臨床意義特種蛋白_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、特種蛋白,市場(chǎng)中心,免疫比濁法檢測(cè)抗鏈球菌,免疫比濁法檢測(cè)抗鏈球菌,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】 A組鏈球菌的代謝產(chǎn)物之一,可以溶解人紅細(xì)胞,具有很強(qiáng)的抗原性。   【抗鏈球菌溶血素O】機(jī)體因咽炎、扁桃體炎、猩紅熱、丹毒、膿皮病、風(fēng)濕熱等感染A組鏈球菌后,可產(chǎn)生鏈球菌溶血素O抗體,即“Anti-Streptolysin O(ASO)”。。,【反應(yīng)原理】樣本中的ASO與超敏化的抗ASO抗體膠乳顆粒試劑反應(yīng),形成免疫復(fù)合物,

2、在波長(zhǎng)570nm處檢測(cè)其濁度變化,其變化程度與樣本中的ASO含量成正比。,【試劑構(gòu)成】試劑1(R1): 氨基乙酸緩沖液 試劑2(R2):乳膠顆粒超敏化的鏈球菌素O膠乳顆粒 0.12w/v%,【樣本指標(biāo)】 新鮮血清。樣本穩(wěn)定性:2~8℃保存穩(wěn)定2天;-20℃保存更長(zhǎng)時(shí)間。樣本中膽紅素≤60μmol/L、血紅蛋白≤12 mg/dL、肝素≤20IU/mL、EDTA≤300μM時(shí)未

3、觀察到明顯干擾。,【操作方法】1.用去離子水將ASO校準(zhǔn)液按倍比稀釋?zhuān)运疄榱泓c(diǎn),建立工作曲線。校準(zhǔn)品另購(gòu),建議使用RANDOX或其它有溯源性的校準(zhǔn)品。 稀釋方法如下:,2.參數(shù)設(shè)置(biobase):主/副波長(zhǎng) :578nm/700nm 比色杯光徑 : 1.0cm 溫度: 37℃ 分析類(lèi)型: 終點(diǎn)法3.自動(dòng)分析: 自動(dòng)化生化分析儀操作程序的設(shè)置 按手工操作法的設(shè)置,

4、根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室擁有的分析儀型號(hào)及操作說(shuō)明書(shū)而設(shè)置。4..適合儀器: BIOBASE系列分立式全自動(dòng)生化分析儀、日立、OLYMPUS 東芝等全自動(dòng)生化分析儀【計(jì)算方式】 樣本ΔA 樣本ASO濃度= × 標(biāo)準(zhǔn)濃度 標(biāo)準(zhǔn)ΔA,,,,,,,,,R1:試劑1R1:100

5、µlS:校準(zhǔn)品 或U:樣品 3 µl,預(yù)孵預(yù)時(shí)間,延遲時(shí)間,讀數(shù)時(shí)間,讀取吸光度A1,讀取吸光度A2,計(jì)算ΔA,操作過(guò)程,R2:試劑2,R2:170 µl,【性能指標(biāo)】 1.試劑空白吸光度≤1.0000,(570nm,lcm光徑)。2.精密度:重復(fù)性≤10%,批間相對(duì)極差R≤10%。3.準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差為≤10%。4.線性范圍:0~1200IU/mL ,r≥0.990。5. 穩(wěn)定性:本

6、試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,【參考范圍】小于 166IU/mL【臨床意義】用于檢測(cè)人體血清中抗鏈球菌溶血素O(ASO)的含量。 機(jī)體被鏈球菌感染后可產(chǎn)生抗鏈球菌溶血素O抗體,(ASO)此抗體是鏈球菌的外毒素。檢測(cè)ASO有助于診斷由溶血性鏈球菌引起的疾病如類(lèi)風(fēng)濕、急性腎小球疾病、猩紅熱和扁桃體炎等疾病。,【注意事項(xiàng)】1. 試劑含有疊氮化鈉(有毒性),誤入眼、口中或沾染到皮膚上請(qǐng)立即 用水

7、徹底沖洗,必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬 發(fā)生強(qiáng)烈的反應(yīng)生成疊氮化金屬,故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗 排水管,以免在排水管中有殘留。 2. 不同批號(hào)試劑不能混用,更換試劑批號(hào)時(shí),請(qǐng)重新定標(biāo)!3. 試劑開(kāi)封后應(yīng)按指定方法密閉儲(chǔ)存。4. 接觸過(guò)檢測(cè)標(biāo)本的試管等器具應(yīng)按醫(yī)療廢棄物處理辦法進(jìn)行處置。,【參考文獻(xiàn)】[1]全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( National Guide to Clinical Laborato

