擬南芥CBF1、CBF4基因及啟動(dòng)子的克隆與植物表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf

1、植物的生長(zhǎng)發(fā)育多受到各種環(huán)境因子的脅迫，低溫和干旱成為主要的逆境脅迫因子。紫花苜蓿是多年生栽培牧草，號(hào)稱“牧草之王”。它不但營(yíng)養(yǎng)豐富、適應(yīng)性廣、適口性強(qiáng)而且可以增加土壤肥力，但苜蓿的生長(zhǎng)發(fā)育也同樣受到低溫和干旱環(huán)境因子的脅迫。因此選育高抗優(yōu)質(zhì)的苜蓿品種成為育種工作者亟待解決的問題。 為研究上述基因家族里的其中的兩個(gè)基因CBF1、CBF4對(duì)我國(guó)優(yōu)良豆科牧草——苜蓿的抗寒、抗旱性的改良作用，本論文從擬南芥植物中利用PCR方法分離得到

2、了上述兩個(gè)基因及CBF1的啟動(dòng)子，并且分別構(gòu)建了由CaMV35s啟動(dòng)子和來源于擬南芥的CBF1啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的植物轉(zhuǎn)化表達(dá)載體，PBI121—CBF1、PBI—PRO—CBF1、PBI121—CBF4。為下一步研究利用上述兩個(gè)基因來達(dá)到改良苜?？鼓嫘缘哪康牡於藞?jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 研究獲得的初步結(jié)果：1、通過PCR方法篩選出能夠穩(wěn)定分離基因CBF1的引物對(duì)一：通過PCR方法篩選出能夠穩(wěn)定分離CBF1基因啟動(dòng)子的引物對(duì)三；通過PCR方法篩選