實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)骨髓細(xì)胞學(xué)檢測

1、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測,溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)科大學(xué)附屬一醫(yī)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心,林曉梅,上 課 內(nèi) 容（P266-279）,骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用骨髓細(xì)胞學(xué)檢測血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)血細(xì)胞化學(xué)染色細(xì)胞免疫分型細(xì)胞遺傳學(xué)分析,一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用,臨床作用 適應(yīng)癥 禁忌癥,1、骨檢的臨床作用,疾病診斷 肯定性診斷 符合性診斷 懷疑性診

2、斷 排除性診斷 形態(tài)學(xué)描述 稀釋骨髓象 觀察療效 緩解 改善 退步 復(fù)發(fā),2、骨檢的適應(yīng)證,不明原因外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)或和分類異常不明原因的發(fā)燒、肝、脾、淋巴結(jié)腫大黃疸、骨痛、骨質(zhì)破壞、蛋白尿、腎功能異常、血沉明顯增加等,2、骨檢的適應(yīng)證,血液病的定期復(fù)查和療效觀察了解骨髓造血功能其它檢查 ：

3、 骨髓活檢 細(xì)胞免疫學(xué)分型 染色體核型檢查 分析病原學(xué)檢查 造血祖細(xì)胞培養(yǎng),3、骨檢的禁忌證,嚴(yán)重出血的疾病禁用 晚期妊娠的孕婦慎用,骨髓片的選擇低倍鏡檢查油鏡檢查骨髓象的分析與報告,二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的方法和內(nèi)容,1）涂片（肉眼觀察）,1、骨髓片的選擇,厚薄均勻頭體尾分

4、明兩邊留有空隙尾呈鋸齒狀頭部要留有約2cm的空間,2）取材抽吸骨髓液時有特殊的疼痛感抽出的骨髓液中有黃色小粒（骨髓小粒）顯微鏡下有骨髓特有的細(xì)胞： 幼紅、幼粒、巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞等骨髓桿/分葉、有核細(xì)胞數(shù)大于外周血,1、骨髓片的選擇,3）染色 細(xì)胞核、質(zhì)顏色分明，顆粒清楚，沒有染料沉渣,1、骨髓片的選擇,1）確定取材、涂片和染色是否滿意2）估計(jì)骨髓有核細(xì)胞增生程度3）巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)4）觀察

5、有無異常細(xì)胞,2、低倍鏡下檢查,骨髓有核細(xì)胞增生程度,增 生 極 度 活 躍,增 生 明 顯 活 躍,增 生 活 躍,增 生 減 低,增 生 極 度 減 低,有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：200～ 500個細(xì)胞，按細(xì)胞的不同系列和不同發(fā)育階段分別計(jì)數(shù)，計(jì)算各階段細(xì)胞所占百分比。觀察細(xì)胞形態(tài)：分類計(jì)數(shù)同時觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，有無異常細(xì)胞、寄生蟲等。,3、油鏡檢查,1）病人的基本信息2）骨髓的取材、涂片、染色情況3）骨髓增生程度、粒紅比值和骨

6、髓各期細(xì) 胞結(jié)果4）骨髓象特征的描述5）血象特征6）細(xì)胞化學(xué)染色特征,4、骨髓象的分析和報告,血細(xì)胞的生成 血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律 各系血細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn),三、血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn),造血干細(xì)胞 祖細(xì)胞原始細(xì)胞 幼稚細(xì)胞 成熟細(xì)胞,1.血 細(xì) 胞 的 生 成,,,早幼C 中幼C 晚幼C,,,,,,骨髓：是人體最大器官之一，主要生理是進(jìn)行造血活動，骨髓細(xì)胞主要是發(fā)育過

7、程中的血細(xì)胞。,,血細(xì)胞生長發(fā)育圖,胞體大小 大 小胞核 大小 大 小 核仁 有 無 染色質(zhì) 細(xì)致 粗 核膜 不明顯 明顯 核形 圓形 橢圓形 腎形 桿狀 分葉,,,,,,,2.血 細(xì) 胞 的 發(fā) 育 規(guī) 律,,,,胞漿

