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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文綠色熒光蛋白基因標記蘇云金芽胞桿菌及微量熱特性姓名:林曉燕申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:喻子牛孫明20030522解離載體攜帶外源基因的菌株的代謝熱少于以ori44、oril030兩種質(zhì)粒復(fù)制區(qū)構(gòu)建的GFP解離載體。研究還發(fā)現(xiàn)含不同啟動子驅(qū)動GFP的菌株向外釋放的代謝熱也不同,含芽胞依賴型啟動子BtlBtll的菌株BMB0462B的代謝熱少于含非芽胞依賴型的啟動子pr03A菌株BMBIM63B,含蠟狀
2、芽胞桿菌啟動子proBc的菌株BMB0461B的代謝熱界于兩者之間。根據(jù)蛋白表達量同菌株代謝熱的關(guān)系從9種GFP表達解離載體中篩選出一種高效表達GFP的載體pBMB0472用以標記蘇云金芽胞桿菌。5gt;v基因標記蘇云金芽胞桿菌野生菌將GFP解離載體pBMBlM72以及融合蛋白載體pBMB0474分別電轉(zhuǎn)化到擬步行甲亞種YBT1765中,得到標記的野生型蘇云金芽胞杼菌YBTl76572B、YBTl76574。PCR擴增結(jié)果顯示均可從兩株
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