中華補血草多酚抗氧化活性研究.pdf

1、中華補血草(Limonium sinense(Girard) Kuntze)是白花丹科藥用植物，主產(chǎn)于我國沿海鹽堿地。根可供入藥，具祛濕、清熱、止血等功效，藥效確切。本文以中華補血草為材料，開展以下幾個方面的研究。 1.采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化超聲波輔助浸提中華補血草根多酚工藝，確定的最佳工藝參數(shù)：乙醇體積分數(shù)45010、液固比38:1、溫度65℃，在此條件下根多酚提取率9.71％。 2.從5種不同類型的大孔樹脂中篩選出對中

2、華補血草根多酚有良好吸附及解吸性能的AB-8大孔樹脂，系統(tǒng)考察了該樹脂對多酚吸附和解吸的影響因子，確定的最佳靜態(tài)吸附條件：提取液初始質(zhì)量濃度約2.4 mg.mL-1，吸附時間約5h，提取液pH值可不調(diào)節(jié)；最佳動態(tài)解吸條件：體積分數(shù)70％乙醇為沈脫劑，流速1.0 mL.min-1。在此條件下制備的根多酚提取物，得率和純度分別為12.88％、59.29％。 3.采用Sephadex LH-20柱層析對大孔樹脂法制備的根多酚進行純化，

3、根據(jù)洗脫液在280 nm和360 nm處的沈脫曲線圖分得6個級分，其中FracⅥ得牢最高，占純化產(chǎn)物的80.09％，且FracⅣ、FracⅥ、FracⅤ和FracⅡ中的多酚純度比純化前均有所提高，F(xiàn)racⅣ達66.91％，達到純化目的。 4.分別采用8種體外試驗體系(包括還原能力、FRAP法、·OH體系、·O2體系、DPPH法、TEAC法、β-胡蘿卜素/亞油酸脂質(zhì)體體系和大豆卵磷脂脂質(zhì)體體系)對中華補血草根多酚提取物及其6個級分

4、的抗氧化活性進行了系統(tǒng)評價。 根多酚提取物及FracⅣ、FracⅤ等2個級分具有很強的還原能力(供電子能力)，顯著高于對照品蘆丁，與BHT相當，但低于VitC。 根多酚提取物對·OH和·O2等自由基的清除能力很強，半數(shù)清除率質(zhì)量濃度(Picso)分別為0.061 mg·mL-1、0.022 mg·mL-1，清除能力強于蘆丁和VitC，6個級分中僅富含黃酮的FracII對·OH的清除能力有顯著提高，其余級分與純化前差異不顯

5、著或較之低：而對·O2-的清除能力卻有所不同，6個級分中活性最強的兩個級分( FracⅣ、FracⅤ)比純化前略低，原因可能是清除·O2能力強的物質(zhì)部分殘留在Sephadex LH-20凝膠中所致。根多酚提取物及FracIV、FracV等級分具有很強的有機自由基(DPPH.、ABTS.+)清除能力，均高于BHT、蘆丁，比VitC略低或差異不顯著(P>0.05)，且自由基清除能力與其多酚含量呈正相關(guān)性(R2≥0.9222)?？梢?，中華補血

6、草根多酚作為自由基清除劑加以開發(fā)利用，潛力巨大。 中華補血草根多酚提取物及其級分對兩種脂質(zhì)體體系β-胡蘿卜素/亞油酸脂質(zhì)體體系和大豆卵磷脂脂質(zhì)體體系)的過氧化均有一定的抑制作用，但效果顯著低于BHT。 5.為全面了解中華補血草全草的抗氧化活性，開展了3個器官(根、葉、花)抗氧化活性的比較。在不同體系中，根、葉、花提取物的抗氧化活性強弱順序不完全一致，尤其是在清除.OH能力方面，花提取物的活性突出，但總的來說，根提取物的抗

7、氧化活性比葉、花提取物強。根是抗氧化物質(zhì)(多酚)積累的重要器官，不過，從資源綜合利用角度看，葉、花部也不容忽視。 6.測定了中華補血草根、葉、花提取物，及根提取物6個級分中抗氧化作用成分(多酚、黃烷醇、黃酮)的含量，結(jié)果顯示，3種器官提取物中多酚含量豐富，以根提取物(592.90 mg·g-1)最高：此外，還含有黃烷醇、黃酮，其中根提取物中黃烷醇含量(106.45 mg·g-1)最高，而花提取物中的黃酮含量(359.66 mg·

8、g-1)最高，分別是根、葉提取物的近30倍和5倍。經(jīng)純化后，F(xiàn)racⅣ、FracⅤ、FracⅥ、FracII等4個級分中多酚有所提高，增幅在10％左右，F(xiàn)racIV的多酚和黃烷醇含量最高，分別為669.19 mg·g-1、169.12 mg·g-1;各級分中 FracII檢出大量的黃酮，高達344.03mg·g-1，占多酚的55.62％。可見，多酚類物質(zhì)是中華補血草抗氧化的主要作用成分，而花提取物及Frac II中還包括黃酮的貢獻。