湖羊GH、MSTN基因遺傳多態(tài)、表達及其與肌肉生長性狀關(guān)聯(lián)分析.pdf

1、本實驗以湖羊為研究對象，以無角陶賽特、薩?？?、特克賽爾、小尾寒羊為參照群體，利用候選基因法，采用PCR-RFLP和PCR-SSCP結(jié)合DNA測序技術(shù)，對GH和MSTN基因部分片段進行了遺傳多態(tài)性檢測，并探討其與湖羊部分生長性狀(初生重、六月齡重、斷奶重)間的關(guān)系，探索GH和MSTN基因作為影響湖羊肌肉生長發(fā)育候選基因的可能性，并對兩個基因在湖羊不同生長階段肌肉組織中表達豐度及其與屠宰性狀的相關(guān)性進行了研究，旨在揭示湖羊肌肉生長性狀的分子

2、遺傳學(xué)基礎(chǔ)，為湖羊肌肉生長性狀的選育提供遺傳學(xué)資料。本研究獲得了以下結(jié)果：
　　 ㈠GH、MSTN遺傳多態(tài)及其與湖羊早期肌肉生長性狀關(guān)聯(lián)分析。
　　 (1)GH基因遺傳多樣性與湖羊早期肌肉生長性狀的關(guān)系。H外顯子-1位點發(fā)現(xiàn)C→T突變；GH外顯子-2位點發(fā)現(xiàn)C→G突變；GH外顯子-3位點發(fā)現(xiàn)A→G突變；GH外顯子-4位點發(fā)現(xiàn)A→G突變?？ǚ竭m合性檢驗結(jié)果表明，研究群體在GH外顯子-3位點處于Hardy-Weinberg遺

3、傳極度不平衡狀態(tài)，GH外顯子-1位點處于Hardy-Weinberg顯著平衡狀態(tài)，其他位點上均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。GH外顯子-1位點的AA和AB兩種基因型在初生重和六月齡重上差異顯著；GH外顯子-2位點的CC基因型在斷奶重上與其他三種基因型間差異顯著；GH外顯子-3位點的GG和GH基因型以及GH外顯子-4位點的MM和LM基因型在三種性狀間差異均不顯著。GH外顯子-3位點的GH基因型和外顯子-4位點的LM基因型是生長

4、性狀的有利基因型。
　　 (2)MSTN基因遺傳多樣性與湖羊早期肌肉生長性狀的關(guān)系。MSTN啟動子位點發(fā)現(xiàn)A→G突變；MSTN外顯子-2位點發(fā)現(xiàn)A→G突變；MSTN3端調(diào)控區(qū)位點發(fā)現(xiàn)G→T突變。卡方適合性檢驗結(jié)果表明，研究群體只在MSTN-3'端調(diào)控區(qū)位點處于Hardy-Weinberg遺傳極度不平衡狀態(tài)，其他位點上均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。MSTN啟動子位點OO、OP和PP三種基因型間對斷奶重和六月齡重均差異

5、顯著；MSTN外顯子-2位點XX和XW兩種基因型間對斷奶重和六月齡重均差異顯著；MSTN3'端調(diào)控區(qū)位點YY和YZ兩種基因型間對三種性狀間差異均不顯著。其中，MSTN啟動子PP基因型和3'端調(diào)控區(qū)的YY基因型是生長性狀有利基因型。
　　 ㈡GH、MSTN基因表達及其與湖羊屠宰性狀關(guān)聯(lián)分析。
　　 (1)湖羊不同生長階段GH基因表達分析。公羊和母羊 GH基因發(fā)育變化趨勢基本一致。出生后隨著日齡的增加，基因相對表達水平在肌肉

6、組織中呈下降趨勢。其中在2日齡相對表達水平最高。公羊60日齡和180日齡與其他日齡之間分別存在顯著差異，其中60日齡、90日齡和180日齡與其他日齡之間分別存在極顯著差異；母羊30與60日齡、120與180日齡與其他日齡之間分別存在顯著差異，其中30、60、90、180日齡與其他日齡之間分別存在極顯著差異。公母之間在180日齡存在顯著差異，在2、30、60、90和120日齡之間存在極顯著差異。
　　 (2)湖羊不同生長階段MST

7、N基因表達分析。出生后隨著日齡的增加，公羊和母羊MSTN基因相對表達水平在肌肉組織中呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。其中在60日齡相對表達水平最高。公羊不同日齡之間分別存在顯著差異，其中30與120日齡與其他日齡之間分別存在極顯著差異；母羊30與90日齡、60與180日齡與其他日齡之間分別存在顯著差異，同時與其他日齡之間分別存在極顯著差異。公母之間在60與180日齡之間存在顯著差異，在30、90和120日齡之間存在極顯著差異。
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