8、 量 少 多 嗜堿性 強(qiáng) 弱、消失 顆粒 無 有 (非特異性 特異性)核漿比例 大 小,,,,,2.血 細(xì) 胞 的 發(fā) 育 規(guī) 律,,,,粒 細(xì) 胞 系 列原粒 早幼粒 中幼粒 晚幼粒 桿狀核粒 分葉核粒,,,,,,原始細(xì)胞形態(tài)學(xué)

9、共同特點(diǎn),胞漿嗜堿性胞漿常無顆粒核染色質(zhì)細(xì)致核仁有、清楚高核漿比,紅細(xì)胞系列 粒細(xì)胞系列 淋巴細(xì)胞系列 漿細(xì)胞系列 單核細(xì)胞系列 巨核細(xì)胞系列,3.血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征,正常細(xì)胞形態(tài),正常細(xì)胞形態(tài),紅細(xì)胞系列,胞體、胞核圓形 胞漿有明顯的變化規(guī)律 胞漿中無顆粒,粒細(xì)胞系列,,胞體圓形顆粒和胞核有明顯的變化規(guī)律,淋巴細(xì)胞系列,胞體、胞核小 胞漿量少,漿細(xì)胞系列,胞核圓形、偏位胞漿豐富、深蘭色、 核旁淡染

10、區(qū)、泡沫漿,單核細(xì)胞系列,胞體、胞核較大且不規(guī)則胞漿較豐富、灰蘭色胞核染色質(zhì)疏松,巨核細(xì)胞系列,胞體、胞核巨大且不規(guī)則胞漿量、顆粒極豐富,是一種以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理，對血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)，作定性、定位、半定量分析的方法,四、血 細(xì) 胞 化 學(xué) 染 色,血細(xì)胞化學(xué)染色的定義,輔助疾病的診斷和細(xì)胞系列的判斷不同細(xì)胞系列，其所含的化學(xué)物質(zhì)各有不同血細(xì)胞在病理情況下，其化學(xué)物質(zhì)成分及含 量會發(fā)生改變,血

11、細(xì)胞化學(xué)染色的作用,四、血 細(xì) 胞 化 學(xué) 染 色,過氧化物酶染色（POX）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）酯酶染色鐵染色,四、血 細(xì) 胞 化 學(xué) 染 色,血細(xì)胞化學(xué)染色的方法,粒細(xì)胞及部分的單核細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒含有過氧化酶，此染色用于急性白血病類型的鑒別診斷(急粒和急淋) 急?！獜?qiáng)陽性 急單——陰性、弱陽性 急淋——陰性,1.過氧化物酶（POX）染色,,NAP主要存在于成熟階段的中性粒細(xì)胞 報告形式

12、為陽性率及積分增加：細(xì)菌性感染、類白血病反應(yīng)、再障、 急淋、淋巴瘤減少：慢粒、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、 急粒、惡組,2.中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)染色,,,輔助鑒別急性白血病細(xì)胞類型（急粒和急單）氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-D NCE）:特異性酯酶（SE） 急粒呈陽性（M3—強(qiáng)陽性）α-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）：非特異性酯酶(NSE) 急單呈陽性或強(qiáng)陽性，加NaF抑

13、制 急粒呈陰性或弱陽性，加NaF不抑制 急淋呈陰性,3. 酯 酶 染 色,M5,,骨髓鐵分為細(xì)胞外鐵、內(nèi)鐵減少：缺鐵性貧血增加：鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血,4. 鐵 染 色,骨髓外鐵染色,,骨髓內(nèi)鐵染色,急性白血病常見細(xì)胞化學(xué)染色,急淋 急粒 急單POX - +++ - ~ + NAP

14、↑↑ ↓↓ ? ~↓SE - ++~+++ - ~ +NSE - - ~ ++ ++ ~ +++NSE+NaF - - ~ ++ +,總 結(jié),掌握：血細(xì)胞的生成發(fā)育規(guī)律、常用血細(xì)胞化學(xué)染色在不同血液系統(tǒng)疾病中的鑒別診斷意義熟悉：骨髓穿刺的適應(yīng)證和禁忌證、骨髓增生程度、骨髓象的