8、ry Procedures)(第3 版) (Third Edition)——中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司,葉應(yīng)撫、王毓三、申子瑜。[2]《現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)》,張秀明、李健齋。 [3]《實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)》,朱忠勇。,免疫比濁法檢測(cè)C反應(yīng)蛋白,免疫比濁法檢測(cè)C反應(yīng)蛋白,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】 C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP),1930年Tillet和Francis在急性大葉性肺炎患者血清中發(fā)現(xiàn)能在

9、鈣離子存在時(shí)與肺炎球菌C多糖起沉淀反應(yīng)而得名,是人類(lèi)重要的急性期反應(yīng)蛋白,急性期濃度可升高上千倍,循環(huán)中的CRP半衰期為19小時(shí)。人類(lèi)CRP是由肝臟產(chǎn)生,由五個(gè)相同的亞基依靠非共價(jià)鍵形成的環(huán)狀五聚體,這一特征性結(jié)構(gòu)使其歸類(lèi)于五聚素(一組具有免疫防御特性的鈣結(jié)合蛋白)家族。低等動(dòng)物同樣存在CRP,如在鱟、河蚌等中也發(fā)現(xiàn)過(guò),但并不一定起急性期反應(yīng)蛋白的作用。CRP特征反應(yīng)是能在鈣離子存在的條件下特異性結(jié)合磷酸膽堿基團(tuán)。通過(guò)與配體(凋亡與壞

10、死的細(xì)胞,或入侵的細(xì)菌、真菌、寄生蟲(chóng)等的磷酰膽堿)結(jié)合,激活補(bǔ)體和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng),將載有配體的病理物質(zhì)或病原體清除。   識(shí)別外來(lái)物質(zhì),激活補(bǔ)體系統(tǒng)。   增強(qiáng)條理作用,增強(qiáng)吞噬細(xì)胞吞噬作用   與血小板激活因子(RAF)結(jié)合,降低炎癥反應(yīng)。   與染色體結(jié)合,消除壞死組織里的細(xì)胞DNA。 。,【反應(yīng)原理】樣本中的CRP與超敏化的抗CRP抗體膠乳顆粒試劑反應(yīng),形成免疫復(fù)合物,在波長(zhǎng)570nm處檢測(cè)其濁度變化,其變化程度與樣

11、本中的CRP含量成正比。,,【試劑構(gòu)成】試劑1(R1): 氨基乙酸緩沖液 試劑2(R2):乳膠顆粒超敏化的CRP抗體液 0.20w/v%,,【樣本指標(biāo)】 新鮮血清或肝素抗凝血漿。樣本穩(wěn)定性:15~25℃可穩(wěn)定3天;2~8℃保存穩(wěn)定6天;-20℃保存至少可穩(wěn)定6個(gè)月。樣本中膽紅素≤100μmol

12、/L、血紅蛋白≤5.0mg/dL時(shí)未觀察到明顯干擾。,,測(cè)定條件:主波長(zhǎng) 570nm副波長(zhǎng) 800 nm比色杯光徑 1.0cm溫度 37℃分析類(lèi)型 終點(diǎn)法校準(zhǔn)程序:用去離子水將CRP校準(zhǔn)液按倍比稀釋?zhuān)运疄榱泓c(diǎn),建立工作曲線。校準(zhǔn)品另購(gòu),建議使用RANDOX或其它有溯源性的校準(zhǔn)品。 稀釋方法如下:,

13、操作步驟,,,,,,,,R1:試劑1 R1:100µl,預(yù)孵預(yù)時(shí)間,延遲時(shí)間,讀數(shù)時(shí)間,,計(jì)算方法 樣本ΔA 樣本CRP濃度 = × 標(biāo)準(zhǔn)濃度 標(biāo)準(zhǔn)ΔA,蒸餾水、U或S:2µl,R2:試劑2,R2:100 µl,讀取吸光度A2 計(jì)算ΔA,

14、讀取吸光度A1,【性能指標(biāo)】 1.試劑空白吸光度≤1.0000,(570nm,lcm光徑)。2.精密度:重復(fù)性≤10%,批間相對(duì)極差R≤10%。3.準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。4.線性范圍:0~32.0mg/dL,r≥0.990。5. 穩(wěn)定性:本試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,【參考值】0 ~ 0.6mg/dL【臨床意義】CRP是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。在機(jī)體發(fā)炎時(shí),患者血清中的CRP升高。尤其以肺

