南江黃羊IGFBP-1和IGFBP-5基因CDS區(qū)克隆與組織表達.pdf

1、IGFBPs在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中能與IGFs結合，調(diào)控IGFs的半衰期，提高IGFs的生理活性。肝臟和局部組織分泌的IGFBPs共同調(diào)控各個組織的生長與發(fā)育，從而促進動物機體的生長。本研究以培育品種南江黃羊為試驗材料，應用RT-PCR和克隆技術從南江黃羊生后0d的肝臟組織總RNA中克隆出南江黃羊IGFBPs基因家族中的IGFBP-1和IGFBP-5兩個基因的全編碼區(qū)序列。采用SYBR-greenI定量PCR技術研究了南江黃羊在生后0d、15

2、d、30d、60d、90d、120d等6個時間點IGFBP-1基因和IGFBP-5基因性別之間表達差異、組織表達差異和同一組織在不同時間點的發(fā)育性變化。結果表明：
　　 (1)克隆得到南江黃羊IGFBP-1和IGFBP-5基因的CDS全序列，長度分別為792bp和816bp，分別編碼263和272個氨基酸。山羊IGFBP-1基因的核苷酸、氨基酸序列和綿羊的一致性分別為99％和98％，與其他物種間的一致性也較高。山羊IGFBP-5

3、與綿羊的一致性分別為98％和99％，與其他物種的一致性在80％以上。
　　 (2)生物信息學分析表明IGFBP-1基因的氨基酸序列整個序列中具有明顯的疏水性區(qū)域，而IGFBP-5基因的氨基酸序列中具有明顯的親水性區(qū)域。在IGFBP-1和IGFBP-5中都具有2個跨膜區(qū)，并且都具有信號肽。翻譯后修飾主要為磷酸化和糖基化，二級結構以無規(guī)卷曲為主，其次為α-螺旋，B-折疊最少。進化樹分析表明，IGFBP-1與IGFBP-5蛋白氨基酸序

4、列與哺乳動物的同源性較高。
　　 (3)在各個時間點的各個組織中都檢測到IGFBP-I和IGFBP-5基因的表達，但相對表達量存在一定的差異。IGFBP-1和IGFBP-5主要產(chǎn)生于肝臟組織，它們在肝臟組織的基因表達量遠遠高于心臟、脾臟、肺臟和肌肉等組織的表達量(0.01＜P＜0.05或P＜0.01)，在肌肉組織中的表達量最低。
　　 (4) IGFBP-1和IGFBP-5基因在南江黃羊在肌肉組織中都有表達的優(yōu)勢時間點，