硫辛酸對(duì)圍產(chǎn)期奶牛的抗氧化作用研究.pdf

1、奶牛的圍產(chǎn)期是指產(chǎn)前3周至產(chǎn)后3周的時(shí)期，主要的感染性疾病和代謝病就發(fā)生在這個(gè)時(shí)期。圍產(chǎn)期奶牛能量需要增加，但干物質(zhì)采食量下降，而分娩后大量泌乳所需要的能量超過(guò)干物質(zhì)采食量所能提供的能量，造成能量負(fù)平衡(NEB)，脂肪動(dòng)員是圍產(chǎn)期奶牛能量負(fù)平衡的必然結(jié)果。另外，奶牛從妊娠到泌乳要經(jīng)歷巨大的代謝和生理適應(yīng)性，臨產(chǎn)階段活性氧(ROS)生成增加和抗氧化防御能力之間的不平衡使奶牛處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能和炎癥應(yīng)答能力下降，對(duì)疾病的易感

2、性增強(qiáng)，是圍產(chǎn)期疾病發(fā)生的主要原因。本研究在揭示圍產(chǎn)期奶牛肝臟功能、脂肪代謝和氧化應(yīng)激狀態(tài)變化的基礎(chǔ)上，探討了硫辛酸對(duì)圍產(chǎn)期奶牛的抗氧化作用及安全性評(píng)價(jià)，為硫辛酸在圍產(chǎn)期奶牛的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。
　　 試驗(yàn)一、奶牛不同生理階段血清微量元素含量和氧化狀態(tài)的研究
　　 選擇3～4月齡犢牛、后備母牛和成年母牛(產(chǎn)奶后期、產(chǎn)前及產(chǎn)后1月內(nèi))，測(cè)定了血清Se、Cu、Zn、Mn、Fe含量及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、超氧化

3、物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量。結(jié)果表明，除Zn含量外，所測(cè)元素含量犢牛明顯低于后備母牛和成年牛(P＜0.05或P＜0.01)，后備母牛和成年牛之間差異不顯著(P＞0.05)，血清Se含量在產(chǎn)奶后期和產(chǎn)前明顯下降(P＜0.05)，血清Cu、Mn含量在產(chǎn)后1月內(nèi)有降低的趨勢(shì)，但與產(chǎn)前相比均差異不顯著(P＞0.05)；所測(cè)血清氧化狀態(tài)指標(biāo)與年齡無(wú)明顯關(guān)系，在妊娠末期和泌乳早期發(fā)生改變，血清CAT、GSH-

4、Px、SOD活性和MDA含量在產(chǎn)前和產(chǎn)后1月內(nèi)最高。表明犢牛上述所測(cè)指標(biāo)最低，奶牛產(chǎn)前和泌乳早期血清微量元素含量和氧化狀態(tài)失衡。
　　 試驗(yàn)二、奶牛圍產(chǎn)期脂肪代謝、肝臟功能和氧化指標(biāo)變化的研究
　　 選擇產(chǎn)前30d的奶牛30頭，分別在產(chǎn)前30、20、10、5、0d和產(chǎn)后5、10、15、20d采集血清，檢測(cè)脂肪代謝指標(biāo)(GT、Chol、NEFA、HDL、LDL含量)、肝臟功能指標(biāo)(AKP、LDH、ALT、AST活性)和脂質(zhì)

5、過(guò)氧化指標(biāo)(GSH-Px、SOD、CAT活性和MDA含量)。結(jié)果表明：①血清TG和Chol含量產(chǎn)前呈降低趨勢(shì)，TG含量產(chǎn)犢當(dāng)天急劇下降，Chol含量產(chǎn)后逐漸升高；血清NEFA含量產(chǎn)前變化不明顯，產(chǎn)犢當(dāng)天急劇升高，產(chǎn)犢5d開(kāi)始降低；血清LDL和HDL水平產(chǎn)前呈降低趨勢(shì)，產(chǎn)后逐漸升高。②血清LDH和AST活性分別在產(chǎn)前第5d或產(chǎn)犢當(dāng)天活性最高；ALT和AKP活性各時(shí)間段變化不明顯。③血清CAT和GSH-Px活性在產(chǎn)前呈降低的趨勢(shì)，產(chǎn)犢當(dāng)天升