15、炎球菌感染、組織感染等多種疾病升高明顯。在1930年,CRP由Tillet在急性感染患者血清中發(fā)現(xiàn),現(xiàn)在CRP已成為檢測(cè)感染和發(fā)炎的敏感指標(biāo)。并對(duì)手術(shù)等患者的監(jiān)視和對(duì)嬰兒感染的早期診斷有一定的幫助。研究還發(fā)現(xiàn),正常值范圍內(nèi)的高水平CRP與心肌疾病的死亡率有關(guān),是心血管疾病的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素。,【參考文獻(xiàn)】[1]全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( National Guide to Clinical Laboratory Procedures)(第

16、3 版) (Third Edition)——中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司,葉應(yīng)撫、王毓三、申子瑜。[2]《現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)》,張秀明、李健齋。 [3]《實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)》,朱忠勇。,免疫比濁法檢測(cè)前白蛋白,免疫比濁法檢測(cè)抗鏈球菌,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】前白蛋白(甲狀腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)是一類(lèi)富含色氨酸55KDa 的蛋白,由肝細(xì)胞合成,主要作用是結(jié)合與轉(zhuǎn)運(yùn)。【反應(yīng)原理】先將樣本與緩沖液溫育,然后加入前白蛋白抗體試劑,340nm讀取混濁液的吸光度與樣

17、本中前白蛋白濃度成正比。樣本濃度值可由標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得。,【試劑構(gòu)成】試劑1(R1):Tris/HCl 緩沖液 試劑2(R2):抗人前白蛋白抗體Tris/HCl 緩沖液,【樣本指標(biāo)】 新鮮血清。在2-8℃保存穩(wěn)定72小時(shí); -20℃可保存6個(gè)月。

18、 樣本中膽紅素≤1000umol/L、類(lèi)風(fēng)濕因子≤600IU/mL、血紅蛋白≤200mg/dL、血脂(甘油三酯)≤500mg/dL時(shí)未觀察到明顯干擾。,測(cè)定條件:主波長(zhǎng) 340 nm副波長(zhǎng) 700nm比色杯光徑 1.0cm 溫度

19、 37℃ 分析類(lèi)型 終點(diǎn)法校準(zhǔn)程序:用去離子水將PALB校準(zhǔn)液按倍比稀釋?zhuān)运疄榱泓c(diǎn),建立工作曲線。校準(zhǔn)品另購(gòu),建議使用RANDOX或其它有溯源性的校準(zhǔn)品。 稀釋方法如下:,操作步驟,,計(jì)算方法 樣本ΔA 樣本PALB濃度

20、 = × 標(biāo)準(zhǔn)濃度 標(biāo)準(zhǔn)ΔA,,,,,,,R1:試劑1 R2:試劑2 S:校準(zhǔn)品 U:樣品,預(yù)孵育時(shí)間,延遲時(shí)間,蒸餾水、U或 讀取吸光A1 R2:75μl 讀取吸光度A2 S:6μl;R1:255μl

21、 計(jì)算ΔA,【性能指標(biāo)】 1. 試劑空白吸光度≤1.1000,(340nm,lcm光徑)。 2. 精密度:重復(fù)性CV≤10%;批間相對(duì)極差R≤10%。

22、 3. 準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。 4. 線性范圍:0 ~60 mg/dL,r≥0.990。 5. 穩(wěn)定性:本試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,【參考范圍】20~40

23、mg/dL 【臨床意義】前白蛋白是反映 體內(nèi)蛋白狀態(tài)的優(yōu)良指標(biāo)。前白蛋白降低見(jiàn)于蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良(PCM)、肝功能損傷、肝硬化、外傷及感染。皮質(zhì)醇、帕金 森氏病、飲酒和口服避孕藥可導(dǎo)致前白蛋白升高。,【注意事項(xiàng)】1. 試劑含有疊氮化鈉(有毒性),誤入眼、口中或沾染到皮膚上請(qǐng)立即 用水徹底沖洗,必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬 發(fā)生強(qiáng)烈的反應(yīng)生成疊氮化金屬,故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗 排水管,以免在排

24、水管中有殘留。 2. 不同批號(hào)試劑不能混用,更換試劑批號(hào)時(shí),請(qǐng)重新定標(biāo)!3. 試劑開(kāi)封后應(yīng)按指定方法密閉儲(chǔ)存。4. 接觸過(guò)檢測(cè)標(biāo)本的試管等器具應(yīng)按醫(yī)療廢棄物處理辦法進(jìn)行處置。,【參考文獻(xiàn)】[1]全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( National Guide to Clinical Laboratory Procedures)(第3 版) (Third Edition)——中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司,葉應(yīng)撫、王毓三、申子瑜。[2]《現(xiàn)代臨

