UPLC-MS-MS測定豬體內(nèi)復(fù)方泰樂菌素-阿莫西林殘留的研究.pdf

1、酒石酸泰樂菌素-阿莫西林鈉散劑是自行研制的防治豬鏈球菌病的復(fù)方藥物，其中泰樂菌素是一種天然大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌都具有很高的殺滅作用。歐盟規(guī)定泰樂菌素在肉制品中的最高殘留限量為0.1mg/kg，我國農(nóng)業(yè)部于2002年規(guī)定了泰樂菌素在肉制品中的最高殘留限量為0.2mg/kg。阿莫西林，又名羥氨芐青霉素，屬于β-內(nèi)酰胺抗生素，對金黃色葡萄球菌、胸膜肺炎放線桿菌等幾種常見的致病菌具有較強(qiáng)的抗菌活性，歐盟和我國農(nóng)業(yè)部規(guī)定

2、其在可食性組織中的最高殘留限量均為0.05mg/kg。
　　 為了保證該復(fù)方藥物在豬場的規(guī)范使用，保護(hù)人類的身體健康以及畜牧業(yè)的健康發(fā)展，故應(yīng)建立殘留監(jiān)控體系并確定其休藥期。
　　 本試驗(yàn)建立了豬心臟、肝臟、肺臟、腎臟、肌肉和脂肪中酒石酸泰樂菌素的超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜的測定方法。經(jīng)乙腈脫脂脫蛋白，C18固相萃取柱凈化，乙酸乙酯洗脫。超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定，電噴霧正離子源進(jìn)行離子化，多級反應(yīng)監(jiān)測方式對酒石酸

3、泰樂菌素的母離子及其子離子進(jìn)行監(jiān)測；用全掃描方式對該物質(zhì)進(jìn)行了結(jié)構(gòu)解析。本方法研究的酒石酸泰樂菌素的線性范圍為5ng/mL～500ng/mL，線性相關(guān)系數(shù)0.9993～0.9996；在0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg的3個(gè)添加水平的回收率在72.6±4.14％～88.3±5.12％；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.5％～5.9％；各組織的日內(nèi)變異系數(shù)在7.3％～10.1％，日間變異系數(shù)在7.2％～14％。方法檢出限為5ng/g，

4、定量限為15ng/g。
　　 本試驗(yàn)建立了豬組織中阿莫西林鈉的超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜的測定方法。經(jīng)乙腈-水（15/2，v/v）溶液脫脂脫蛋白，HLB固相萃取柱凈化，乙腈洗脫。超高效液相色譜-質(zhì)譜測定。本方法研究的阿莫西林鈉的線性范圍為0.01μg/mL～1μg/mL，線性相關(guān)系數(shù)0.9992～0.9995；在0.025mg/kg、0.05mg/kg、0.1mg/kg的3個(gè)添加水平的回收率在65.9±3.49％～73.2±

5、3.95％；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在5.1％～6.5％；各組織的日內(nèi)變異系數(shù)在5.8％～7.8％，日間變異系數(shù)在5.1％～12.5％。方法檢出限0.01μg/g，定量限為0.03μg/g。
　　 分析酒石酸泰樂菌素-阿莫西林鈉散劑在豬組織中的殘留消除規(guī)律發(fā)現(xiàn)，休藥12h，酒石酸泰樂菌素殘留濃度在肝臟和腎臟的濃度最高，分別是0.274±0.03mg/kg和0.234±0.05mg/kg。休藥36h，酒石酸泰樂菌素只有在肌肉和脂肪中的殘留檢不

6、出，肝臟、腎臟、肺臟和心臟的殘留濃度分別是0.11±0.03mg/kg、0.06±0.04 mg/kg、0.05±0.01 mg/kg和0.05±0.03 mg/kg，均低于歐盟規(guī)定的最高殘留限量。休藥12h，阿莫西林鈉在肝臟和腎臟殘留濃度最高，分別是0.20±0.05mg/kg、0.18±0.05mg/kg，依次為心臟、肺臟、肌肉和脂肪。休藥60h，只有肝臟中檢出阿莫西林鈉，濃度是0.02±0.01mg/kg，低于其最高殘留限量。根據(jù)