南江黃羊IGFBP-1和IGFBP-5基因CDS區(qū)克隆與組織表達(dá).pdf

1、IGFBPs在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中能與IGFs結(jié)合，調(diào)控IGFs的半衰期，提高IGFs的生理活性。肝臟和局部組織分泌的IGFBPs共同調(diào)控各個(gè)組織的生長(zhǎng)與發(fā)育，從而促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體的生長(zhǎng)。本研究以培育品種南江黃羊?yàn)樵囼?yàn)材料，應(yīng)用RT-PCR和克隆技術(shù)從南江黃羊生后0d的肝臟組織總RNA中克隆出南江黃羊IGFBPs基因家族中的IGFBP-1和IGFBP-5兩個(gè)基因的全編碼區(qū)序列。采用SYBR-greenI定量PCR技術(shù)研究了南江黃羊在生后0d、15

2、d、30d、60d、90d、120d等6個(gè)時(shí)間點(diǎn)IGFBP-1基因和IGFBP-5基因性別之間表達(dá)差異、組織表達(dá)差異和同一組織在不同時(shí)間點(diǎn)的發(fā)育性變化。結(jié)果表明：
　　 (1)克隆得到南江黃羊IGFBP-1和IGFBP-5基因的CDS全序列，長(zhǎng)度分別為792bp和816bp，分別編碼263和272個(gè)氨基酸。山羊IGFBP-1基因的核苷酸、氨基酸序列和綿羊的一致性分別為99％和98％，與其他物種間的一致性也較高。山羊IGFBP-5

3、與綿羊的一致性分別為98％和99％，與其他物種的一致性在80％以上。
　　 (2)生物信息學(xué)分析表明IGFBP-1基因的氨基酸序列整個(gè)序列中具有明顯的疏水性區(qū)域，而IGFBP-5基因的氨基酸序列中具有明顯的親水性區(qū)域。在IGFBP-1和IGFBP-5中都具有2個(gè)跨膜區(qū)，并且都具有信號(hào)肽。翻譯后修飾主要為磷酸化和糖基化，二級(jí)結(jié)構(gòu)以無(wú)規(guī)卷曲為主，其次為α-螺旋，B-折疊最少。進(jìn)化樹(shù)分析表明，IGFBP-1與IGFBP-5蛋白氨基酸序

4、列與哺乳動(dòng)物的同源性較高。
　　 (3)在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的各個(gè)組織中都檢測(cè)到IGFBP-I和IGFBP-5基因的表達(dá)，但相對(duì)表達(dá)量存在一定的差異。IGFBP-1和IGFBP-5主要產(chǎn)生于肝臟組織，它們?cè)诟闻K組織的基因表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于心臟、脾臟、肺臟和肌肉等組織的表達(dá)量(0.01＜P＜0.05或P＜0.01)，在肌肉組織中的表達(dá)量最低。
　　 (4) IGFBP-1和IGFBP-5基因在南江黃羊在肌肉組織中都有表達(dá)的優(yōu)勢(shì)時(shí)間點(diǎn)，