精制抗新城疫病毒卵黃抗體的研制.pdf

1、多年來，高免卵黃抗體在我國實際畜牧業(yè)生產中得到了極為廣泛的應用，并取得了肯定的療效，但由于制備卵黃抗體的高免蛋大部分為非SPF蛋，存在造成多種蛋生傳染病傳播的隱患，同時其含有大量蛋白質、磷脂等大分子結構的物質，容易引起注射后難以吸收，并會造成腫脹、出血、壞死甚至嚴重的過敏反應，以上的缺陷限制了其的大規(guī)模臨床使用以及作為新獸藥生物制品制劑的可能。本試驗以抗新城疫粗制高免卵黃抗體為實驗對象，對卵黃抗體進行脫脂和外源性病毒滅活的處理，以求研究

2、出既適合大規(guī)?；a需要又符合新獸藥生物制品申請標準的精制卵黃抗體生產工藝。首先對卵黃抗體進行脫脂處理，采用乙酸—乙酸鈉緩沖液(pH為5.0，濃度為0.05mol／1)沉淀法結合超濾法、以及微量表面活性劑沉淀法(PLONIc)兩種方法去除卵黃抗體中的脂肪。然后，采用C<,o>60輻照法、溫度滅活法兩種方法進行外源性病毒的滅活處理，并參考人用血液制品的外源病毒滅活檢驗標準對精制卵黃抗體的外源性病毒滅活效果進行檢驗，最后對精制卵黃液進行了安

3、全檢驗和動物應用試驗。結果表明：卵黃原液用0.05mol／1，pH5.0的乙酸—乙酸鈉緩沖液1：9倍稀釋，攪拌20min，4℃靜置10小時后，5000轉／min離心30min，回收上清，然后所得上清液經分子量為100KD的有機陶瓷膜超濾后，截留抗體總回收率為83.5％；在卵黃原液與生理鹽水的1：3混合液中加入一定量的PLONIC，使其終濃度為0.89％，攪拌20min，4℃靜置6小時后，1000轉／min離心30min，所的抗體回收率為

4、87％。去脂后的卵黃抗體液經6KGY的C060射線輻照后，性狀穩(wěn)定，抗體效價不損失，對添加的EDS-76指示病毒(HA=2<'6>)的滅活效果達到了滅活標準要求；同時去脂后的卵黃抗體液用60℃水浴10h，處理后性狀穩(wěn)定，對添加的法氏囊指示病毒(10<'6.ELD<,50>／ml)的滅活效果也達到了滅活標準要求。同時抗體液無菌，無支原體，無外源性病毒和白血病病毒存在，對雞胚和14日齡雛雞安全，抗體消長動態(tài)試驗表明去脂滅活抗體液普遍達到峰值