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文檔簡介
1、尿微量清蛋白(MAU) ——P205 Β2—微球蛋白( Β2— MG) ——P209α1—微球蛋白( α1— MG) ——P212 BJP ——P202 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG) 溶菌酶 尿淀粉酶(AMY) HCG,,,,,目前常見的臨床檢查模式,參考值,尿流式沉渣檢查 [/μL] 尿紅細胞數(shù) U-RBC 0-25尿白細胞數(shù) U-WBC 0-30 尿上皮細胞數(shù) U-
2、EC 0-15尿管型數(shù) U-CAST 0-0.7尿細菌數(shù) U-BACT 0-6000 病理管型 U-Path.CAST 0.0小圓上皮細胞 U-SRC 0.0 類酵母樣菌 U-YLC 0.0 結(jié)晶U-X`TAL 0.0紅細胞信息 U-RBC info 非溶血紅細胞數(shù)量 U-Nlysed# 非溶血紅細胞百分比 U-Nlysed%,尿干化學檢查pH
3、 4.6~8.0蛋白質(zhì) PRO -葡萄糖GLU -酮體KET -尿膽原UBG +-膽紅素BIL -亞硝酸鹽NIT -紅細胞ERY - 白細胞LEU -比密SG 1.015~1.025VitC <0.6mmol,鏡檢結(jié)果紅細胞RBC:0~3/HP 白細胞WBC:0~5/HP 上皮細胞EC: 少 結(jié)晶CRYSTAL:
4、 少管型CAST: 0~偶見/LP,?尿比重 ?尿酸堿度 ?尿白細胞 ?尿蛋白質(zhì) ?尿亞硝酸鹽,?尿葡萄糖?尿酮體?尿膽原?尿膽紅素?尿紅細胞,尿液干化學分析,尿液的酸度(PH)比密(SG)蛋白質(zhì)(PRO)葡萄糖(GLU)酮體(KET)膽紅素(BIL)尿膽原(UBG)亞硝酸鹽(NIT)白細胞(LEU)紅細胞/隱血(Hb)維生素C(Vitc),,,反應(yīng)模塊,尼龍膜:防止大分子物質(zhì)對反應(yīng)的污染;
5、絨制層:包括碘酸鹽層和試劑層: 碘酸鹽層可以破壞維生素C等干擾物質(zhì), 試劑層含有試劑成分,主要與尿液中測定物質(zhì)發(fā)生化學反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化;吸水層:可使尿液均勻快速的浸入,并能抑制尿液流到相鄰的反應(yīng)區(qū);塑料底層:作支持體。,,,,,尼龍膜 碘酸鹽層 試劑層 吸水層 塑料底層,,空白塊:用于消除尿自身顏色在
6、試劑塊上產(chǎn)生顏色的干擾。,尿液分析試紙,項目 縮寫符號 反應(yīng)原理酸堿度 pH pH指示劑蛋白質(zhì) PRO pH指示劑的蛋白質(zhì)誤差法葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶法隱血 BLD Hb類過氧化物酶法膽紅素 BIL 偶氮反應(yīng)法尿膽原 URO 醛反應(yīng)
7、法酮體 KET 硝基鐵氰化鈉法亞硝酸 NIT 亞硝酸鹽還原法白細胞 LEU 酯酶法比密 d(SG) 多聚電解質(zhì)離子解離法抗壞血酸 ASG 吲哚酚法,,,,尿干化學試紙按功能分組,模塊組合1:比密、蛋白質(zhì)、紅細胞、 白細胞:與腎臟疾病相關(guān)模塊組合2:白細胞、紅細胞、亞硝酸鹽:
8、 與泌尿系感染性疾病有關(guān)模塊組合3:比密、葡萄糖、酮體: 與內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病有關(guān)模塊組合4:膽紅素、尿膽原: 與肝膽系統(tǒng)疾病有關(guān)模塊組合5:pH、比密、維生素C: 對干化學實驗的影響監(jiān)測。,按檢測項目分 8項:pH、PRO、GLU、KET、 BIL、URO、BLD、NIT9項: 8項 + LEU10項:9項 + SG11項:10項
9、 + VitC12項:11項 + 顏色或透明度,組合型試帶,腎病型四聯(lián)試帶:pH、蛋白、隱血、比密糖尿病型五聯(lián)試帶:pH、蛋白、葡萄糖、 酮體、比密肝臟病型二聯(lián)試帶:膽紅素、尿膽原,浸漬試帶條 將多聯(lián)試帶完全浸入尿液1~2s,然后立即取出。瀝去多余尿液 沿試管壁將試帶上多于尿液去盡。檢測標本 將試帶置于儀器檢測槽內(nèi),直至儀器自動打印出報告。,尿干化學分析試帶及結(jié)果判斷,各種尿干化
