A調節(jié)亞基在脊椎動物發(fā)育過程中充當怎樣的角色,我們克隆了金魚PR110/B'"家族調節(jié)亞基striatin以及SG2NA,并且我們在金魚的組織及胚胎中分析了這兩個

2、基因的組織特異性及發(fā)育表達模式。我們的結果顯示striatin基因全長cDNA包含2349個核苷酸,推測其編碼782個氨基酸；SG2NAα基因包含一個2118 bp的開放閱讀框,推測其編碼705個氨基酸,其另外的一個變體SG2NAβ包含一個2148 bp的開放閱讀框,推測其編碼715個氨基酸。PR110/B'"的這兩個異構體與其它物種之間顯示出很高的同源性。
　　 Striatin基因的功能,除了作為PP2A的調節(jié)亞基之外,其它

3、的功能目前還不是很清楚。本研究為了進一步研究Striatin基因在低等脊椎動物中的功能,首先,我們從金魚的腦中提取了RNA,并通過反轉錄得到了striatin cDNAs,再通過RT-PCR我們克隆了長約1000bp左右?guī)盖形稽c的基因片段。其次,使用反義RNA技術,前面得到的基因片段可以被反向的插入到pEGFP-C3載體(一種綠色熒光蛋白載體)中構成反義載體pEGFP-striatin-AS。最后,在金魚胚胎1cell時期,將反義載體