兒菜MAX途徑相關(guān)基因的克隆及表達(dá)分析.pdf_第1頁(yè)
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1、兒菜(Brassica juncea var.gemmifera Lin.)是芥菜的一個(gè)變種,是一種長(zhǎng)江流域普遍種植的蔬菜作物,屬十字花科蕓薹屬。兒菜的生產(chǎn)主要集中在長(zhǎng)江流域,其他地區(qū)并沒(méi)有普及,產(chǎn)量不足以供應(yīng)給其他地區(qū)。如果能提高其產(chǎn)量,對(duì)增加兒菜的供應(yīng)量,滿足市場(chǎng)需要具有重要的意義。利用分子生物學(xué)技術(shù)研究其側(cè)芽(即兒菜的可食用部分)相關(guān)基因的表達(dá),對(duì)于提高兒菜的產(chǎn)量提供技術(shù)支持。
  通過(guò)對(duì)擬南芥突變體的分析,發(fā)現(xiàn)在擬南芥中有

2、一個(gè)調(diào)控植物側(cè)芽發(fā)生的途徑,即MAX途徑。該途徑包含了MAX1,MAX2,MAX3,MAX4基因的調(diào)控以及與生長(zhǎng)素,細(xì)胞分類素和獨(dú)腳金萌發(fā)素內(nèi)酯三種激素的相互作用。目前,這些基因在豌豆,牽牛花和水稻中都有同源基因被克隆。本課題以兒菜和芥菜側(cè)芽的表型特征和分子生物學(xué)特性為基礎(chǔ),重點(diǎn)對(duì)控制側(cè)芽發(fā)生的MAX途徑相關(guān)的幾個(gè)基因進(jìn)行研究。目前對(duì)兒菜中的這類基因研究還沒(méi)有。我們以野生型兒菜和芥菜為材料對(duì)兒菜側(cè)芽相關(guān)基因進(jìn)行了研究,主要研究結(jié)果如下:

3、
 ?。?)利用RT-PCR的方法在兒菜和芥菜根、側(cè)芽等組織的mRNA中擴(kuò)增相關(guān)基因片段,得到其cDNA序列,分別命名為eMAX2,eMAX3和eMAX4及jMAX2,jMAX3和jMAX4。與擬南芥相關(guān)基因的同源性分別為MAX284%,MAX356%,MAX487%。eMAX2和jMAX2基因片段,eMAX3和jMAX3基因片段的核苷酸序列完全一致,而eMAX4基因片段相對(duì)于jMAX4基因片段發(fā)生了幾個(gè)點(diǎn)突變。
 ?。?)

4、以兒菜和芥菜Actin基因的特異表達(dá)為參照,通過(guò)半定量RT-PCR分析,研究?jī)翰薳MAX2,eMAX3和eMAX4基因與芥菜jMAX2,jMAX3和jMAX4基因的表達(dá)模式差異,結(jié)果表明MAX2基因在芥菜中的表達(dá)量明顯高于在兒菜中的表達(dá)量,而MAX3基因和MAX4基因在兒菜和芥菜中的表達(dá)量幾乎沒(méi)有差別。
 ?。?)對(duì)兒菜和芥菜分別用生長(zhǎng)素,細(xì)胞分裂素,獨(dú)腳金萌發(fā)素內(nèi)酯進(jìn)行處理,然后通過(guò)半定量RT-PCR分析,研究這三種激素對(duì)MAX

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