10、學分析儀,一、尿液分析儀儀器檢測原理 儀器采用球面積分儀接受雙波長反射光,測定試劑帶上的顏色變化進行半定量測定。 試劑帶上有數(shù)個含各種試劑的試劑墊,各自與尿中相應(yīng)成分進行獨立反應(yīng),而顯示不同顏色,顏色的深淺與尿液中某種成分的含量成比例關(guān)系。 試劑帶中還有另一個“補償墊”,作為尿液本底顏色,對有色尿液所產(chǎn)生的誤差進行補償。,測定波長:是被測試劑塊的敏感特征波長;參考波長:是被測試劑塊的不敏感的波長,用以消除背景
11、光和其它雜散光的影響。 照射光波長的選擇由檢測項目決定。 亞硝酸鹽、酮體、膽紅素、尿膽原的測定波長為550nm;PH、葡萄糖、蛋白質(zhì)、維生素C、潛血的測定波長為620nm; 參考波長為720nm。,計 算 原 理 R(%):反射率Tm:試劑墊對測定波長的反射強度Ts:試劑墊對參考波長的反射強度Cs:標準墊對參考波長的反射強度 Cm:標準墊對測定波長的反射強度,尿液自動分析儀結(jié)構(gòu)圖,,,,,,,
12、,,,CPU,,,,,,,,尿液分析儀由:機械系統(tǒng)、光學系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。,,(二) 光電系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖,四、尿液分析儀結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,尿液試紙條urinary reagent strip,,,,,,光源,接收器,(二)試帶使用注意事項,1. 嚴格按操作說明書要求進行操作;2. 試帶要在有效期內(nèi)使用;3. 試帶從冷藏變成室溫前不要打開瓶蓋,用后蓋緊瓶蓋;開過蓋的試帶瓶不建議放在冷藏溫度,可放陰涼
13、、干燥、避光處。4.禁止用手觸摸試劑區(qū), 5. 不同廠家的同類試紙,其原理、方法、結(jié)果不相同,不可混用。,尿干化學方法學評價,優(yōu)點:操作簡便、快速、同時獲得多項結(jié)果。缺點:影響因素多,必須結(jié)合尿理學檢查、顯微鏡 檢查,互相驗證、綜合分析目前國內(nèi)采用方法: 干化學法LEU、BLD、PRO、NIT四項皆(-),可不鏡檢。其中任一項出現(xiàn)異常時,則必須鏡檢。注意事項: ①以尿沉渣作為診斷依據(jù)
14、或觀察療效時,不宜用干化學過篩(腎臟病、內(nèi)分泌病、免疫病等) ②臨床醫(yī)生要求的;,(三) 試紙分析的假陽性和假陰性,1.尿中含高濃度VC,可使試紙法葡萄糖和隱血結(jié)果呈假(一);2.尿蛋白試紙是利用PH指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理,白蛋白的反應(yīng)性最強,球蛋白的反應(yīng)性弱。3.某些藥物(如氯丙嗪、酚噻嗪、吩嗪類藥物)可使尿BIL、URO等呈假(+);4.尿PH超過8.0以上,PRO呈假(+);,三、 干化
15、學分析儀的局限性,1. 試劑條的因素 2. 尿本身的因素:如標本采集不不合 格等 3. 操作原因:如儀器的校準、維護、環(huán)境溫度。 4. 皆為定性分析,只能做過篩試驗。其次是不能檢測尿有形成分,因而不能代替尿沉渣檢查。,尿液結(jié)果分析:,尿沉渣分析儀,尿沉渣分析儀,,尿沉渣分析儀是用顯微鏡或?qū)S迷O(shè)備對尿液有形成分檢查的儀器,擺脫了繁瑣和費時的操作程序,做到尿沉渣分析的標準化、自動化。目前使
16、用的尿沉渣分析儀,主要有:圖像識別法、流式細胞儀法,以及尿液分析工作站等幾種類型。,運用流式細胞術(shù)及特殊熒光染色的原理,將尿標本染色后進入鞘液流動池時,每個有形成分單個縱列通過流動池中心軸線,每個粒子均被氬激光光束照射,并各自發(fā)出不同的熒光強度(信號)。信號表達為3類:即前向散射光、熒光和電阻抗。,(一)流式細胞式尿沉渣分析儀,流式細胞式尿沉渣分析儀原理,,激光束 (?=488m),熒光強度fl:,,前向散射光強度:
17、細胞大小,RND、DNA強度,前向散射光脈沖寬度:細胞長度,熒光脈沖寬度(F1w):細胞染色質(zhì)長度,電阻抗:反映細胞體積,流式細胞式尿沉渣分析儀原理,前向散射光強度(Fsc):細胞大小 前向散射光脈沖寬度(Fscw):細胞長度熒光信號 熒光強度(Fl):細胞染色質(zhì)(DNA/RNA)的強度 熒光脈沖寬度(Flw):