25、床生化檢驗(yàn)學(xué)》,張秀明、李健齋。 [3]《實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)》,朱忠勇。,免疫比濁法檢測(cè)轉(zhuǎn)鐵蛋白,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì),負(fù)責(zé)運(yùn)載由消化管吸收的鐵和由紅細(xì)胞降解釋放的鐵。以TRF-Fe3+的復(fù)合物形式進(jìn)入骨髓中,供成熟紅細(xì)胞的生成。   TRF分子量約7.7萬(wàn),為單鏈糖蛋白,含糖量約6%。TRF可逆地結(jié)合多價(jià)離子,包括鐵、銅、鋅、鈷等。每一分子TRF可結(jié)合兩個(gè)三價(jià)鐵原子。TRF主要由肝細(xì)胞合成,半衰期為7天。血漿中TRF

26、的濃度受鐵供應(yīng)的調(diào)節(jié),在缺鐵狀態(tài)時(shí),血漿TRF濃度上升,經(jīng)鐵有效治療后恢復(fù)到正常水平。,【反應(yīng)原理】標(biāo)本中的轉(zhuǎn)鐵蛋白與試劑中抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體在緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物,使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過(guò)剩時(shí),形成的復(fù)合物隨抗原量增加而增加,反應(yīng)液的濁度亦隨之增加,在 340nm以終點(diǎn)法監(jiān)測(cè)吸光度變化,與校準(zhǔn)品對(duì)照,即可計(jì)算出未知標(biāo)本中轉(zhuǎn)鐵蛋白的含量。,【試劑構(gòu)成】試劑1(R1):PBS緩沖液(磷酸鹽緩沖液)

27、 疊氮化鈉 試劑2(R2):抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體 疊氮化鈉,【樣本指標(biāo)】 標(biāo)本為離心分離除去血液凝塊的新鮮血清。血清樣本可在 2 - 8°C下儲(chǔ)存不超過(guò)一周。如果需要保存更長(zhǎng)的時(shí)間,標(biāo)本必須冷凍。樣本中乳糜≤0.3%、膽紅素≤500uM、肝素鈉≤100U/mL、血紅蛋白≤5g/L、VC≤0.5g/L時(shí)未觀察到明顯干擾。,測(cè)

28、定條件:主波長(zhǎng) 340nm副波長(zhǎng) 700nm比色杯光徑 1.0cm溫度 37℃分析類(lèi)型 終點(diǎn)法校準(zhǔn)程序:用去離子水將TRF校準(zhǔn)液按倍比稀釋?zhuān)运疄榱泓c(diǎn),建立工作曲線。校準(zhǔn)品另購(gòu),建議使用RANDOX或其它有溯源性的校準(zhǔn)品。 稀釋方法如下:,操作步驟,,計(jì)算方法

29、 樣本ΔA 樣本TRF濃度 = × 標(biāo)準(zhǔn)濃度 標(biāo)準(zhǔn)ΔA,,,,,,,R1:試劑1 R2:試劑2 S:校準(zhǔn)品 U:樣品,預(yù)孵育時(shí)間,延遲時(shí)間,蒸餾水、U或 讀取吸光A1 R2:80μl 讀取吸光度A2 S:3μl;R1:2

30、40μl 計(jì)算ΔA,【性能指標(biāo)】 1. 試劑空白吸光度≤0.3000,(340nm,lcm光徑)。2. 精密度:重復(fù)性CV≤6%;批間相對(duì)極差R≤8%。3. 準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。4. 線性范圍:0 ~ 400 mg/dL,r≥0.990。 5. 穩(wěn)定性:本試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,【參考范圍】170 ~ 340mg

31、/dL【臨床意義】前白蛋白是反映 體內(nèi)蛋白狀態(tài)的優(yōu)良指標(biāo)。前白蛋白降低見(jiàn)于蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良(PCM)、肝功能損傷、肝硬化、外傷及感染。皮質(zhì)醇、帕金 森氏病、飲酒和口服避孕藥可導(dǎo)致前白蛋白升高。,【注意事項(xiàng)】1. 本品僅用于體外診斷。如與人體接觸,應(yīng)用大量水沖洗。2. 如儀器內(nèi)無(wú)指定波長(zhǎng),選擇波長(zhǎng)接近的數(shù)值輸入。3. 建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的正常值范圍。4. 不同批號(hào)試劑不能混用,更換試劑批號(hào)時(shí),請(qǐng)重新定標(biāo)!5. 試劑如需廢棄

