金華豬與長(zhǎng)白豬生長(zhǎng)和肌肉發(fā)育差異的機(jī)理研究.pdf

1、本試驗(yàn)以斷奶后的金華和長(zhǎng)白仔豬為試驗(yàn)對(duì)象，進(jìn)行了飼養(yǎng)試驗(yàn)、屠宰試驗(yàn)，從肌肉發(fā)育相關(guān)激素和基因表達(dá)的發(fā)育等方面揭示兩品種豬生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)、肌肉發(fā)育變化的種間差異并初步探討了其機(jī)理，為豬肉品質(zhì)調(diào)控技術(shù)的創(chuàng)建以及地方品種和外來(lái)品種間的雜交利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 選擇年齡相同的金華和長(zhǎng)白仔豬各18頭（共36頭），分別于28日齡斷奶后，按照品種分成2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭（公母各半）。金華與長(zhǎng)白豬在相同的條件下飼養(yǎng)，自由采食、

2、自由飲水。預(yù)試期7天，正試90天。在每個(gè)屠宰日齡（35，80和125日齡），分別從各組的每個(gè)重復(fù)中選取體重相近的試驗(yàn)豬2頭（公母各半），每個(gè)品種6頭，共12頭。按常規(guī)方法進(jìn)行屠宰，測(cè)定胴體組成。并采集血清、肌肉組織樣品進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)分析。
　　 根據(jù)Genebank登錄的豬肌肉組織中MSTN、MyOD、MyoG、MyHCI、2a、2b、2x和內(nèi)參β-actin基因序列設(shè)計(jì)引物，分別以肌肉組織mRNA為模板，經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)，

3、克隆得到了相應(yīng)的MSTN、MyOD、MyoG、MyHCI、2a、2b、2x和內(nèi)參β-aetin的基因片段。對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行序列分析表明，得到的MSTN、MyOD、MyoG、MyHCI、2a、2b、2x和內(nèi)參β-actin基因序列與Genebank登錄的相應(yīng)基因片段同源性均達(dá)到了98％以上。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討了PCR反應(yīng)中適宜的退火溫度、Mg2+濃度和循環(huán)數(shù)，構(gòu)建了適合相應(yīng)基因序列的優(yōu)化半定量RT-PCR法，以用于研究金華豬與長(zhǎng)白豬肌肉

4、發(fā)育相關(guān)基因mRNA表達(dá)變化及種間差異。
　　 屠宰試驗(yàn)結(jié)果表明：金華與長(zhǎng)白豬胴組成和肉品質(zhì)參數(shù)的發(fā)育性變化模式基本相同，金華豬肌內(nèi)脂肪含量在125日齡時(shí)比長(zhǎng)白豬高31.25％(P<0.05)，大理石紋評(píng)分在35，80和125日齡時(shí)分別比長(zhǎng)白豬高50.48％(P<0.05)，50.00％(p<0.05)和28.92％(P<0.05)，肉色評(píng)分值在125日齡時(shí)比長(zhǎng)白豬高22.87％(P<0.05)。而金華豬胴體瘦肉率在35，80和

5、125日齡時(shí)分別比長(zhǎng)白豬低35.99％（P<0.01），25.25％(P<0.01)和29.94(P<0.01)，眼肌面積分別比長(zhǎng)白豬低20.73％（P<0.05），50.98％(P<0.001)和50.20％(P<0.001)，滴水損失分別比長(zhǎng)白豬低34.43％(P<0.05),34.00％(P<0.05)和33.08％(P<0.05)。
　　 血清指標(biāo)分析結(jié)果示：金華與長(zhǎng)白豬血清IGF-I、胰島素、T3和T3、濃度發(fā)育模式一

6、致，血清IGF-I、胰島素濃度隨日齡的增加而顯著升高（P<0.05），而血清T2和T3水平則隨日齡的增加而顯著降低(P<0.05)。金華豬血清胰島素水平在35、80和125日齡時(shí)分別比長(zhǎng)白豬高41.04％(P<0.05)，53.04％(P<0.01)和63.28％(P<0.01)。血清IGF-I水平分別比長(zhǎng)白豬低38.13％（P<0.01），37.58％(P<0.01)和19.77％（P<0.05），血清T4水平比長(zhǎng)白豬低30.77％(

7、P　　 肌肉樣品分析結(jié)果表明：金華與長(zhǎng)白豬肌肉組織中MSTN、MyoD和MyoGmRNA豐度發(fā)育模式基本一致(P<0.05)，金華豬MyoD mRNA豐度值在35、80和125日齡時(shí)分別比長(zhǎng)白豬低288％(P

8、O.05)。金華豬MyoD mRNA水平與其胴體瘦肉率之間存在顯著的正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.783(P<0.05)，而長(zhǎng)白豬MyoD mRNA水平與其胴體瘦肉率之間卻存在顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)-0.888(P<0.05)。在35日齡時(shí)，金華豬背最長(zhǎng)肌中MyoG基因的表達(dá)量比長(zhǎng)白豬低77.78％(P<0.05)。
　　 兩品種豬肌肉中MyHC I、2a、2b、2x的發(fā)育模式一致，在35、80和125日齡時(shí)金華豬肌肉組織中My

9、HC I mRNA豐度分別比長(zhǎng)白豬高15.01％(P<0.05)、15.85％(P<0.05)和19.82％(P<0.05)。MyHC2a mRNA豐度分別比長(zhǎng)白豬高7.76％(P　　 結(jié)論：1.金華豬與長(zhǎng)白豬生產(chǎn)性能和肉品質(zhì)具

10、有基本一致的發(fā)育規(guī)律，與長(zhǎng)白豬相比，金華豬有較代的生產(chǎn)性能和較優(yōu)良的肉品質(zhì)特征。2.金華豬與長(zhǎng)白豬生長(zhǎng)和肌肉發(fā)育相關(guān)激素的發(fā)育模式基本一致，與長(zhǎng)白豬相比金華豬有較高的胰島素水平，而有較低的GH、IGF-I和T4水平。3.金華豬與長(zhǎng)白豬肌肉發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)規(guī)律基本一致，與長(zhǎng)白豬相比金華豬具有較低的MSTN、MyoD和MyoG mRNA豐度。4.金華豬與長(zhǎng)白豬肌纖維發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)規(guī)律基本相似，與長(zhǎng)白豬相比金華豬有較高的MyHC I和2b