18、細胞大小電阻抗:反映細胞體積,前向散射光信號,,,儀器將這種熒光,散射光和電阻抗的信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枺C合分析這些電信號,得出細胞大小、長度、染色強度和染色部分長度以及細胞的體積資料,并給出每類細胞的散射圖和直方圖,并計算出每微升尿中各種細胞的數(shù)量進行報告。,UF-100尿沉渣分析系統(tǒng)散點圖,,細胞大小,細胞長度,熒光脈沖寬度,前向散射光脈沖寬度,UF-100尿沉渣分析系統(tǒng)散點圖,,細胞大小,染色質(zhì)強度,前向散射光強度,熒光強度,流式細
19、胞術(shù)尿沉渣分析儀檢測參數(shù),紅細胞(RBC) 均一性紅細胞(Isomorphic RBC)% 非均一性紅細胞(Dysmorphic RBC)% 非溶血性紅細胞數(shù)量(Non-Lysed RBC#) 非溶血性紅細胞百分比(Non-Lysed RBC%)白細胞(WBC)上皮細胞(EC)、小圓上皮(SRC)管型(CAST),病理管型(Path.CAST)細菌(BACT)酵母細
20、胞(YLC)精子細胞(SPERM)結(jié)晶(X’TAL)尿液電導(dǎo)率(conductivity),RBCP70 70%紅細胞位置 提示:以未溶解的RBC為100%時,70%紅細胞的平均體積。NLRBC% 未溶解RBC百分比 提示:完整RBC的百分比(不包含影形RBC,RBC碎片,皺縮紅細胞)。,RBC INF 紅細胞信息 提示:RBC來源。,Microcytic (不均一小紅細胞)? 提
21、示紅細胞源于腎小球Normocytic (正常均一紅細胞)? 提示紅細胞非來源于腎小球Non classified (未分類型)? 提示混合型紅細胞細胞 Negative 提示紅細胞計數(shù)正常,病例1:男,29歲,,尿干化學檢查pH 5.0蛋白質(zhì) PRO -葡萄糖GLU -酮體KET -尿膽原UBG -膽紅素BIL -亞硝酸鹽NIT -紅細胞E
22、RY +++白細胞LEU -比密SG 1.015VitC <0.6mmol,尿流式沉渣檢查U-RBC 1440.2 U-WBC 5.9U-EC 1.5 U-CAST 0.13U-BACT 132.6U-Path.CAST 0.0U-SRC 0.0 U-YLC 0.0U-X`TAL 171.6 U-RBC info Is
23、omorphic?U-Nlysed# 1431.3 [/μL] U-Nlysed% 99.3[%],鏡檢結(jié)果WBC:0~3/HP RBC:滿視野/HP,腎結(jié)石,病例2:男,81歲,,鏡檢結(jié)果WBC:滿視野/HP RBC:10~20/HP EC:2~8/HP,急性膀胱炎,尿干化學檢查pH 7.0蛋白質(zhì) PRO +-葡萄糖GLU -酮體KET -尿膽原UBG +-
24、膽紅素BIL -亞硝酸鹽NIT +紅細胞ERY +白細胞LEU +++比密SG 1.010VitC <0.6mmol,尿流式沉渣檢查U-RBC 195.9 U-WBC 1509.8U-EC 74.3 U-CAST 1.15U-BACT 1025.0U-Path.CAST 0.2U-SRC 2.0 U-YLC 0.0U-X`
25、TAL 7.6 U-RBC info Isomorphic?U-Nlysed# 177.9 [/μL] U-Nlysed% 90.8[%],病例3.男,25歲,,鏡檢結(jié)果WBC:5~10/HP RBC:10~20/HP EC:滿視野/HP 透明管型:滿視野/LP 顆粒管型:滿視野/LP,腎小球腎炎,尿干化學檢查pH 6.5蛋白質(zhì) PRO ++葡萄糖GLU -酮體KET
26、 -尿膽原UBG +-膽紅素BIL -亞硝酸鹽NIT -紅細胞ERY +白細胞LEU +比密SG 1.010VitC <0.6mmol,尿流式沉渣檢查U-RBC 141.5 U-WBC 97.0U-EC 602.3 U-CAST 118.39U-BACT 2090.7U-Path.CAST 38.9U-SRC 18.2 U-
27、YLC 0.0U-X`TAL 0.0 U-RBC info Isomorphic?U-Nlysed# 14.8 [/μL] U-Nlysed% 10.4[%],治療前后散點圖對比,,病 例,張某,男,39歲,急性腎小球腎炎。圖示該患者尿液標本UF-100分析儀測試結(jié)果。尿干化學分析結(jié)果:SG: 1.025 KET: neg NIT: negLEU:25/μl