32、,請(qǐng)用大量水稀釋后再處理。,【參考文獻(xiàn)】[1]全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( National Guide to Clinical Laboratory Procedures)(第3 版) (Third Edition)——中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司,葉應(yīng)撫、王毓三、申子瑜。[2]《現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)》,張秀明、李健齋。 [3]《實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)》,朱忠勇。,紫外速率法檢測(cè)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】一種存在於人體紅血球內(nèi),協(xié)助葡

33、萄糖進(jìn)行新陳代謝之酵素,在這代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一種叫NADPH的物質(zhì)能以保護(hù)紅血球免受氧化物質(zhì)的威脅。 G6PD缺乏時(shí),若身體接觸到具氧化性的特定物質(zhì)或服用了這類(lèi)藥物,紅血球就容易被破壞而發(fā)生急性溶血反應(yīng)。,【反應(yīng)原理】G6PD在NADP存在條件下催化6磷酸葡萄糖生成6磷酸葡萄糖醛酸和NADPH。在340nm處測(cè)定NADPH的生成速率,即可測(cè)定葡萄糖6磷酸脫氫酶的活性。

34、 G6PD葡萄糖6磷酸+NADP ------- NADPH+ 6磷酸葡萄糖醛酸結(jié)合血紅蛋白含量或者溶血指數(shù)的測(cè)定,可以計(jì)算出每克血紅蛋白中葡萄糖6磷酸脫氫酶的活性。,【試劑構(gòu)成】試劑1(R1):Tris緩沖液 200mmol/L 氯化鈉 120mmol/L

35、 試劑2(R2): 葡萄糖6磷酸 5.0mmol/LNADP 2.5mmol/L,【樣本指標(biāo)】 全血標(biāo)本處理以及保存:肝素或EDTA-K抗凝全血,2-8℃可保存1周。取EDTA-K抗凝全血,在3000轉(zhuǎn)/分鐘條件下,離心5分鐘,去掉上清,吸取下層壓積紅細(xì)胞20uL加入1mL去離子水中(稀釋51倍),充分

36、混勻待紅細(xì)胞完全溶解后(15-30分種)測(cè)定。G6PD在紅細(xì)胞中很穩(wěn)定,但溶血處理后,活性在1h內(nèi)喪失30%,樣本應(yīng)盡快處理。樣本中銅離子≤100μmol/L、硫酸鹽≤5mmol/L時(shí)未觀察到明顯干擾。,測(cè)定條件:主波長(zhǎng) 340nm 副波長(zhǎng) 405nm比色杯光徑 1.0cm溫度 37℃分析類(lèi)型 速率法校準(zhǔn)程序:采用因子法定標(biāo)。,,

37、操作步驟,,計(jì)算方法計(jì)算方法 ΔA/min×Vt×1000溶血液G6PD活性(U/L) = ---------------------- = A/min×F1* e×Vs×d壓積紅細(xì)胞中G6PD活性(U/L

38、)= 溶血液G6PD活性×51= F2*×△A/min比色杯光徑為1cm時(shí),F(xiàn)2*= F1*×51=204970,,,,,,,蒸餾水、U:15μl R1:270μl,R2:90μl,讀取吸光度A2,計(jì)算△A/min,R1:試劑1 R2:試劑2 U:樣品,預(yù)孵育時(shí)間,延遲時(shí)間,讀數(shù)時(shí)間,,,讀取吸光度A1,【性能指標(biāo)】 1. 試劑空白吸光度≤0.3000,(340nm,lcm光徑)。2. 精密

39、度:重復(fù)性CV≤6%;批間相對(duì)極差R≤8%。3. 準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。4. 線性范圍:0~76500 U/L,r≥0.990。5. 穩(wěn)定性:本試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,【參考范圍】采用肝素抗凝血,大于1100 U/L;采用EDTA抗凝血,大于1300U/L?!九R床意義】葡萄糖6磷酸脫氫酶缺乏癥常見(jiàn)于我國(guó)長(zhǎng)江流域及其以南各省。葡萄糖6磷酸脫氫酶缺乏癥是由基因突變引起的遺傳性疾病,由于該基

40、因?yàn)閄連鎖不完全顯性遺傳,男性發(fā)病率高于女性。G6PD缺乏是誘發(fā)伯氨奎啉類(lèi)藥物性溶血、蠶豆病、新生兒病理性黃疸、某些感染性貧血的主要原因。對(duì)高發(fā)病區(qū)人群進(jìn)行該項(xiàng)指標(biāo)的篩查,可以有效預(yù)防溶血癥的發(fā)生。進(jìn)行婚前體檢和產(chǎn)前檢查對(duì)優(yōu)生優(yōu)育和有效預(yù)防新生兒黃疸有重要意義 。,【注意事項(xiàng)】1. 本品僅用于體外診斷。如與人體接觸,應(yīng)用大量水沖洗。2. 如儀器內(nèi)無(wú)指定波長(zhǎng),選擇波長(zhǎng)接近的數(shù)值輸入。3. 不同批號(hào)試劑不能混用,更換試劑批號(hào)時(shí),請(qǐng)重新

