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1、本研究將0.1%的褐藻寡糖(ADO)和5%經(jīng)褐藻膠裂合酶酶解的海藻粉添加到刺參基礎(chǔ)飼料中進(jìn)行周期40d的投喂實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)期間每隔10d取樣一次,取樣后檢測(cè)刺參腸道內(nèi)細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù),體腔液和體壁中免疫相關(guān)因子的活性和免疫相關(guān)酶同工酶的變化,研究海藻粉和褐藻寡糖對(duì)刺參非特異性免疫的影響和初步作用機(jī)制,具體實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和結(jié)果如下:
1.采用平板計(jì)數(shù)的方法測(cè)定刺參腸道內(nèi)細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù)。對(duì)照組刺參腸道細(xì)菌總數(shù)波動(dòng)較大,海藻粉組和褐
2、藻寡糖組細(xì)菌總數(shù)波動(dòng)較??;實(shí)驗(yàn)期間海藻粉組刺參腸道細(xì)菌總數(shù)均小于對(duì)照組,但未形成顯著性差異(P>0.05)。海藻粉組和褐藻寡糖組刺參弧菌總數(shù)占細(xì)菌總數(shù)的比值均大于對(duì)照組,而褐藻寡糖的體外抑菌實(shí)驗(yàn)中褐藻寡糖對(duì)副溶血弧菌沒(méi)有抑制作用,推測(cè)海藻粉和褐藻寡糖對(duì)刺參腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌群弧菌屬部分細(xì)菌有一定的促進(jìn)作用。
2.采用分光光度技術(shù)測(cè)定了海藻粉和褐藻寡糖對(duì)刺參體腔液和體壁組織中免疫相關(guān)因子溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性
3、磷酸酶(AKP)和溶血素活性的影響。結(jié)果表明:實(shí)驗(yàn)期間海藻粉組和褐藻寡糖組刺參免疫相關(guān)因子活性均高于對(duì)照組。海藻粉組和褐藻寡糖組刺參體腔液中ACP、AKP、溶血素和LSZ活性分別在第20d、20d、30d和40d達(dá)到最高,并且均與對(duì)照組形成顯著性差異;海藻粉組和褐藻寡糖組刺參體壁中ACP、AKP和溶血素在其活性最高時(shí)均與對(duì)照組形成顯著性差異。刺參體腔液中免疫相關(guān)因子活性的提高幅度要比體壁大,這可能是因?yàn)轶w腔液包含體腔細(xì)胞和各種體液免疫因
4、子,是機(jī)體免疫反應(yīng)發(fā)生的主要場(chǎng)所,其對(duì)免疫刺激物的免疫刺激反應(yīng)比較強(qiáng)烈,因此活性的提高幅度較大。
3.海藻粉組和褐藻寡糖組刺參體腔液和體壁組織中抗氧化相關(guān)酶超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和過(guò)氧化物酶(POD)活性實(shí)驗(yàn)期間均高于對(duì)照組。體腔液和體壁組織中抗氧化酶均呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì),體腔液中酶活性達(dá)到峰值的時(shí)間比體壁組織提前10d并且酶活性提高幅度較大,推測(cè)是由于體腔液中免疫刺激反應(yīng)比較強(qiáng)烈所致。同工酶結(jié)
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