抗新城疫病毒融合蛋白單克隆抗體的特性及初步應(yīng)用.pdf

1、新城疫(Newcastle disease，ND)是威脅養(yǎng)禽業(yè)的一種重要傳染病，給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的損失，國際獸醫(yī)局將其與高致病性禽流感一起列為危害養(yǎng)禽業(yè)的必須報(bào)告的疾病。自1997年以來，華南和華東地區(qū)部分省市發(fā)生了新城疫病毒(Newcastledisease virus，NDV)感染鵝的病例，雖然各地采取了積極的防治措施，但該病仍然蔓延、流行。本研究對(duì)獲得的抗NDV F蛋白單克隆抗體是否能夠?qū)Σ煌瑏碓吹男鲁且卟《具M(jìn)行了分析，并初步建立

2、了快速檢測鵝源新城疫病毒的方法，為更好地診斷、防控新城疫打下基礎(chǔ)。 采用感染NDV F48E8的雞胚成纖維細(xì)胞建立了間接免疫熒光試驗(yàn)，對(duì)本室保存的抗NDV F蛋白的原始雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、亞克隆，篩選出12株能穩(wěn)定分泌抗NDV F蛋白的陽性雜交瘤細(xì)胞株，分別命名為NDV-F1B4、NDV-F4B11、NDV-F5F3、NDV-F4C1、NDV-F2H10、NDV-F6F8、NDV-F4H10、NDV-F ID10、NDV-F2F

3、12、NDV-F4D9、NDV-F5C6、NDV-F6C4，并通過間接免疫熒光試驗(yàn)測定了所獲得的12株抗NDV F蛋白單抗腹水的效價(jià)，IFA效價(jià)在1:1600到1:12800；8株單抗屬于IgG2a，2株單抗屬于IgG2b: IgM和IgG1各1株；中和試驗(yàn)證明，12株抗NDV F單克隆抗體中，3株單抗有一定程度的中和價(jià)，其中單抗NDV-F4D9的中和能力最強(qiáng)：所有單抗在Western blot試驗(yàn)中均能識(shí)別不同來源NDV的F蛋白。