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文檔簡介
1、目的:研究丹參酮II A(tanshinone II A,TSN)對急慢性肝損傷的保護作用,并探討其作用機制。 方法:在借鑒已有關(guān)于TSN抗肝損傷文獻報道的基礎上,參照中藥藥理研究方法,分別從化學性、免疫性的急慢性肝損傷兩個角度建立CCl4和D-GalN誘導的小鼠急性肝損傷、CCl4誘導的大鼠慢性肝損傷(肝纖維化)以及ConA誘導的小鼠免疫性肝損傷四種損傷機制不同的動物模型。采用流式細胞術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)、免疫組
2、織化學技術(shù)、圖像定量分析、蘇木素-伊紅(HE)和馬森(Masson)染色等檢測方法。觀察T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+比率,細胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TGF-β1,氧化應激指標MDA和SOD,肝功能血清學指標ALT、AST、ALP、TP、A1b、T.Bili和D.Bili,以及α-SMA、Hyp和NO多種指標進行研究。 結(jié)果:TSN可顯著減低CCl4所致急性肝損傷小鼠血清ALT和
3、AST;TSN可顯著減低D-GalN所致急性肝損傷小鼠血清ALT租AST,提高肝組織中SOD的活性并降低MDA;TSN可顯著降低CCl4所致肝纖維化大鼠血清ALT、AST、ALP、T.Bili和D.Bili及肝組織中NO、Hyp和MDA,提高血清TP、A1b和肝組織中SOD,明顯改善肝組織損傷程度及膠原纖維增生,減少TGF-β1和α-SMA的表達:TSN可顯著減低ConA所致急性肝損傷小鼠血清ALT和AST,提高外周血中CD3+、CD4
4、+、CD8+比率,并降低TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4同時提高IL-10。 結(jié)論:TSN對多種因素所致的急慢性肝損傷具有保護作用,其作用機制可能為:(1)抗氧自由基損傷;(2)減少NO含量,減輕炎癥細胞浸潤:(3)下調(diào)TGF-β1和α-SMA的表達,抑制HSC的激活;(4)抑制炎性細胞因子同時提高抗炎性細胞因子的釋放,減輕細胞因子對肝臟的損傷;(5)提高外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細胞的比率,調(diào)節(jié)
5、T細胞亞群間相互平衡和制約。 創(chuàng)新:本研究首次從不同層次、不同方位較為系統(tǒng)地觀察TSN對肝損傷的保護作用,發(fā)現(xiàn)TSN對多因素所致實驗性肝損傷均顯示出較好的治療效果。同時,應用現(xiàn)代分子生物學研究手段并從細胞分子水平闡明了其作用機制。本研究首次報道TSN通過調(diào)節(jié)T淋巴細胞各亞群的活性及相互間的制約參與對ConA介導的免疫性肝損傷的保護;首次報道各細胞因子在TSN治療ConA介導的免疫性肝損傷中的不同作用;首次報道TSN通過下調(diào)α-S
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