6、高，之后逐漸降低；血清SOD活性產(chǎn)前呈升高趨勢(shì)，產(chǎn)犢當(dāng)天達(dá)到最高峰，之后逐漸降低；血清MDA含量在產(chǎn)前5d開(kāi)始升高，產(chǎn)犢5d后逐漸降低。上述結(jié)果部分時(shí)段呈顯著或極顯著差異(P＜0.05或P＜0.01)。表明奶牛圍產(chǎn)期發(fā)生脂肪動(dòng)員和氧化狀態(tài)失衡，并因肝臟脂肪含量增加導(dǎo)致肝臟功能受損。
　　 試驗(yàn)三、硫辛酸對(duì)圍產(chǎn)期奶牛氧化狀態(tài)的影響
　　 選擇產(chǎn)前約20d的干乳期奶牛48頭，分為4組，Ⅰ組為對(duì)照組，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別每天補(bǔ)飼硫

7、辛酸3、5、8g/頭，連續(xù)50d，測(cè)定了血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果表明，Ⅲ和Ⅳ組血清GSH-Px活性第20d開(kāi)始顯著或極顯著高于對(duì)照組(P＜0.05或P＜0.01)；Ⅲ和Ⅳ組血清SOD活性第40d開(kāi)始顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；Ⅱ組血清CAT活性在第30d顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，Ⅲ、Ⅳ組第30～50d均顯著高于對(duì)照組(P＜0

8、.05)；Ⅲ組血清MDA含量在第40d、Ⅳ組在第50d顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。表明補(bǔ)充硫辛酸可明顯改善圍產(chǎn)期奶牛的抗氧化能力。
　　 試驗(yàn)四、硫辛酸對(duì)圍產(chǎn)期奶牛血清脂肪代謝和肝功能酶的影響
　　 選擇產(chǎn)前約20d的干乳期奶牛48頭，分為4組，Ⅰ組為對(duì)照組，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別每天補(bǔ)飼硫辛酸3、5、8g/頭，連續(xù)50d，檢測(cè)血清甘油三酯(GT)、總膽固醇(Chol)、非酯化脂肪酸(NEFA)、高密度脂蛋白(HDL)、低

9、密度脂蛋白(LDL)含量及血清堿性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)、乳酸脫氫酶(LDH)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性。結(jié)果表明，硫辛酸可使所測(cè)脂肪代謝指標(biāo)降低，Ⅲ、Ⅳ組血清NEFA含量第20d后低于對(duì)照組，Ⅳ組第30d與對(duì)照組出現(xiàn)顯著差異(P＜0.05)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組血清AST活性第30d后均顯著或極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01或P＜0.05)；其余所測(cè)指標(biāo)各組在不同時(shí)間段均無(wú)明顯的統(tǒng)計(jì)

10、學(xué)差異(P＞0.05)。表明硫辛酸可改善圍產(chǎn)期奶牛的脂肪代謝，能有效保護(hù)奶牛圍產(chǎn)期肝臟功能的損傷。
　　 試驗(yàn)五、硫辛酸在奶牛的安全性評(píng)價(jià)
　　 對(duì)奶牛一次口服硫辛酸50g/頭或100g/頭，或連續(xù)15d補(bǔ)充硫辛酸10g/頭，通過(guò)臨床觀(guān)察、血清生化指標(biāo)的檢測(cè)，進(jìn)行了硫辛酸對(duì)奶牛的安全性評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：①一次口服硫辛酸50g/頭，連續(xù)觀(guān)察1周未見(jiàn)臨床異常表現(xiàn)，血清所測(cè)生化指標(biāo)均未發(fā)生明顯變化(P＞0.05)。②一次口服硫辛

11、酸100g/頭，3h后逐漸出現(xiàn)中毒癥狀，7h全部死亡。③每天補(bǔ)充硫辛酸10g/頭，第9d開(kāi)始血清SOD和CAT活性顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；MDA含量呈降低趨勢(shì)，第12d與對(duì)照組有顯著差異(P＜0.05)；其余生化指標(biāo)均差異不顯著(P＞0.05)。表明硫辛酸對(duì)奶牛的一次口服安全劑量≤50g/頭(約77～100mg/kg體重)，一次口服致死劑量為100g/頭(約154～200mg/kg體重)，硫辛酸作為奶牛生物抗氧化劑應(yīng)用時(shí)劑量以不