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1、近年來(lái),華中棉區(qū)棉花黃萎病(Verticillium Wilt)發(fā)生越來(lái)越嚴(yán)重,特別是田間廣泛出現(xiàn)了落葉型棉花黃萎病癥狀。對(duì)病原菌遺傳多樣性的認(rèn)識(shí)是有效防治棉花黃萎病的關(guān)鍵。但是目前對(duì)華中棉區(qū)棉花黃萎病菌(Verticillium dahliae)遺傳多樣性的認(rèn)識(shí)十分有限。鑒此,本研究在分析華中棉區(qū)棉花黃萎病菌遺傳多樣性的基礎(chǔ)上進(jìn)一步分析落葉型棉花黃萎病菌廣泛分布的原因。
針對(duì)第一個(gè)問(wèn)題,本研究從湖北省、湖南省、安徽省、江
2、西省、江蘇省共分離和收集到341個(gè)棉花黃萎病菌菌株。從3個(gè)層面揭示棉花黃萎病菌的遺傳多樣性。其中有來(lái)源于華中棉區(qū)30個(gè)縣(市)52個(gè)取樣點(diǎn)129個(gè)菌株,來(lái)源于湖北省7塊不同發(fā)病率棉田86個(gè)菌株,來(lái)源于湖北省6個(gè)典型黃萎病株的126個(gè)菌株。本研究分別對(duì)3個(gè)群體進(jìn)行了營(yíng)養(yǎng)親和性(Vegetative compatibility grouping,簡(jiǎn)稱(chēng)VCG)分析和分子標(biāo)記分析。
在第一層面的棉黃萎病菌菌株中,VCG1A型占94
3、.6%,VCG2型占5.4%。在第二層面的棉黃萎病菌菌株中,源于5塊棉田的病菌均為VCG1A型。在源于另外兩塊棉田的菌株中,VCG1A型分別占94%和90.9%,而VCG2型分別占6.0%和9.1%。在第三層面的棉黃萎病菌菌株中,來(lái)源于6個(gè)典型病株的菌株全部屬于VCG1A型。這些結(jié)果說(shuō)明VCG1A型菌株已在華中棉區(qū)廣泛分布。
在陸地棉品種鄂棉24和銀瑞361上測(cè)定了VCG1A型和VCG2型代表性菌株的致病力。結(jié)果表明:接種
4、14天后,VCG1A型和VCG2型菌株均能引起棉苗發(fā)病,VCG1A型菌株引起典型的落葉癥狀(defoliation,簡(jiǎn)稱(chēng)D),因而其致病型屬于D型。而VCG2型菌株則沒(méi)有引起落葉癥狀(non-defoliation,簡(jiǎn)稱(chēng)ND),因而其致病型屬于ND型。這些結(jié)果說(shuō)明:VCG1A型和VCG2型菌株的致病力存在明顯分化。
針對(duì)第二個(gè)問(wèn)題,我們?cè)u(píng)價(jià)了湖北省及其周邊棉區(qū)的主栽品種對(duì)棉花黃萎病菌的抗感性以及棉花黃萎病菌對(duì)溫度的反應(yīng)。結(jié)
5、果表明:供試的12個(gè)棉花品種對(duì)VCG1A/D型菌株4TM6-15極其感病,而6個(gè)棉花品種(C111、湘雜棉3號(hào)F2、富抗雜3號(hào)F1、湘雜棉2號(hào)F2、盛雜棉9號(hào)F1、華豐雜1號(hào)F1)對(duì)VCG2/ND型菌株1HN-1感病,3個(gè)棉花品種(鄂雜棉19F1、富抗雜518F1、鄂雜棉4號(hào))對(duì)菌株1HN-1中感,另外3個(gè)棉花品種(鄂雜棉3號(hào)、福棉2號(hào)、豐棉03F1)對(duì)菌株1HN-1抵抗。結(jié)果還表明:在株高、根重、葉重和莖重等4個(gè)指標(biāo)上,VCG1A/D
6、型菌株接種的棉苗顯著(P<0.05)低于VCG2型菌株接種的棉苗。這些結(jié)果表明:目前在湖北省及其周邊棉區(qū)推廣的棉花品種對(duì)VCG1A/D型菌株高感。
在棉花黃萎病菌對(duì)溫度反應(yīng)方面,VCG1A/D型和VCG2/ND型菌株菌絲生長(zhǎng)的最適溫度均為25℃。在30℃下,VCG1A/D型菌株在PDA和CDA上生長(zhǎng)速度顯著(P<0.05)快于非落葉型菌株。在10~33℃條件下,VCG1A/D型菌株分生孢子萌發(fā)率顯著(P<0.05)高于VC
7、G2/ND型菌株。在25/25℃、27/27℃、30/25℃(晝/夜溫度)條件下,VCG1A/D型菌株導(dǎo)致棉花植株落葉,而VCG2/ND型菌株也導(dǎo)致棉花植株發(fā)病,但不引起棉花落葉。VCG1A/D型菌株引起的病害進(jìn)程曲線下面積值(Area under disease progress curve,簡(jiǎn)稱(chēng)AUDPC)和維管束變色指數(shù)值(Vascular discoloration index,簡(jiǎn)稱(chēng)VDI)顯著(P<0.05)高于VCG2/ND
8、型菌株引起的AUDPC值和VDI值。在30/30℃、33/27℃條件下,在鄂棉24上,VCG1A/D型菌株和VCG2/ND型菌株引起輕微病害癥狀,VCG1A/D型菌株引起的VDI值顯著(P<0.05)高于VCG2/ND型菌株。在銀瑞361上,VCG1A/D型和VCG2/ND型菌株均沒(méi)有引起病害。在33/33℃下,兩類(lèi)菌株接種棉苗后,棉苗葉片和維管束都沒(méi)有顯現(xiàn)任何病害癥狀。這些結(jié)果表明:VCG1A/D型菌株對(duì)高溫(30℃)的忍耐性較VCG
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