雙花顆粒對小鼠實驗性肝損傷的保護作用.pdf

1、目的：
　　 本實驗團隊以秀山金銀花為主要原料自主研制成雙花顆粒制劑。本文對雙花顆?？垢螕p傷作用及作用機理進行了研究，觀察雙花顆粒對分別由四氯化碳和酒精誘導的急性肝損傷小鼠的保護作用。為充分開發(fā)雙花顆粒的保肝作用，研制開發(fā)抗肝損傷新藥提供理論基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 1.雙花顆粒對CCl4誘導的小鼠化學性肝損傷的保護作用
　　 將ICR雄性小鼠60只，按體重隨機分為6組：空白對照組、CCl4模型組、硫普

2、羅寧陽性對照組(250mg·Kg-1·bw-1)，雙花顆粒低、中、高劑量組(1.25,2.5,5.0g·Kg-1·bw-1)。每天灌胃2次，空白對照組和模型對照組分別灌胃等容積的生理鹽水。連續(xù)14d。第14d給藥1小時后，除空白對照組外其余各組小鼠按體重均腹腔注射0.10％CCl4橄欖油溶液20mL/kg造模。禁食不禁水，18h后，稱量體重，摘眼球取血，3000r/min離心15分鐘，取血清，測血中AST、ALT的活性。并快速取出肝臟，

3、稱重，計算肝指數(shù)。距肝大葉邊緣0.5cm處取一小塊肝組織，進行冰凍切片，HE染色，觀察肝組織形態(tài)學改變。另制備10％的肝臟勻漿，測定肝組織中的SOD活性及MDA含量。
　　 2.雙花顆粒對小鼠酒精性肝損傷的保護作用
　　 將ICR雄性小鼠60只，按體重隨機分為6組：空白對照組、CCl4模型組、聯(lián)苯雙酯陽性對照組(150mg·Kg-1·bw-1)，雙花顆粒低、中、高劑量組(1.25,2.5,5.0g·Kg-1·bw-1)，

4、空白對照組和模型對照組分別灌胃等容積的生理鹽水。11:00除空白對照組外其余的小鼠按16 mL/kg灌胃56°紅星二鍋頭白酒。每天2次。連續(xù)14d，末次給藥后，按照1的方法進行取材與指標的檢測。
　　 結(jié)果：
　　 1.雙花顆粒對CCl4誘導的小鼠化學性肝損傷的保護作用
　　 結(jié)果顯示，模型組與正常對照組比較，肝臟指數(shù)顯著升高，血清ALT及AST活性均明顯增高，肝組織勻漿中丙二醛含量明顯增高，SOD活性顯著下降(

5、P＜0.01)。模型組小鼠肝細胞索排列紊亂，多數(shù)肝細胞呈細胞水腫，出現(xiàn)脂肪變性，可見肝細胞片狀壞死并伴有炎細胞浸潤，上述結(jié)果表明小鼠急性肝損傷實驗動物模型建立成功。
　　 雙花顆粒低、中、高劑量組(1.25,2.5,5.0g·Kg-1·bw-1)與模型組相比，小鼠肝臟指數(shù)下降，除中劑量組外，高、低組均與模型組比較，差異顯著，(P＜0.05)，血清ALT、AST明顯降低(P＜0.05)，雙花顆粒中劑量和高劑量給藥組可極顯著提高肝組

6、織SOD的活性(P＜0.01)，降低肝損傷小鼠肝組織MDA含量(P＜0.05)。
　　 HE切片顯示：與模型組比較，各治療組均有明顯的改善，肝細胞的壞死、脂肪變性、細胞水腫及炎性浸潤等病理改變減輕，雙花顆粒高劑量組效果好于其它治療組，該組中大多數(shù)小鼠未見脂肪變性和肝細胞壞死現(xiàn)象。
　　 2.雙花顆粒對小鼠酒精性肝損傷的保護作用
　　 結(jié)果顯示，模型組與正常對照組比較，肝臟指數(shù)顯著升高，血清ALT及AST活性均明顯

7、增高，肝組織勻漿中丙二醛含量明顯增高，SOD活性顯著下降(P＜0.01)。HE染色顯示，模型組小鼠肝細胞結(jié)構(gòu)模糊，肝細胞索排列紊亂，肝小葉結(jié)構(gòu)不清，可見多處肝細胞壞死病灶，大部分細胞胞漿出現(xiàn)不同程度疏松，可見形成大量脂滴空泡，肝小葉中央及壞死區(qū)炎性細胞浸潤明顯。上述結(jié)果表明小鼠急性肝損傷實驗動物模型建立成功。
　　 雙花顆粒低、中、高劑量組(1.25,2.5,5.0 g·Kg-1·bw-1)與模型組相比，小鼠肝臟指數(shù)均顯著降低(

8、P＜0.05)，血清中ALT明顯降低(P＜0.01)，AST活性相比模型組有顯著的降低(P＜0.05)。雙花顆粒中劑量和高劑量給藥組可極顯著提高肝組織SOD抗氧化酶的活性(P＜0.05)，降低肝損傷小鼠肝組織MDA含量(P＜0.05)。
　　 HE切片顯示：跟模型組相對照，各劑量給藥組均不同程度的改善小鼠的肝細胞壞死程度變性及炎性細胞浸潤，雙花顆粒能明顯抑制脂肪變性，減少肝細胞的脂滴數(shù)量。雙花顆粒高劑量組效果好于其它治療組，該組