41、定標(biāo)!4. 試劑如需廢棄,請(qǐng)用大量水稀釋后再處理。,【參考文獻(xiàn)】[1]全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( National Guide to Clinical Laboratory Procedures)(第3 版) (Third Edition)——中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司,葉應(yīng)撫、王毓三、申子瑜。[2]《現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)》,張秀明、李健齋。 [3]《實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)》,朱忠勇。,免疫比濁法檢測(cè)D二聚體,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】D-二聚體是纖維蛋

42、白單體經(jīng)活化因子XIII交聯(lián)后,再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物,是一個(gè)特異性的纖溶過(guò)程標(biāo)記物。D-二聚體來(lái)源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊。人體纖溶系統(tǒng),它對(duì)保持血管壁的正常通透性,維持血液的流動(dòng)狀態(tài)和組織修復(fù)起著重要作用。D-二聚體血漿中水平增高說(shuō)明存在繼發(fā)性纖溶過(guò)程,而先生凝血酶,后又有纖溶系活化;并且也反映在血栓形成的局部纖溶酶活性或濃度超過(guò)血漿2‰─抗纖溶酶活性或濃度。溶栓治療是指用藥物來(lái)活化纖維蛋白溶解系統(tǒng)。一般為投

43、入一種纖溶酶原活化物如尿液酶、鏈激酶或組織型纖溶酶原活化物(tpA),使大量纖溶酶生成,從而加速已形成血栓的溶解。FDP或D-二聚體生成,則表明達(dá)到溶栓效果。 纖溶蛋白降解產(chǎn)物中,唯D-二聚體交聯(lián)碎片可反映血栓形成后的溶栓活性。因此,理論上,D-二聚體的定量檢測(cè)可定量反映藥物的溶栓效果、及可用于診斷、篩選新形成的血栓。但是,到目前為止,商品的D-二聚體檢測(cè)手段都尚存在一定局限性。其中D-二聚體的膠體金免疫過(guò)濾檢測(cè)法,由于其快速測(cè)定、靈

44、敏度高、陰性預(yù)報(bào)值高,重復(fù)性良好,臨床醫(yī)師較多采用。,【反應(yīng)原理】試劑中包含膠乳顆粒與抗DD的單克隆抗體結(jié)合。膠乳顆粒在570nm 產(chǎn)生吸收,當(dāng)和樣本中的DD發(fā)生凝集,在570nm吸光度上升,吸光度上升決定于DD的濃度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可以檢測(cè)出樣本中DD含量。,【試劑構(gòu)成】試劑1(R1):Tris緩沖液 PH7.4 試劑2(R2):膠乳顆粒包被的抗體,

45、【樣本指標(biāo)】 新鮮血清或肝素抗凝血漿,避免溶血。血清可在-20°C下保存1個(gè)月。樣本中乳糜≤0.5%、膽紅素≤500uM、RF≤500U/mL、血紅蛋白≤10g/L、VC≤0.5g/L時(shí)未觀察到明顯干擾。,測(cè)定條件:波長(zhǎng) 570nm比色杯光徑 1.0cm溫度 37℃分析類(lèi)型 終點(diǎn)法校準(zhǔn)程序:用去離子水將DD校準(zhǔn)液按倍比稀釋?zhuān)?/p>

46、水為零點(diǎn),建立工作曲線。校準(zhǔn)品另購(gòu),建議使用RANDOX或其它有溯源性的校準(zhǔn)品。 稀釋方法如下:,操作步驟,,計(jì)算方法 樣本ΔA 樣本DD濃度 = × 標(biāo)準(zhǔn)濃度 標(biāo)準(zhǔn)ΔA,,,,,,,R1:試劑1 R2:試劑2 S:校準(zhǔn)品 U:樣品,預(yù)孵育時(shí)間

47、,延遲時(shí)間,蒸餾水、U或 讀取吸光A1 R2:60μl 讀取吸光度A2 S:10μl;R1:180μl 計(jì)算ΔA,【性能指標(biāo)】 1. 試劑空白吸光度≤2.0000,(570nm,lcm光徑)。2. 精密度:重復(fù)性CV≤10%;批間相對(duì)極差R≤15%。3. 準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。4. 線性范圍:0~

