水稻稻瘟病抗性基因Pi36抗性機(jī)理的初步研究.pdf

1、稻瘟病是水稻生產(chǎn)上最具毀滅性的病害之一，分布廣、危害大，長期困擾水稻的生產(chǎn)。相對(duì)于化學(xué)防治法的高成本和高污染，培育和合理利用抗病品種，是對(duì)這一病害最經(jīng)濟(jì)和最安全的控制手段，發(fā)掘具有廣譜抗性的新抗源，是抗稻瘟病育種的主要研究方向。稻瘟病抗性基因Pi36是利用圖位克隆法克隆的一個(gè)新基因，抗性穩(wěn)定，為育種學(xué)家提供了新的抗源。本研究在前人工作基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討了Pi36的抗性機(jī)制。主要結(jié)果如下：
　　 1.構(gòu)建了Pi36的超量表達(dá)載體，

2、進(jìn)行針對(duì)感病品種麗江新團(tuán)黑谷(Lijiangxintuanheigu，LTH)的遺傳轉(zhuǎn)化，并得到了一定數(shù)量的轉(zhuǎn)基因植株。利用人工輔助接種鑒定T1代轉(zhuǎn)基因植株，發(fā)現(xiàn)其抗病性明顯提高。對(duì)葉片進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染色發(fā)現(xiàn)葉片在稻瘟病菌侵染后發(fā)生了細(xì)胞死亡，阻止了病菌的進(jìn)一步侵入，從而使轉(zhuǎn)基因植株抗性提高。同時(shí)利用實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻中Pi36相關(guān)防衛(wèi)基因表達(dá)量進(jìn)行分析，初步推測Pi36介導(dǎo)抗性與水楊酸信號(hào)途徑有關(guān)。
　　 2.MAPK基因

3、在植物防衛(wèi)反應(yīng)信號(hào)傳導(dǎo)方面具有重要作用，本研究通過實(shí)時(shí)定量PCR，比較了17個(gè)OsMAPK基因在Pi36介導(dǎo)的抗性反應(yīng)中的表達(dá)差異性，結(jié)果表明OsMAPK2、OsMAPK4、OsMAPK8和OsMAPK15 4個(gè)基因在抗病品種中誘導(dǎo)表達(dá)上調(diào)，而在感病品種中沒有誘導(dǎo)表達(dá)。說明這4個(gè)基因可能參與稻瘟病抗性基因Pi36介導(dǎo)的抗性反應(yīng)信號(hào)傳導(dǎo)。
　　 3.為了探究MAPK基因在Pi36介導(dǎo)的抗性反應(yīng)信號(hào)途徑中的功能，選擇差異表達(dá)的OsM