家蠶后部絲腺和中腸蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、蛋白質(zhì)組學(xué)是在蛋白質(zhì)的水平上大規(guī)模地研究基因產(chǎn)物表達(dá)，其能夠直接地研究蛋白質(zhì)的表達(dá)水平和相關(guān)蛋白的活性狀態(tài)。經(jīng)典蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)采用雙向電泳和質(zhì)譜方法結(jié)合生物信息學(xué)進(jìn)行。
　　 家蠶后部絲腺是合成和分泌蠶絲蛋白的一個(gè)非常重要的器官。五齡期間其無(wú)論在形態(tài)上還是在功能上都發(fā)生了顯著變化。本研究采用雙向電泳法比較分析P50 蠶品種四眠、五齡第一天、第三天、第五天、第七天及熟蠶后部絲腺蛋白質(zhì)和磷酸化蛋白質(zhì)表達(dá)變化。用Imagemast

2、er6.0 分析圖譜，共分析出224個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其中四眠蠶有29個(gè)，五齡一、三、五、七天蠶和熟蠶分別有69、47、28、31和49個(gè)差異點(diǎn)。其中共有73個(gè)蛋白斑點(diǎn)被MALDI-TOF 成功鑒定。從五齡第七天到熟蠶階段特異蛋白點(diǎn)達(dá)到第二個(gè)高峰，蛋白檢測(cè)結(jié)果表明這與絲腺細(xì)胞的凋亡有關(guān)。
　　 蛋白質(zhì)磷酸化是蛋白質(zhì)的一種非常重要的翻譯后修飾現(xiàn)象。采用雙向電泳和Pro-Q Diamond staining染色研究家蠶后部絲腺發(fā)育

3、過(guò)程中磷酸化蛋白質(zhì)的變化情況。對(duì)60個(gè)磷酸化蛋白質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜分析，成功鑒定其中30個(gè)，并發(fā)現(xiàn)磷酸化蛋白質(zhì)主要集中在pH4-7的區(qū)域。從圖譜不難看出磷酸化蛋白點(diǎn)的變化情況：四眠和五齡第一天有些差異點(diǎn)，其余時(shí)期大體沒(méi)變化，表明后部絲腺的變化與蛋白質(zhì)磷酸化修飾關(guān)系不大。
　　 據(jù)家蠶受BmNPV侵染后中腸蛋白質(zhì)組的變化情況，探討抗BmNPV病毒基因。對(duì)秋豐、白玉等9個(gè)不同系統(tǒng)的家蠶品種進(jìn)行BmNPV抗性比較試驗(yàn)，篩選獲得BmNPV感染發(fā)