48、20μg/mL,r≥0.990。5. 穩(wěn)定性:本試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,【參考范圍】小于1.0μg/mL 【臨床意義】前白蛋白是反映 體內(nèi)蛋白狀態(tài)的優(yōu)良指標(biāo)。前白蛋白降低見(jiàn)于蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良(PCM)、肝功能損傷、肝硬化、外傷及感染。皮質(zhì)醇、帕金 森氏病、飲酒和口服避孕藥可導(dǎo)致前白蛋白升高。,【注意事項(xiàng)】1. 本品僅用于體外診斷。如與人體接觸,應(yīng)用大量水沖洗。2. 如儀器內(nèi)無(wú)指定波長(zhǎng),選擇波

49、長(zhǎng)接近的數(shù)值輸入。3. 不同批號(hào)試劑不能混用,更換試劑批號(hào)時(shí),請(qǐng)重新定標(biāo)!4. 試劑如需廢棄,請(qǐng)用大量水稀釋后再處理。,【參考文獻(xiàn)】[1]全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( National Guide to Clinical Laboratory Procedures)(第3 版) (Third Edition)——中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司,葉應(yīng)撫、王毓三、申子瑜。[2]《現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)》,張秀明、李健齋。 [3]《實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)

50、》,朱忠勇。,免疫比濁法檢測(cè)補(bǔ)體C3 C4,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】C3主要是由巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴組織、骨髓、腹膜和肝臟等合成的一種β球蛋白。C3在C3裂解酶的作用下進(jìn)一步裂解,參與所有補(bǔ)體的激活。 C4是補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑的一個(gè)重要組分,它的測(cè)定有助于SLE等自身免疫性疾病診斷,治療和病因探討。,【反應(yīng)原理】以免疫比濁法為測(cè)定原理。補(bǔ)體C3、C4抗體與補(bǔ)體C3、C4抗原引起抗原抗體反應(yīng),形成免疫復(fù)合物。在340nm波長(zhǎng)處檢測(cè)其濁度的變化,

51、其變化程度與樣本中的補(bǔ)體C3、C4含量成正比。,【試劑構(gòu)成】C3 試劑1(R1): Tris緩沖液 pH 7.6 18.16 mmol/L 聚乙二醇 氯化鈉

52、 123.20 mmol/L 表面活性劑與防腐劑試劑2(R2): Tris緩沖液 pH 7.6 18.16 mmol/L 抗人C3抗體

53、 防腐劑 C4 試劑1(R1): Tris緩沖液 pH 7.618.16 mmol/L 氯化鈉 123.20 mmol/L 表面活性劑與防腐劑 聚乙二醇試劑2(R2): Tris

54、緩沖液 pH 7.6 18.16 mmol/L抗人C4抗體 防腐劑,【樣本指標(biāo)】 血清、肝素或 EDTA血漿也能作為樣本被使用。樣本中脂血≤5 g/L、膽紅素≤ 600umol/L、溶血≤5g/L時(shí)未觀察到明顯干擾。,測(cè)定條件:主波長(zhǎng) 340 nm

55、副波長(zhǎng) 700nm比色杯光徑 1.0cm 溫度 37℃ 分析類(lèi)型 終點(diǎn)法校準(zhǔn)程序:用去離子水將C3、C4校準(zhǔn)液按倍比稀釋?zhuān)运疄榱泓c(diǎn),

56、建立工作曲線。校準(zhǔn)品另購(gòu),建議使用RANDOX或其它有溯源性的校準(zhǔn)品。 稀釋方法如下:,操作步驟,,,,,,,,,蒸餾水、U:2μl R1:250μl,R2:50μl,讀取兩次吸光度,計(jì)算△A/min,R1:試劑1 R2:試劑2 U:樣品,預(yù)孵育時(shí)間,延遲時(shí)間,讀數(shù)時(shí)間,計(jì)算方法 樣本ΔA 樣本補(bǔ)體濃度 = 

57、15; 標(biāo)準(zhǔn)濃度 標(biāo)準(zhǔn)ΔA,,讀取吸光度A1,讀取吸光度A1,C3【性能指標(biāo)】 1. 試劑空白吸光度≤0.2000,(340nm,lcm光徑)。 2. 精密度:重復(fù)性CV≤10%;批間相對(duì)極差R≤10%。 3

58、. 準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。 4. 線性范圍:0~520 mg/dL (0~5.20g/L),r≥0.990。 5. 穩(wěn)定性:本試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,C4【性能指標(biāo)】

59、 1. 試劑空白吸光度≤0.5000,(340nm,lcm光徑)。 2. 精密度:重復(fù)性CV≤10%;批間相對(duì)極差R≤10%。 3. 準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤10%。

