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文檔簡介
1、棉花黃萎病是世界性土傳維管束萎蔫病害,是棉花生產的限制因子之一。我國棉花黃萎病的病原菌為大麗輪枝菌(VerticilliumdahliaeKleb.),研究黃萎病菌是否含有弱毒相關真菌病毒,對黃萎病的生物防治具有較大的潛在意義。本文對我國棉花主產區(qū)12個省162個黃萎病菌株進行致病力測定,篩選出51個弱毒菌株,并對其進行dsRNA檢測和分析,發(fā)現弱毒菌株Vd08284的dsRNA提取液中存在2條dsRNA條帶。
采用改進的利用
2、隨機引物擴增RNA病毒的cDNA全長序列方法獲得2條dsRNA的cDNA全長。DNA測序結果得到2條序列信息,根據片段大小依次命名為dsRNA1(1769bp)和dsRNA2(1603bp)。dsRNA1和dsRNA2序列信息已經在NCBI數據庫中登記,登記號分別為KC422244.1和KC422243.1。編碼蛋白序列經Blast-P檢索結果顯示,dsRNA1和dsRNA2編碼蛋白分別與Partitivirus屬病毒的依賴于RNA的R
3、NA聚合酶(RdRP)、外殼蛋白(CP)有較高同源性。將該病毒暫命名為Verticilliumdahliaepartitivirus1(VdPV1),VdPV1的RdRP和CP的氨基酸序列與Chrysoviridae、Totiviridae和Partitiviridae3個科19種病毒的RdRP和CP分別建立進化樹,VdPV1均與Partitiviridae中雙分病毒屬的病毒聚在一枝,進一步說明從菌株Vd08284中分離到的病毒VdPV
4、1屬于雙分病毒屬中的新成員。
通過含病毒VdPV1菌株Vd08284與潮霉素標記的黃萎病菌突變體菌株T692對峙培養(yǎng),成功獲得30個傳毒菌株,可判定病毒VdPV1在棉花黃萎病菌中能夠在不同菌株間傳播。通過對其生物學特性研究,發(fā)現菌株T692被病毒VdPV1侵染后,能夠導致致病力、菌絲生長速率和粗毒素分泌量顯著降低,可初步推斷病毒VdPV1對棉花黃萎病菌具有一定的弱毒影響。根據病毒VdPV1具有的傳播能力和弱毒特性,推斷該病毒具
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