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文檔簡介
1、本實驗將大豆球蛋白(11S)和β-伴大豆球蛋白(7S)作為抗原免疫仔豬,然后再對仔豬大劑量注射大豆蛋白抗原進行致敏,研究大豆蛋白抗原對斷奶仔豬木糖吸收能力、生長性能、體液免疫、小腸消化酶活性、黏膜形態(tài)以及小腸中組胺含量的影響,探討大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白對斷奶仔豬的免疫原性、作用機理及免疫效果。
首先選取56實7日齡“杜×長×大”三元雜交仔豬,按體重和性別隨機分成7組,每組8實。仔豬經皮下注射進行免疫,其中對照組注射生
2、理鹽水0.5 mg,實驗組分別注射3個劑量(100、500和1000μg/kg·w)的大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,21日齡時進行二免。所有仔豬均于22日齡斷奶,在7、21、35日齡經前腔靜脈采血,用于免疫指標的測定,同時進行仔豬的皮膚紅斑直徑試驗,探索大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白對斷奶仔豬的免疫原性和最佳免疫劑量。在大豆蛋白抗原對斷奶仔豬的免疫原性試驗的基礎上,再選取88頭7日齡“杜×長×大”三元雜交仔豬,按體重和性別隨機分成11個組
3、,每組8頭。A組注射生理鹽水0.5 mg,11S B、C、D組免疫500μg/kg·W的大豆球蛋白,21日齡進行二免,23日齡C、D組分別肌肉注射11S2500、5000μg/kg·W,E、F組不免疫,在23日齡分別肌肉注射11S2500、5000μg/kg·W;7S分組同11S。所有仔豬于23日齡斷奶,在7、21、35日齡時空腹稱重,計算平均日增重,同時于7、21、35日齡進行前腔靜脈采血,用于測定血清中免疫球蛋白(IgG、IgA、I
4、gM)、總IgE。試驗結束時,每組選擇5頭仔豬進行屠宰,取十二指腸近端、空腸中段、回腸近段,測量仔豬腸黏膜絨毛高度、隱窩深度,測定消化酶活性和組胺含量。
結果:表明:
1、11S和7S組仔豬皮膚紅斑直徑均在10~20 mm之間,致敏性為++。與對照組仔豬比較,11S和7S組的致敏性極顯著升高(P<0.01),且7S的致敏性顯著高于11S的致敏性。
2、對仔豬免疫500、1000μg/kg·w的1
5、1S,仔豬的紅斑直徑明顯降低,但木糖的吸收能力沒有明顯提高。免疫500、1000μg/kg·w的7S,仔豬的紅斑直徑明顯降低,木糖吸收能力明顯提高,但兩組仔豬紅斑直徑、木糖吸收能力差異不顯著。
3、對仔豬免疫11S,血清中的特異性抗體IgG不能達到有效的抗體滴度;免疫500、1000μg/kg·w的7S,血清中特異性抗體IgG能達到有效的抗體滴度,且兩劑量之間差異不顯著。
4、注射2500、5000μg/Kg
6、·W的大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白可顯著降低斷奶仔豬的平均體重和平均日增重,且β-伴大豆球蛋白致敏組明顯低于大豆球蛋白致敏組。對仔豬提前免疫大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,能顯著提高斷奶仔豬的生長性能,免疫β-伴大豆球蛋白組仔豬生長性能明顯高于大豆球蛋白組。
5、注射2500、5000μg/Kg·W的大豆球蛋白可顯著降低斷奶仔豬十二指腸、回腸中胰淀粉酶、蛋白酶和十二指腸脂肪酶活性,注射β-伴大豆球蛋白可明顯降低斷奶仔豬十二指
7、腸、空腸中段胰淀粉酶、蛋白酶和十二指腸中脂肪酶活性,注射劑量越大,酶活性越低;對仔豬提前免疫大豆蛋白抗原能顯著提高小腸中淀粉酶和蛋白酶活性。
6、注射2500、5000 ug/Kg·W的大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白后,仔豬血清中IgG、總IgE抗體水平明顯升高,注射β-伴大豆球蛋白組仔豬血清中IgG、總IgE抗體水平顯著高于大豆球蛋白組,注射劑量越大,IgG、總IgE抗體水平越高;IgA和IgM抗體水平變化不顯著。提前免疫
8、大豆蛋白抗原后,仔豬血清中IgG抗體水平明顯升高,總IgE抗體水平明顯降低,免疫β-伴大豆球蛋白組仔豬血清中的IgG抗體水平明顯高于大豆球蛋白組,總IgE抗體水平明顯低于大豆球蛋白組,IgA和IgM抗體水平變化不顯著。
7、注射2500、5000μg/Kg·W的大豆球蛋白能使十二指腸、回腸中組胺含量明顯降低,β-伴大豆球蛋白能使十二指腸、空腸中組胺含量明顯降低,注射劑量越大,組胺含量越低;免疫大豆蛋白抗原能顯著提高小腸中的
9、組胺含量。
8、大豆球蛋白能使十二指腸、回腸黏膜結構受損,β-伴大豆球蛋白能使十二指腸、空腸黏膜結構受損,表現為小腸絨毛高度下降、隱窩變深,且注射劑量越大,損傷越嚴重;提前免疫大豆蛋白抗原,能顯著提高小腸絨毛高度,降低隱窩深度。
總之,大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白引起斷奶仔豬的過敏反應為Ⅰ、Ⅲ復合型超敏反應,超敏反應的程度與大豆蛋白抗原的濃度有關,濃度越高產生的超敏素就越多,并且β-伴大豆球蛋白免疫原性明顯強
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