獸用吲哚美辛注射液的臨床前研究.pdf

1、吲哚美辛自1860年由德國(guó)默克公司上市以來，已廣泛用于人醫(yī)臨床，主要治療人的非特異性發(fā)熱、腎小球腎炎、先天性醛固酮增多癥、痛經(jīng)、腹絞痛、風(fēng)濕性及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病，其制劑有腸溶片、膠囊、栓劑、乳膏、貼劑等，未見注射液上市。
　　 本文研制的吲哚美辛注射液屬國(guó)家三類新獸藥，有望應(yīng)用于豬、羊、牛等動(dòng)物的普通感冒、流行性感冒、其他原因引起的發(fā)熱性疾患、風(fēng)濕癥等。作者按農(nóng)業(yè)部《獸藥注冊(cè)辦法》(中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部第44號(hào)令)要求，對(duì)該

2、注射液處方工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定性、部分安全性和有效性等進(jìn)行了臨床前的部分研究，旨在為該注射液下一步的臨床試驗(yàn)和新獸藥注冊(cè)積累資料。其主要內(nèi)容如下：
　　 1.吲哚美辛注射液處方工藝研究。通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、丙二醇、聚乙二醇-400等有機(jī)溶劑及其用量進(jìn)行了篩選。結(jié)果以30％二甲基甲酰胺、30％丙二醇和40％水為混合溶媒，無水亞硫酸鈉為抗氧化劑，乙二胺四乙酸二鈉為金屬螯合劑，乙醇胺和乳酸為pH調(diào)節(jié)劑

3、，制備出濃度為20 mg·L-1且初步有效期可達(dá)2年以上的吲哚美辛注射液。
　　 2.吲哚美辛注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。對(duì)制備的吲哚美辛注射液進(jìn)行了鑒別、檢查、含量測(cè)定等研究。結(jié)果，鑒別反應(yīng)靈敏；裝量差異、熱原、澄明度、pH值等檢查指標(biāo)均符合注射液相關(guān)要求。吲哚美辛注射液含量測(cè)定采取HPLC方法，其色譜條件：色譜柱為Ultimate XB-C18(4.6 mm×250 mm，5μm)，流動(dòng)相為0.1 mol·L-1冰醋酸溶液-甲醇(2

4、0:80)，流速為1.0 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為228 nm，柱溫為室溫。結(jié)果，吲哚美辛注射液在20～1000μg·mL-1濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，r=0.9993；平均回收率為102.3％(n=9)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.03％；最低定量限為3 ng，最低檢測(cè)限為0.9 ng；在該條件下測(cè)得吲哚美辛注射液的含量為18.648±0.295 mg·mL-1。
　　 3.吲哚美辛注射液穩(wěn)定性研究。光照試驗(yàn)(照度

5、4500±500Lx)測(cè)定吲哚美辛注射液對(duì)光的敏感性，初均速法預(yù)測(cè)吲哚美辛注射液的有效期；加速試驗(yàn)條件為：溫度40℃±2℃、相對(duì)濕度75％±5％；長(zhǎng)期試驗(yàn)條件為：溫度25℃±2℃、相對(duì)濕度60％±10％。結(jié)果，經(jīng)10天光照試驗(yàn)，吲哚美辛注射液的性狀、澄明度、含量、pH值等指標(biāo)未見明顯變化；初均速法預(yù)測(cè)吲哚美辛注射液的有效期為2.21年；加速試驗(yàn)6個(gè)月，吲哚美辛注射液的含量、pH值、性狀、澄明度等變化甚微；長(zhǎng)期試驗(yàn)12個(gè)月，吲哚美辛注射液

6、的含量略有下降，但與對(duì)照0個(gè)月比較差異不顯著(p>0.05)。
　　 4.吲哚美辛注射液部分安全性試驗(yàn)。采用改良寇氏法測(cè)定吲哚美辛注射的LD50，以劑量遞增法測(cè)定其對(duì)小鼠的蓄積性和耐受性，常規(guī)法測(cè)定其對(duì)家兔的溶血性和肌肉刺激性。結(jié)果，吲哚美辛注射液LD50=50.2 mg·kg-1，該注射液對(duì)小鼠無蓄積性和耐受性，對(duì)家兔無明顯的溶血性和肌肉刺激性。
　　 5.吲哚美辛注射液部分藥效試驗(yàn)。用蛋白胨致熱新西蘭兔作解熱試驗(yàn)，熱