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1、血紅素加氧酶(Heme oxygenase)在哺乳動(dòng)物的細(xì)胞生存扣穩(wěn)定有著廣泛的生物學(xué)作用。最近研究表明HO參與調(diào)節(jié)植物抵抗鹽害、誘導(dǎo)氣孔關(guān)閉、緩解重金屬脅迫和促進(jìn)不定根發(fā)生等過(guò)程。
為了探查HO在鹽誘導(dǎo)的側(cè)根發(fā)生中的作用,本文研究了內(nèi)源HO的變化以及對(duì)側(cè)根發(fā)生的影響和相關(guān)的信號(hào)通路。結(jié)果發(fā)現(xiàn)NaCl對(duì)側(cè)根的誘導(dǎo)呈濃度依賴方式,并促進(jìn)番茄幼苗根部HO的轉(zhuǎn)錄水平、蛋白表達(dá)及活性。為了進(jìn)一步驗(yàn)證HO是否參與了鹽誘導(dǎo)的側(cè)根發(fā)生過(guò)
2、程,本文采用了HO-1專一性抑制劑ZnPP和活性誘導(dǎo)劑Hemin對(duì)番茄幼苗側(cè)根發(fā)生進(jìn)行了分析,發(fā)現(xiàn)ZnPP能夠逆轉(zhuǎn)5 mM NaCl對(duì)側(cè)根發(fā)生及HO表達(dá)的誘導(dǎo)作用;而Hemin能恢復(fù)25 mM NaCl對(duì)側(cè)根發(fā)生及HO活性的抑制作用。進(jìn)一步的研究還發(fā)現(xiàn),NaCl通過(guò)上調(diào)細(xì)胞周期基因LeCYCD3;1、LeCDKA1、LeCYCA2;1和LeCYCA3;1,以及下調(diào)LeKRP2的轉(zhuǎn)錄來(lái)促進(jìn)側(cè)根的發(fā)生,而ZnPP則能起逆轉(zhuǎn)作用。上述結(jié)果表明
3、HO參與了鹽誘導(dǎo)的側(cè)根發(fā)生,并與其對(duì)細(xì)胞周期基因的表達(dá)有關(guān)。
此外,本文還研究了H2O2在鹽誘導(dǎo)的番茄側(cè)根發(fā)生中的作用。熒光檢測(cè)發(fā)現(xiàn)鹽誘導(dǎo)的番茄幼苗根部的H2O2能被其清除劑CAT和DMTU清除,進(jìn)而逆轉(zhuǎn)鹽對(duì)側(cè)根發(fā)生的誘導(dǎo)作用;CAT和DMTU還能夠顯著逆轉(zhuǎn)鹽對(duì)HO基因轉(zhuǎn)錄、蛋白表達(dá)及活性的誘導(dǎo);用外源的H2O2模擬內(nèi)源H2O2水平的結(jié)果發(fā)現(xiàn),其以濃度依賴效應(yīng)顯著促進(jìn)根部H2O2熒光的產(chǎn)生和側(cè)根發(fā)生;H2O2對(duì)HO基因轉(zhuǎn)錄
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