丹參酮ⅡA對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制探討.pdf

1、目的：研究丹參酮II A(tanshinone II A，TSN)對(duì)急慢性肝損傷的保護(hù)作用，并探討其作用機(jī)制。 方法：在借鑒已有關(guān)于TSN抗肝損傷文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上，參照中藥藥理研究方法，分別從化學(xué)性、免疫性的急慢性肝損傷兩個(gè)角度建立CCl4和D-GalN誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷、CCl4誘導(dǎo)的大鼠慢性肝損傷(肝纖維化)以及ConA誘導(dǎo)的小鼠免疫性肝損傷四種損傷機(jī)制不同的動(dòng)物模型。采用流式細(xì)胞術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)、免疫組

2、織化學(xué)技術(shù)、圖像定量分析、蘇木素-伊紅(HE)和馬森(Masson)染色等檢測(cè)方法。觀察T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+比率，細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TGF-β1，氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA和SOD，肝功能血清學(xué)指標(biāo)ALT、AST、ALP、TP、A1b、T.Bili和D.Bili，以及α-SMA、Hyp和NO多種指標(biāo)進(jìn)行研究。 結(jié)果：TSN可顯著減低CCl4所致急性肝損傷小鼠血清ALT和

3、AST；TSN可顯著減低D-GalN所致急性肝損傷小鼠血清ALT租AST，提高肝組織中SOD的活性并降低MDA；TSN可顯著降低CCl4所致肝纖維化大鼠血清ALT、AST、ALP、T.Bili和D.Bili及肝組織中NO、Hyp和MDA，提高血清TP、A1b和肝組織中SOD，明顯改善肝組織損傷程度及膠原纖維增生，減少TGF-β1和α-SMA的表達(dá)：TSN可顯著減低ConA所致急性肝損傷小鼠血清ALT和AST，提高外周血中CD3+、CD4

4、+、CD8+比率，并降低TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4同時(shí)提高IL-10。 結(jié)論：TSN對(duì)多種因素所致的急慢性肝損傷具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能為：(1)抗氧自由基損傷；(2)減少NO含量，減輕炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)：(3)下調(diào)TGF-β1和α-SMA的表達(dá)，抑制HSC的激活；(4)抑制炎性細(xì)胞因子同時(shí)提高抗炎性細(xì)胞因子的釋放，減輕細(xì)胞因子對(duì)肝臟的損傷；(5)提高外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞的比率，調(diào)節(jié)

5、T細(xì)胞亞群間相互平衡和制約。 創(chuàng)新：本研究首次從不同層次、不同方位較為系統(tǒng)地觀察TSN對(duì)肝損傷的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)TSN對(duì)多因素所致實(shí)驗(yàn)性肝損傷均顯示出較好的治療效果。同時(shí)，應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)研究手段并從細(xì)胞分子水平闡明了其作用機(jī)制。本研究首次報(bào)道TSN通過(guò)調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞各亞群的活性及相互間的制約參與對(duì)ConA介導(dǎo)的免疫性肝損傷的保護(hù)；首次報(bào)道各細(xì)胞因子在TSN治療ConA介導(dǎo)的免疫性肝損傷中的不同作用；首次報(bào)道TSN通過(guò)下調(diào)α-S