家蠶后部絲腺和中腸蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、蛋白質(zhì)組學是在蛋白質(zhì)的水平上大規(guī)模地研究基因產(chǎn)物表達，其能夠直接地研究蛋白質(zhì)的表達水平和相關(guān)蛋白的活性狀態(tài)。經(jīng)典蛋白質(zhì)組學研究技術(shù)采用雙向電泳和質(zhì)譜方法結(jié)合生物信息學進行。
　　 家蠶后部絲腺是合成和分泌蠶絲蛋白的一個非常重要的器官。五齡期間其無論在形態(tài)上還是在功能上都發(fā)生了顯著變化。本研究采用雙向電泳法比較分析P50 蠶品種四眠、五齡第一天、第三天、第五天、第七天及熟蠶后部絲腺蛋白質(zhì)和磷酸化蛋白質(zhì)表達變化。用Imagemast

2、er6.0 分析圖譜，共分析出224個差異表達的蛋白質(zhì)，其中四眠蠶有29個，五齡一、三、五、七天蠶和熟蠶分別有69、47、28、31和49個差異點。其中共有73個蛋白斑點被MALDI-TOF 成功鑒定。從五齡第七天到熟蠶階段特異蛋白點達到第二個高峰，蛋白檢測結(jié)果表明這與絲腺細胞的凋亡有關(guān)。
　　 蛋白質(zhì)磷酸化是蛋白質(zhì)的一種非常重要的翻譯后修飾現(xiàn)象。采用雙向電泳和Pro-Q Diamond staining染色研究家蠶后部絲腺發(fā)育

3、過程中磷酸化蛋白質(zhì)的變化情況。對60個磷酸化蛋白質(zhì)進行質(zhì)譜分析，成功鑒定其中30個，并發(fā)現(xiàn)磷酸化蛋白質(zhì)主要集中在pH4-7的區(qū)域。從圖譜不難看出磷酸化蛋白點的變化情況：四眠和五齡第一天有些差異點，其余時期大體沒變化，表明后部絲腺的變化與蛋白質(zhì)磷酸化修飾關(guān)系不大。
　　 據(jù)家蠶受BmNPV侵染后中腸蛋白質(zhì)組的變化情況，探討抗BmNPV病毒基因。對秋豐、白玉等9個不同系統(tǒng)的家蠶品種進行BmNPV抗性比較試驗，篩選獲得BmNPV感染發(fā)