不同品種桉葉有效部位及抗菌藥效研究.pdf

1、為探討不同品種桉葉有機溶劑萃取有效部位的抗菌活性、主要品種的安全性、對三黃肉仔雞的生產(chǎn)性能、免疫及抗氧化性能的影響,為其在畜禽生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供研究基礎(chǔ)。本研究采用抗菌中藥體外藥敏試驗的平皿打洞法和試管兩倍稀釋法比較不同品種、不同提取工藝處理的DH201-2、GL-12、GL-16、DH32-29、GL-9、U6六個品種桉葉對蠟狀芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、多殺性巴氏桿菌和副溶血性弧菌四種常見致病菌的體外抑制效果；采用兩相溶劑萃取法分離

2、篩選GL-9、U6品種桉葉不同有機溶劑萃取組分及各組分藥液對埃希氏大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、腸炎沙門氏菌、多殺性巴氏桿菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌、霍亂弧菌的抑制效果；采用圓形濾紙徑向?qū)游龇z測各組分成分；并對各抗菌活性成分進(jìn)行逐一提取及體外藥物敏感性測定；通過正交試驗探討抗菌有效部位最優(yōu)提取條件及影響因素；按照急性毒性試驗要求測定GL-9、U6桉葉的半數(shù)致死量。選用150只1日齡三黃肉仔雞,公母各半,隨機分為5組,每組30

3、只,Ⅰ～Ⅲ組分別在基礎(chǔ)日糧上添加0.25％、0.5％、1％的U6桉葉粉,Ⅳ組在日糧中添加0.5％的雙黃連粉,Ⅴ為空白對照組,飼喂基礎(chǔ)日糧。每周測定體重、采食量,計算平均日增重、日采食量、料重比等生長性能指標(biāo)；并測定酸性磷酸酶ACP和堿性磷酸酶AKP活力,超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX活性及丙二醛MDA含量。結(jié)果顯示:
　　 1.不同品種桉葉水煎液、水煎萃取液、醇提液、醇提萃取物對4種供試菌株的體外抑菌效果各

4、不相同,其中各提取液對多殺性巴氏桿菌的抑菌效果最強,抑菌圈直徑介于22.73～36.79mm間,遠(yuǎn)大于對照中藥雙黃連,抑菌圈直徑為13.21mm。
　　 2.各不同品種桉葉水煎液、水煎萃取液、醇提液、醇提萃取液的抑菌圈直徑分別在11.34～36.79mm、6.36～33.97mm、9.69～33.56mm、6.60～32.66mm之間,水煎液抑菌效果強于醇提液的效果,其次為兩者的相應(yīng)萃取物。
　　 3.GL-9、U6品種

5、桉葉水煎液抑菌直徑分別為15.35～34.40 mm、14.71～32.24mm,優(yōu)于其他四個品種。
　　 4.GL-9、U6品種桉葉水煎液萃取下層組分對埃希氏大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、腸炎沙門氏菌、多殺性巴氏桿菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌、霍亂弧菌8種供試菌株均表現(xiàn)較強敏感性(抑菌圈直徑在10～15mm間),與水煎原液的抑菌效果相當(dāng),乙酸乙酯和正丁醇組分抗菌效果相對較弱,氯仿和石油醚組分均不表現(xiàn)抑菌效果?？梢奊L-

6、9、U6桉葉抗菌有效部位主要存在于萃取下層組分中。
　　 5.經(jīng)成分檢測發(fā)現(xiàn),GL-9、U6桉葉水煎液、乙酸乙酯萃取層、正丁醇萃取層含多種有效成分,分別為酚類、甾體、黃酮類、萜類、皂甙、氨基酸化合物,對這些活性成分進(jìn)行逐一提取,結(jié)果顯示所用提取方法均不能使其有效分離,且抑菌效果不及GL-9、U6桉葉水煎液,酚類和黃酮類化合物抗菌譜與水煎液表現(xiàn)一致。
　　 6.GL-9、U6桉葉不同提取條件試驗結(jié)果顯示對GL-9桉葉抗菌效

7、果影響較大的因素為提取時間和提取溫度,對U6桉葉影響較大的為提取時間。
　　 7.GL-9桉葉的LD50為47.3696 g/kg,U6桉葉的LD50為68.7702 g/kg。
　　 8.日糧中添加U6桉葉粉對三黃肉仔雞生產(chǎn)性能和非特異性免疫無明顯影響；日糧中添加量0.5％時可顯著提高谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性,維持MDA含量較低水平,且對超氧化物歧化酶(SOD)無影響。
　　 可見,不同品種桉葉對

8、常見致病菌有體外抑菌作用,不同提取方式對其抑菌活性影響不大,水煎液抑菌效果優(yōu)于醇提液；GL-9、U6品種桉葉的抑菌效果優(yōu)于其他四個品種。GL-9、U6品種桉葉抗菌有效部位主要為萃取下層藥液組分,活性物質(zhì)主要為黃酮類和酚類化合物,對GL-9桉葉抗菌有效成分提取影響較大的因素為提取溫度和提取時間,對U6桉葉影響大的因素為提取時間。GL-9桉葉為小毒,U6桉葉為無毒。U6桉葉粉對三黃肉仔雞生產(chǎn)性能和非特異性免疫無明顯影響,但可提高其抗氧化能力