酵母菌數(shù)量變化

1、培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,探究實驗,單細(xì)胞真核生物生長周期短，增殖速度快還可以用酵母菌作為實驗材料研究 探究酵母菌的呼吸方式,酵母菌,,一、提出問題：,培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時間變化的？,二、作出假設(shè)：,,酵母菌在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時，由于食物，空間資源等是有限的，種群增長呈現(xiàn)“S”型曲線；后期因環(huán)境急劇惡化，種群逐漸消亡。,—————————————————————————————————————————

2、———————————————————,三、討論探究思路,血細(xì)胞計數(shù)板(血球計數(shù)板),方法名稱：使用范圍：,顯微計數(shù)(抽樣檢測),①調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時； ②肉眼看不見的細(xì)菌、酵母菌等微生物,問題一：怎樣進(jìn)行酵母菌的計數(shù)？,1、血球計數(shù)板的結(jié)構(gòu),血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的，玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個平臺。中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽隔

3、為兩半，每半邊上面刻有一個方格網(wǎng)。,方格網(wǎng)上刻有9個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室，供微生物計數(shù)用。,,,大方格的長和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容積為0.1mm3；,,,,,,大方格,,,,,,,中方格,,小方格,,,,16 （中格）×25 （小格）,25（中格）×16（小格）,3、血球計數(shù)板的分區(qū)與分格,不管計數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格都是由1

4、6×25=25×16=400個小方格組成。,2、計數(shù),,,,,16×25型： 一般取四角的四個中方格（100個小方格）計數(shù),,25×16型： 一般計數(shù)四個角和中央的五個中方格（80個小方格）的細(xì)胞數(shù)。,,,,,,例1 通常用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計數(shù)，若計數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個小方格組成。若多次重復(fù)計數(shù)后，算得每個小方格

5、中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有      個。,2×108,例2 檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由25×16＝400個小格組成，容納液體的總體積為0．1 mm3。,現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d

6、、e 5個中格80個小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個，則上述水樣中約有藍(lán)藻 個／mL。,5n×105,3、計算,b表示培養(yǎng)液稀釋倍數(shù)；用所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)/所數(shù)小方格數(shù)是為求得每個小方格中的細(xì)胞總數(shù)。,4、血球計數(shù)板的使用方法步驟,③ 計數(shù)： 稍待片刻（約5min），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計數(shù)室底部后，將計數(shù)板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄

7、。,① 鏡檢計數(shù)室： 在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計數(shù)。,② 加樣品： 將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過計數(shù)室臺面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。,——從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌

8、分布均勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。,問題二：從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前，應(yīng)該將試管輕輕震蕩幾次，為什么？,一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計數(shù)。 具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計數(shù)板計數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有4～5個酵母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計