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1、目的:測(cè)定天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因轉(zhuǎn)化“遵椒1號(hào)”辣椒中GAFP的的抗真菌活性,獲得具有抗真菌能力的辣椒新品種。
方法:(1)陽離子交換層析分離純化轉(zhuǎn)基因辣椒GAFP;(2)SDS-PAGE凝膠電泳鑒定GAFP;(3)微生物稀釋分離方法分離室內(nèi)辣椒病株及野生辣椒病株中的真菌;(4)采用生長(zhǎng)速率法分析轉(zhuǎn)基因辣椒GAFP對(duì)頭狀地霉菌、鐮刀狀霉菌及綠色木霉菌的抗真菌能力,其結(jié)果用抑制率(%)表示,作為實(shí)驗(yàn)組(A組);對(duì)照組
2、為野生天麻GAFP(B1組)和非轉(zhuǎn)基因辣椒蛋白提取物(B2組)。
結(jié)果:(1)SDS-PAGE凝膠電泳結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因辣椒中有GAFP特異條帶;(2)從室內(nèi)辣椒病株及野生辣椒病株中分離出了真菌:頭狀地霉菌和鐮刀狀霉菌;(3)轉(zhuǎn)基因辣椒GAFP在0.0125mg/ml,0.025mg/ml,0.05mg/ml,0.1mg/ml,0.2mg/ml不同濃度下對(duì)頭狀地霉菌,鐮刀狀霉菌和綠色木霉菌都有不同程度的抑制作用,在0.2mg/
3、ml濃度下對(duì)頭狀地霉菌和鐮刀狀霉菌的抑制率都超過50%,分別達(dá)61.38%和54.52%,對(duì)綠色木霉菌的抑制率為45.65%。與空白對(duì)照組相比,均有顯著性差異(P<0.05);(4)野塵天麻GAFP在0.0125mg/ml,0.025mg/ml,0.05mg/ml,0.1mg/ml,0.2mg/ml不同濃度下對(duì)頭狀地霉菌,鐮刀狀霉菌和綠色木霉菌都有不同程度的抑制作用,在0.2mg/ml濃度下對(duì)頭狀地霉菌、綠色木霉菌和鐮刀狀霉菌的抑制率都
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