江蘇省棉花黃萎病菌致病力分化和分子檢測.pdf

1、棉花黃萎病(Verticillium wilt.)是世界性的土傳植物病害，是棉花生產(chǎn)上危害最嚴(yán)重的病害之一。在各地，甚至同一棉田生長過程中其棉花黃萎病的癥狀類型、發(fā)病率、病害嚴(yán)重程度等方面常存在較大差異。這些差異是由于同一棉田棉株個體間的抗病性差異引起的，還是由于土壤中病原菌的致病力分化引起，是一個值得研究的理論問題和現(xiàn)實(shí)生產(chǎn)問題。為此，本文對棉花黃萎病菌的致病力分化進(jìn)行了研究，取得了如下結(jié)果：
　　 1.病原菌分離培養(yǎng)后的生物

2、學(xué)培養(yǎng)性狀結(jié)果表明江蘇省棉花黃萎病菌以菌核型居多，其次為菌絲型，中間型最少。研究結(jié)果還表明在江蘇省同一棉田中，甚至個別在同一植株上分離培養(yǎng)的黃萎病菌都存在著形態(tài)上的差異。
　　 2.通過比較棉選一號培養(yǎng)基、呂金殿培養(yǎng)基及棉葉培養(yǎng)基，篩選用于從土壤中分離棉花黃萎病菌的培養(yǎng)基。結(jié)果表明，棉選一號培養(yǎng)基最好，其配方較為簡單，并且雜菌少。
　　 3.2008年采集江蘇省大豐市土樣，用水篩法分離土壤棉花黃萎病菌微菌核。結(jié)果表明，棉

3、花黃萎病菌在土壤中的垂直分布主要在0-40cm的上層中，在重病區(qū)0-20cm的土層中棉花黃萎病微菌核占總的70％左右，在20-30cm分布著20％左右的微菌核，在30-40cm處僅分布10％左右的的微菌核。在輕病區(qū)1的0-20cm的土層中棉花黃萎病微菌核占總的71.2％，20-30cm處分布18％，在30-40cm分布10.8％。因此，深翻上層或?qū)Ρ韺油寥肋M(jìn)行處理，是防治棉花黃萎病菌的有效方法之一。
　　 4.采用了PCR技術(shù)對

4、江蘇省棉花黃萎菌系進(jìn)行檢測，監(jiān)測江蘇棉花黃萎病菌的致病類型。利用落葉型棉花黃萎病菌的的特異引物D1、D2對采自江蘇棉區(qū)的64個棉花黃萎病菌菌系進(jìn)行PCR擴(kuò)增，54個菌系擴(kuò)增出500 bp的片段，與前人報道的落葉型棉花黃萎病系擴(kuò)增出的片段大小一致，說明這些菌系為落葉型棉花黃萎病系，而剩余的10個菌系未擴(kuò)增出任何片段，利用非落葉型黃萎病菌的特異性引物ND1，ND2對這10個菌系進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增出1500 bp的片段。落葉型黃萎病菌占供試菌系的

5、84.38％，表明目前江蘇省棉花黃萎病菌依舊以落葉型黃萎病菌為主。
　　 5.選有代表性的棉花黃萎病菌52個菌株及4個對照菌株，各配成一定濃度的孢子懸浮液，于棉花苗期1-2葉期傷根接菌，在溫室中對各代表菌株進(jìn)行致病力測定。結(jié)果表明，各菌株致病力強(qiáng)弱差異明顯，并發(fā)現(xiàn)江蘇棉花黃萎病菌有落葉型菌系的存在，可分為致病力強(qiáng)的Ⅰ型，混合類致病力中等的Ⅱ型和弱致病力的Ⅲ型分別占17.86％，71.43％，10.71％。結(jié)果還表明，同一棉田棉花