光學(xué)顯微鏡的使用

1、實驗一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方法及生物繪圖,陳碧峰,借助于什么儀器才能觀察到用肉眼無法看到的細(xì)微結(jié)構(gòu)呢？,顯微鏡,想一想？,各種各樣的細(xì)胞,學(xué)習(xí)目標(biāo)：,1、認(rèn)識顯微鏡各部分結(jié)構(gòu)的名稱2、學(xué)習(xí)顯微鏡在使用過程中應(yīng)注意 的一些事項3、了解生物繪圖的主要技法。4、掌握生物繪圖的基本方法,早期的顯微鏡,普通光學(xué)顯微鏡,掃描電子顯微鏡,透射電子顯微鏡,光學(xué)顯微鏡和它拍攝的圖片,電子顯微鏡和它拍攝的圖片,光學(xué)顯微鏡主要由以下幾

2、個部分組成：1）機械系統(tǒng): 鏡座與鏡柱 載物臺 鏡臂和臂筒 鏡頭轉(zhuǎn)換器 調(diào)焦螺旋 2）光學(xué)系統(tǒng): 包括照明系統(tǒng)和成像系統(tǒng),光學(xué)顯微鏡各部分名稱,光學(xué)顯微鏡各部分名稱,顯微鏡光學(xué)部件,顯微鏡光路圖,顯微鏡成像系統(tǒng)主要是由物鏡和目鏡組成，物鏡的焦距很短，目鏡的焦距較長，物鏡的作用是得到物體的放大的實像；目鏡的作用是將物鏡所成的實像作為物體，進(jìn)一步放大為虛像。 物鏡L1到物

3、體A、B的距離稍大于物 鏡焦距f1，通過物鏡得到放大的實像A’、B’。A’、B’位于目鏡的焦距f2以內(nèi)，是目鏡的“物體”，通過目鏡得到放大的虛像 A”、B”。A”、B”對眼睛的視角遠(yuǎn)大于實物AB所成視角。 顯微鏡的總放大倍數(shù)＝ 物鏡的放大倍數(shù)×目鏡的放大倍數(shù),觀察的物體A B,物鏡 L1,中間所成的實像 A’B’,目鏡L2,觀察點,,,,,,放大的虛像A”B”,,顯微鏡成像原理,1）

4、實驗時要把顯微鏡放在座前桌面上稍偏左的位置，鏡座應(yīng)距桌沿5 cm左右。2）打開電源開關(guān)，調(diào)節(jié)亮度控制旋鈕獲 得所需亮度(用完后需調(diào)至最弱檔)3）瞳距的調(diào)節(jié) 調(diào)節(jié)目鏡筒的間距使左右眼的視場重疊,,,顯微鏡的使用,4）放置標(biāo)本切片 將切片放在載物臺上，蓋玻片向上。撥開標(biāo)本夾，卡住載玻片,5）調(diào)焦,,,（1）將4x的物鏡移入光路。（2）旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦手輪，將載物臺提升至最高點。移動載物臺置要觀察的目標(biāo) 于光斑中。

5、（3）通過目鏡進(jìn)行觀察，慢慢旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦手輪，降低載物臺。當(dāng)標(biāo)本像出現(xiàn) 時停止旋轉(zhuǎn)。（4）旋轉(zhuǎn)微調(diào)焦手輪，進(jìn)行精確對焦。 需用高倍物鏡進(jìn)行觀察時，首先使用4x物鏡對焦。然后更換高倍物鏡，旋 轉(zhuǎn)微調(diào)焦手輪進(jìn)行精確對焦。,6）目鏡屈光度調(diào)節(jié)（1）將4x物鏡移入光路。轉(zhuǎn)動粗 調(diào)焦手輪對標(biāo)本對焦。（2）將4x物鏡(或10x物鏡)移入光路。 右眼通過右目鏡，通過轉(zhuǎn)動右目 鏡上的屈光

6、度調(diào)節(jié)環(huán)而不是粗微 調(diào)焦手輪．對標(biāo)本對焦。（3）左眼通過左目鏡，通過轉(zhuǎn)動左目 鏡上的屈光度調(diào)節(jié)環(huán)而不是粗微 調(diào)焦手輪．對標(biāo)本對焦。,,,8）調(diào)節(jié)孔徑光圈 將聚光器孔徑光 欄調(diào)節(jié)桿撥至與 光路中物鏡倍數(shù) 相同的數(shù)字。 孔徑光欄調(diào)節(jié)桿,在轉(zhuǎn)換高倍物鏡并且看清物像之后，可以根據(jù)需要調(diào)節(jié)孔徑光闌的大小或聚光器的高低，使光線符合要求（一般將低倍物鏡換成高倍物鏡觀察時，視野要稍變暗一些

7、，所以需要調(diào)節(jié)光線強弱）。,,,9）油鏡的使用 100×物鏡是油浸物鏡。使用前必需在鏡頭與蓋玻片間加浸油。 油鏡的透鏡很小，光線通過玻片與油鏡頭之間的空氣時，因介質(zhì)密度不同，發(fā)生折射或全反射，使射入透鏡的光線減少，物象顯現(xiàn)不清。若在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515），則使進(jìn)入透鏡的光線增多，視野亮度增強，

8、使物象明亮清晰。在油鏡觀察結(jié)束后，切記將鏡頭和其他沾有油污的部件清擦凈。,生物繪圖,對標(biāo)本進(jìn)行鏡檢后，對一些要重點掌握的內(nèi)容，需要及時繪圖記錄觀察結(jié)果。生物繪圖不同于一般的美術(shù)繪圖，要求將所觀察標(biāo)本的外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確地描繪，然后對各部分分別加以注字說明。,仔細(xì)觀察實驗對象，各部的結(jié)構(gòu)都要看清楚，再進(jìn)行繪圖。形態(tài)結(jié)構(gòu)要準(zhǔn)確，比例要正確，要求有真實感、立體感。注意區(qū)分正常的構(gòu)造和由于人為因素所造成的一些非正常的構(gòu)造，然后選擇那些有代表

9、性的典型的部位進(jìn)行繪圖。繪圖要用黑色硬鉛筆，不要用軟鉛筆或有色鉛筆，一般用 2H 鉛筆為宜。,繪圖大小要適宜，一般所作圖的位置在靠近中央略偏左，右邊留下用來標(biāo)寫圖注。圖與圖注之間用水平注圖線聯(lián)系，注圖線之間間隔要均勻，部位接近時可用折線，但不能交叉，圖注要排列整齊。如果畫兩個或更多的圖，圖與圖之間要留有一定距離，以便標(biāo)注圖名。在繪制植物的構(gòu)造圖時，有時只需要繪出部分切面圖，以充分反映出其結(jié)構(gòu)特點。,繪圖時，可以先用輕淡小點或輕線條

10、畫出輪廓，再依照輪廓繪出與物象相符的線條。所繪線條要清晰流暢，粗細(xì)相同，中間不要有斷線或開叉痕跡，線條也不要涂抹。結(jié)構(gòu)圖的比例要準(zhǔn)確，各部分的明暗程度、物質(zhì)含量多少等則用細(xì)點的疏密表示。在打點時，要點成圓點，而不是小撇。更不能用涂抹的手法來表示。圖的下方注明圖名及放大倍數(shù)。如果是通過單筒顯微鏡觀察樣本，要逐步訓(xùn)練用左眼觀察，右眼看圖紙。將觀察結(jié)果準(zhǔn)確地描繪出來。,優(yōu)秀范例,,作業(yè),一 思考題 為什么使用高倍鏡或油鏡必須