60、 4. 線性范圍:0 ~130 mg/dL (0~1.3 g/L),r≥0.990。 5. 穩(wěn)定性:本試劑在2℃~8℃、無(wú)腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月。,【參考范圍】C3成人: 82~180 mg/dL (0.82~1.80 g/L) C4成人

61、:10~40 mg/dL (0.1~0.4 g/L) 單位換算: mg/dL x 0.01 = g/L 【臨床意義】C3是補(bǔ)體系統(tǒng)中含量最多、最重要的一個(gè)組分,它是補(bǔ)體兩條主要激活系統(tǒng)的中心環(huán)節(jié)。C3含量減低主要見(jiàn)于免疫復(fù)合物引起的腎炎、系統(tǒng)

62、性紅斑狼瘡、反復(fù)性感染、皮疹、肝炎、肝硬化、關(guān)節(jié)疼痛等。狼瘡性腎炎患者血清C3含量減少,病情緩解后可恢復(fù)正常,故C3的測(cè)定不僅有助于診斷,還可以觀察療效和監(jiān)測(cè)預(yù)后。 C4含量降低見(jiàn)于自身免疫性慢性活動(dòng)性肝炎、SLE、多發(fā)性硬化癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、LgA腎病。在SLE,C4的降低常早于其它的補(bǔ)體成份,且緩解時(shí)較其它成份回升遲。狼瘡性腎炎較非狼瘡性腎炎C4值顯著低下。C4含量增高常見(jiàn)于風(fēng)濕熱的急性期、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周?chē)?、皮肌炎、心肌梗塞、R

63、diter’s綜合癥和各種類(lèi)型的多關(guān)節(jié)炎。,【注意事項(xiàng)】1. 試劑含有疊氮化鈉(有毒性),誤入眼、口中或沾染到皮膚上請(qǐng)立即 用水徹底沖洗,必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬 發(fā)生強(qiáng)烈的反應(yīng)生成疊氮化金屬,故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗 排水管,以免在排水管中有殘留。 2. 不同批號(hào)試劑不能混用,更換試劑批號(hào)時(shí),請(qǐng)重新定標(biāo)!3. 試劑開(kāi)封后應(yīng)按指定方法密閉儲(chǔ)存。4. 接觸過(guò)檢測(cè)標(biāo)本的試管等器具應(yīng)按醫(yī)療廢棄

64、物處理辦法進(jìn)行處置。,【參考文獻(xiàn)】[1]全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( National Guide to Clinical Laboratory Procedures)(第3 版) (Third Edition)——中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司,葉應(yīng)撫、王毓三、申子瑜。[2]《現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)》,張秀明、李健齋。 [3]《實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)》,朱忠勇。,免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白,【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】免疫球蛋白(immunoglobulin)指具有

65、抗體活性的動(dòng)物蛋白。主要存在于血漿中,也見(jiàn)于其他體液、組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白(γ-球蛋白)中。免疫球蛋白可以分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類(lèi)。,【反應(yīng)原理】基于IgA、IgM、IgG抗體與IgA、IgM、IgG抗原間的反應(yīng),形成免疫復(fù)合物,分別在340、340、700nm波長(zhǎng)處檢測(cè)其濁度變化,其變化程度與樣本中的IgA、IgM、IgG含量成正比。,IgA【試劑構(gòu)成】試劑1(R1)

66、:Tris緩沖液 pH7.6 18.16 mmol/L氯化鈉 聚乙二醇 防腐劑試劑2(R2):

67、 Tris緩沖液 pH 7.6 18.16 mmol/LIgA抗體防腐劑,IgM試劑1(R1):Tris緩沖液 pH7.6 18.16 mmol/L 氯化鈉 123.20 mmol/L 聚乙二醇

68、 防腐劑試劑2(R2):Tris緩沖液 pH 7.6 18.16 mmol/LIgM抗體 防腐劑,IgG【試劑組成】試劑1(R1):Tris緩沖液 pH7.6 18.16 mmol/L 氯化鈉 1

69、23.20 mmol/L 聚乙二醇防腐劑試劑2(R2):Tris緩沖液pH 7.6 18.16 mmol/L IgG抗體 防腐劑,【樣本指標(biāo)】 血清,肝素或EDTA抗凝血漿。血清或血漿應(yīng)當(dāng)在收集后2小時(shí)內(nèi)從血細(xì)胞中被分離。樣本穩(wěn)定性:2-8℃下保存3個(gè)月。樣本中膽紅素≤600µmol /L,溶血≤5g/

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