28、 BIL: neg GLU: norm PRO:5.0g/L pH: 7.0 UBG: norm ERY:250 /μl 鏡檢結(jié)果: WBC:5-10/HP RBC:滿視野/HP EC:0-2/HP尿
29、蛋白定量:2.20g/24h尿沉渣分析儀結(jié)果: 紅細胞位于散射圖的左下方,非均一 性紅細胞占99.7%;經(jīng)相差顯微鏡檢查證實為多形性紅細胞,急性腎小球腎炎,,,Dysmorphic RBC % 99.7%,方法學評價,1.優(yōu)點:①不需離心尿液,可自動進樣; ②所需標本量少; ③檢測速度快,效率高,可報告多項參數(shù); ④檢測過程計數(shù)的粒子數(shù)0~40000,提高了準確性; ⑤操作程序同一,易
30、于標準化和質(zhì)量控制。2.局限性: ①對尿液中的某些成分不能準確辨認,仍需顯微鏡進行 分類和確認。 ②應(yīng)用時間短,普及面窄,臨床實際應(yīng)用經(jīng)驗欠缺; ③尚未建立公認的參考范圍;,儀器采用流式細胞術(shù)、高速頻閃光源和電視攝相的光學系統(tǒng),計算機對圖像進行分析等技術(shù)。,圖像識別尿沉渣分析儀,圖像識別尿沉渣分析儀,AVE-763尿沉渣智能分析儀,尿沉渣定量計數(shù)池,圖像識別尿沉渣分析儀—方法學評價,國內(nèi)進入較晚
31、,尚未普及,應(yīng)用經(jīng)驗少,試劑應(yīng)用效果尚待進一步探討。①使用光學流動計數(shù)池,體積準確恒定,視野清晰,由于是密閉的管道,標本不污染工作環(huán)境,安全性好。②由于尿液有形成分復(fù)雜,且易發(fā)生變形,有時圖像識別軟件難以識別。③不能識別的成分如何處理,是否刪除處理。 如細胞管型、細胞重疊、模糊的圖像和碎片等④其誤差如何評估,如何去除干擾⑤如何合理的組合尿干化學與影像學的結(jié)果,尿干化學分析儀 + UF-100尿沉渣分析儀 + 顯
32、微鏡檢查 尿干化學分析儀 + 圖像識別尿沉渣分析儀,(三)尿液自動化分析工作站,急性膀胱炎(治療前)RBC:195.9 [μL]WBC:1509.5 [μL]EC:74.3 [μL]BACT:1025.0 [μL],急性膀胱炎(治療中)RBC:33.3 [μL]WBC:284.8 [μL]EC:76.4 [μL]BACT:544 [μL],,,,腎結(jié)石病人RBC:1440.2 [μL]WBC:5.9 [
33、μL]BACT:132.6 [μL]Dysmorphic RBC %: 8.8%,透明度顏色SG 1.010PH 5.5NIT + LEU ++ 150/uLPRO ++ 1.0g/LGLU ++ 5.5mmol/LKET negBIL neg
34、UBG normERY ++150/uL,CONDCT 21.1 mS/cmPCASTF 0.3 /uLN-WBC 50/ uLBACT 8000/ uLCAST 0.5 /uLSRC 0.8 /uLEC 82 /uL
35、N-RBC 50/ uLRBC70 88.6NLRBC% 58.4RBCINF MicroyticYLC 0.0 /uLXTAC,結(jié)果分析,NIT + BACT >8000 /uL WBC >10/uL尿細菌感染可能性大,尿培養(yǎng)陽性率高。ERY ++ 150/uL N-RBC 50/uL , ER
36、Y檢測的是Hb,而UF-100檢測的是完整的細胞,可能溶血,RBCINF 為Microytic,提示紅細胞源于腎小球。LEU ++ 250/uL N-WBC 50/uL ,LEU尿白細胞檢測的是粒細胞酯酶,而N-WBC檢測的是完整的細胞,影響因素細菌、滲透壓等。,顏色透明度SG 1.015PH 6.0LEU + 25/uLNIT
37、 neg PRO ++ 1.0g/LGLU normKET negBIL negUBG normERY + 10/uL,CONDCT 21.1 mS/cmPCASTF 0.3 /uLN-WBC 100/ uLBACT 6500
38、/uLCAST 0.5 /uLSRC 0.38/uLEC 0.3 /uLN-RBC 200/uLRBC70 78.6NLRBC% 58.4RBCINF MicroyticYLC 450 /uLXTAC,結(jié)果分析,ERY + 25/uL N-
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