轉(zhuǎn)基因辣椒表達(dá)蛋白GAFP的活性測(cè)定及抗真菌活性分析.pdf

1、目的：測(cè)定天麻抗真菌蛋白（GAFP）基因轉(zhuǎn)化“遵椒1號(hào)”辣椒中GAFP的的抗真菌活性，獲得具有抗真菌能力的辣椒新品種。
　　 方法：（1）陽(yáng)離子交換層析分離純化轉(zhuǎn)基因辣椒GAFP；（2）SDS-PAGE凝膠電泳鑒定GAFP；（3）微生物稀釋分離方法分離室內(nèi)辣椒病株及野生辣椒病株中的真菌；（4）采用生長(zhǎng)速率法分析轉(zhuǎn)基因辣椒GAFP對(duì)頭狀地霉菌、鐮刀狀霉菌及綠色木霉菌的抗真菌能力，其結(jié)果用抑制率（％）表示，作為實(shí)驗(yàn)組（A組）；對(duì)照組

2、為野生天麻GAFP（B1組）和非轉(zhuǎn)基因辣椒蛋白提取物（B2組）。
　　 結(jié)果：（1）SDS-PAGE凝膠電泳結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因辣椒中有GAFP特異條帶；（2）從室內(nèi)辣椒病株及野生辣椒病株中分離出了真菌：頭狀地霉菌和鐮刀狀霉菌；（3）轉(zhuǎn)基因辣椒GAFP在0.0125mg/ml，0.025mg/ml，0.05mg/ml，0.1mg/ml，0.2mg/ml不同濃度下對(duì)頭狀地霉菌，鐮刀狀霉菌和綠色木霉菌都有不同程度的抑制作用，在0.2mg/

3、ml濃度下對(duì)頭狀地霉菌和鐮刀狀霉菌的抑制率都超過(guò)50％，分別達(dá)61.38％和54.52％，對(duì)綠色木霉菌的抑制率為45.65％。與空白對(duì)照組相比，均有顯著性差異（P<0.05）；（4）野塵天麻GAFP在0.0125mg/ml，0.025mg/ml，0.05mg/ml，0.1mg/ml，0.2mg/ml不同濃度下對(duì)頭狀地霉菌，鐮刀狀霉菌和綠色木霉菌都有不同程度的抑制作用，在0.2mg/ml濃度下對(duì)頭狀地霉菌、綠色木霉菌和鐮刀狀霉菌的抑制率都