苦蕎麥籽粒提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)作用.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)研究苦蕎麥籽粒提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)作用，主要從以下兩個(gè)方面進(jìn)行研究：(1)苦蕎麥籽粒提取物(FTGE)的提取工藝、制備與鑒定；(2)FTGE對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝損傷受試動(dòng)物肝組織中MDA、NO、SOD、GSH-Px水平以及血清ALT、AST活性的影響。 一、FTGE的提取工藝、制備與鑒定 在溶劑優(yōu)選實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇溶劑用量、浸提溫度、乙醇濃度、浸提時(shí)間四種因素，采用L9(34)正交設(shè)計(jì)，篩選FTGE的提取制備工藝。實(shí)

2、驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，以60％乙醇作為苦蕎麥籽?？傸S酮提取的溶劑系統(tǒng)，以10倍于苦蕎麥籽粒粉的用量，在50℃條件下震蕩提取3h，是苦蕎總黃酮提取的最佳工藝條件。 以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)溶液，建立標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，以分光光度法測(cè)定FTGE中生物類(lèi)黃酮的含量，精密度RSD＜2％，加樣平均回收率96.2％。準(zhǔn)確度高，操作簡(jiǎn)便。 經(jīng)薄層層析和顯色反應(yīng)，鑒別FTGE中黃酮類(lèi)化合物種類(lèi)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其中含有類(lèi)似蘆丁、槲皮素結(jié)構(gòu)的多種黃酮類(lèi)化合物。

3、二、FTGE對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)作用 (1)FTGE對(duì)四氯化碳(CCl4)致急性肝損傷的保護(hù)作用。 小白鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只。正常對(duì)照組、CCl4模型組灌胃給予等量純化水，陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給予聯(lián)苯雙酯200mg.kg-1.d-1，低劑量實(shí)驗(yàn)組、中劑量實(shí)驗(yàn)組、高劑量實(shí)驗(yàn)組分別灌胃給予FTGE20，40，60g.kg-1.d-1，各組均連續(xù)給藥7d。7d后，除正常對(duì)照組外，其他各組小鼠均腹腔注射0.1％CCl4花

4、生油溶液10ml.kg-1，禁食24h，摘眼球取血，分離血清，測(cè)試血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)值。分離肝組織，計(jì)算肝臟重量指數(shù)(每10g體重的肝臟毫克數(shù))；同時(shí)測(cè)定肝組織中丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷光甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的活性。制作各組肝組織切片，觀察其組織學(xué)和形態(tài)學(xué)的變化。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)連續(xù)7d灌胃給予20、40、60g.kg-1.d-1FTGE，能明顯

5、抑制肝損傷小鼠血清ALT、AST活性的升高(P＜0.01)，顯著抑制肝組織中MDA、NO含量的升高及SOD、GSH-Px活性的下降(P＜0.01)。說(shuō)明FTGE對(duì)CCl4引起的小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用。 (2)FTGE對(duì)D-半乳糖胺(D-Galn)致急性肝損傷的保護(hù)作用。 取小白鼠60只，雌雄各半，分成6組，每組10只.正常對(duì)照組、D-GalN模型組灌胃給予0.9％NaCl20m1.kg-1.d-1，陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給予

6、聯(lián)苯雙酯150mg.kg-1.d-1，各不同劑量實(shí)驗(yàn)組分別灌胃給予FTGE20，40，60g.kg-1.d-1，各組均連續(xù)給藥12d，末次給藥后1h，除正常對(duì)照組外，其他各組小鼠均腹腔注射10％D-GalN800mg.kg-1，禁食過(guò)夜，16h后摘眼球取血，分離血清，測(cè)試血清中ALT、AST值。分離肝組織，計(jì)算肝臟重量指數(shù)；同時(shí)測(cè)定肝組織中MDA、NO含量以及SOD和GSH-Px的活性。制作各組肝組織切片，觀察其組織學(xué)和形態(tài)學(xué)的變化。實(shí)

7、驗(yàn)發(fā)現(xiàn)連續(xù)12d灌胃給予20、40、60g.kg-1.d-1FTGE，能明顯抑制肝損傷小鼠血清ALT、AST活性的升高(P＜0.01)，顯著抑制肝組織中MDA、NO含量的升高及SOD、GSH-Px活性的下降(P＜0.01)。說(shuō)明FTGE能增強(qiáng)肝組織抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用，對(duì)D-GalN引起的小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用。 結(jié)論以10倍量60％乙醇在50℃條件下震蕩提取的FTGE含有多種黃酮類(lèi)化合物，對(duì)D-GalN和CCl4引起的急性肝損