出凝血疾病的檢測

1、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院臨床檢測中心止血血栓室 孫海燕,出凝血疾病的檢測,生理性止血,,血管損傷,血管收縮,血管內(nèi)皮下組織,5-HT、TXA2等,血凝塊形成與維持,纖維蛋白網(wǎng),加固,血小板血栓,抗凝系統(tǒng),纖溶系統(tǒng),XII,XIIa,XI,,XIa,IX,IXa,X,Xa,II,IIa,I,Is,Ii,XIII,XIIIa,VII,VIIa,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,VIII,VIIIa,,,,,TF +Ca2+,,,前

2、激肽釋放酶,激肽釋放酶,,,,,丟失不引起出血,Va,V,,,,,,Ca2+,PL,,,,,HMW-K,PL,凝血瀑布,凝血因子活性測定,,,,凝血因子活性測定,原理：凝血因子活性是通過其糾正乏該因子血漿所致的凝固時間延長的能力而測得的。梯度稀釋已知凝血因子活性的血漿（標(biāo)準(zhǔn)品），與乏該因子的血漿混合，然后做APTT或PT測定，建立參考曲線。受檢者血漿與乏該因子的基質(zhì)血漿混合，測其APTT后PT值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算其凝血因子的活性。

3、因子缺乏或者假性降低：3個濃度當(dāng)存在狼瘡抗凝物等非特異性抗體時，凝血因子活性測定呈現(xiàn)稀釋效應(yīng),凝血因子活性測定,,VIII因子抑制物定量：489 Bethesda,糾正試驗(yàn),狼瘡抗凝物實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn),延長的磷脂依賴的凝固時間：APTT、DRVVT、SCT、dPT等抑制的證據(jù)：糾正試驗(yàn)延長是磷脂依賴的：DRVVT（或SCT）證實(shí)試驗(yàn)、PNP等除外其他的循環(huán)抗凝物：因子特異性抗體、DTI、肝素、華法令等補(bǔ)充檢測：抗心磷脂抗體、抗

4、β2糖蛋白1抗體,*ISTH LA-SSC, 1995 (TH 74:1185) & 2009 (JTH 7:1737-40); CLSI H-60A (2014),DRVVT （或SCT）,DRVVT Screen,RVV,PL (restricted),肝素中和劑,DRVVT Comfirm,RVV,Excess PL,肝素中和劑,陽性：DRVVTScreen/DRVVT Comfirm > 1.2,,,未稀釋,1:1

5、,1:2,1:4,1:8,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,取0.2ml+0.2mlNPP,37℃孵育2小時,0.2mlNPP+0.2ml咪唑,檢測因子活性,計(jì)算滴度,患者血漿,Bethesda Assay操作步驟,因子活性測定,抑制物滴度,凝血四項(xiàng),遺傳性缺乏,獲得性缺乏,血友病甲、血友病乙等,肝病、vitk缺乏、華法令治療、DIC等,因子特異性抗體,狼瘡抗凝物,一期止血,一期止血,血小板實(shí)驗(yàn)室檢測,

6、數(shù)量：血小板計(jì)數(shù)、外周血涂片功能：PFA-100（PFA-200）、血小板聚集試驗(yàn)其他：血小板膜糖蛋白受體、電鏡等,PFA-100（200）,PFA-100（200）結(jié)果解釋,,血小板聚集試驗(yàn),血小板與血小板之間相互粘附過程。是形成血小板血栓的基礎(chǔ)，也是血小板進(jìn)一步活化和參與二期止血、促進(jìn)血液凝固的保證。血小板聚集的要素GPIIb/IIIa ，F(xiàn)g，Ca2+誘導(dǎo)劑高切變率的條件下,vWF與Fn也參與血小板聚集,21,22,,

7、血小板聚集試驗(yàn)在遺傳性血小板疾病中的表現(xiàn),+正常，++增強(qiáng)，±反應(yīng)減弱，-缺乏反應(yīng)，v差別大，Ο缺乏第二相聚集,血管性血友?。╲WD）實(shí)驗(yàn)室檢測,vWF抗原檢測：vWF:AgvWF活性檢測：vWF:RCo，vWF:Act凝血因子VIII活性檢測：FVIII:C瑞斯托霉素（及小劑量）誘導(dǎo)血小板聚集vWF多聚體分析vWF與膠原結(jié)合力：vWF：CB,血管性血友?。╲WD）分型,1型：vWF部分缺失3型：vWF完全缺失2

8、型：2A：選擇性高中分子量vWF多聚體缺失 2B：功能獲得型突變導(dǎo)致vWF與血小板親和力增加，高分子量vWF多聚體被清除及輕度血小板減少 2M：功能缺失型突變導(dǎo)致vWF與血小板GPIb結(jié)合力降低 2N：vWF與VIII結(jié)合力降低，導(dǎo)致VIII被清除,vWD的實(shí)驗(yàn)室分型診斷,抗凝系統(tǒng)與纖溶系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測,抗凝蛋白檢測： 抗凝血酶III活性

9、測定（ATIII） 蛋白C活性測定（PC） 蛋白S活性測定（游離）（PS free）纖溶系統(tǒng)： 纖溶酶原 tPA PAI-1 D-dimer FDP,易栓癥,遺傳性：1、抗凝蛋白缺陷：ATIII、PC、PS2、凝血因子缺陷：FV Leiden/FII 20210A、異常纖維蛋白原血癥3、纖溶蛋白缺陷：纖溶酶原、tPA缺乏、PAI-1增加4、代謝缺陷：高同型半胱氨酸血癥獲得性惡性腫瘤

10、、APS、肝病、腎病、凝血因子增加、創(chuàng)傷及圍手術(shù)期、妊娠、制動、經(jīng)濟(jì)艙綜合征、避孕藥、老齡等等,D-Dimer,對VTE的陰性排除價值增高：老年、新生兒、妊娠、感染、腫瘤、手術(shù)、創(chuàng)傷、DIC、VTE、外周動脈病變、溶血、出血、抗血栓治療、肝腎疾病等,我室的出凝血檢測項(xiàng)目匯總,,基因檢測,,分析前因素對結(jié)果的影響,出凝血檢測的保存條件及間隔（推薦）,整合報(bào)告,檢測科室的職能,檢測樣本保證結(jié)果的準(zhǔn)確性提供有臨床價值的結(jié)果為臨床提供必

11、要的咨詢，正確解釋結(jié)果，最大限度提供可利用的信息,,整合報(bào)告,兩種方式：由醫(yī)師決定患者的檢測項(xiàng)目，我們將患者的所有報(bào)告整合，就所有的結(jié)果做出條理性的解釋，闡明其中異常結(jié)果的意義，可能會做出診斷性的結(jié)論，或者因?yàn)閷Σ∈妨私獾木窒扌灾荒芴岢隹赡苄缘囊蛩毓┡R床結(jié)合患者實(shí)際情況矯正，比如用藥史，家族史等我們將不同的疾病整合幾種不同的檢查項(xiàng)目套餐，臨床只需根據(jù)患者的情況挑選其中一種套餐，我們根據(jù)該患者的實(shí)際檢查結(jié)果情況決定接下來做何種檢測項(xiàng)目