對(duì)羥基苯甲酸酯類混合物的反相高效液相色譜分析

1、Comment[微微微微1]:還是“相近”？應(yīng)該相同吧，否則下面的公式不成立。當(dāng)然，說相近也可以。實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)對(duì)羥基苯甲酸酯類混合物的反相高效液相色譜分析對(duì)羥基苯甲酸酯類混合物的反相高效液相色譜分析Ⅰ.實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?1)了解高效液相色譜儀構(gòu)造(2)了解高效液相色譜分析操作(3)學(xué)習(xí)高效液相色譜保留值定性方法和歸一化法定量方法Ⅱ.實(shí)驗(yàn)用品實(shí)驗(yàn)用品儀器：儀器：高效液相色譜儀；紫外光度檢測(cè)器；記錄儀；10μL微量進(jìn)樣器；超聲波發(fā)生器。試劑：試

2、劑：對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯和對(duì)羥基苯甲酸丁酯等，均為分析純；甲醇（分析純）；二次蒸餾水。Ⅲ.實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理在對(duì)羥基苯甲酸酯類混合物中含有對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯和對(duì)羥基苯甲酸丁酯，它們都是強(qiáng)極性化合物，可采用反相液相色譜進(jìn)行分析，選用非極性的C18烷基鍵合相作固定相，甲醇的水溶液作流動(dòng)相。由于在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，酯類各組分的保留值保持恒定，因此在同樣條件下，將測(cè)得的未知物的各組

3、分保留時(shí)間，與已知純酯類備組分的保留時(shí)間進(jìn)行對(duì)照，即可確定未知物中各組分存在與否。這種利用純物質(zhì)對(duì)照進(jìn)行定性的方法，適用于來源已知，且組分簡(jiǎn)單的混合物。本實(shí)驗(yàn)采用歸一化法定量，歸一化法使用條件及計(jì)算公式，與氣相色譜分析法相同：對(duì)羥基苯甲酸酸類混合物屬同系物，具有相同的生色團(tuán)和助色團(tuán)，因此它們?cè)谧贤夤舛葯z測(cè)器上具有相同的校正因子，故上式可簡(jiǎn)化為：Ⅳ.實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)條件溶液的配制：溶液的配制：(1)標(biāo)準(zhǔn)貯備液：分別于四只100mL容量瓶中，配

4、制濃度均為1000μgmL1的上述四種酯類化合物的甲醇溶液。(2)標(biāo)準(zhǔn)操作液：用上述四種標(biāo)準(zhǔn)貯備液分別于四只10mL容量瓶中，配制濃度均為10μgmL1的四種酯類化合物的甲醇溶液，混勻備用。(3)未知樣品色譜條件：色譜條件：(1)色譜柱長(zhǎng)25cm、內(nèi)徑3mm，裝填C18烷基鍵合相，粒度為10μm的固定相。(2)流動(dòng)相甲醇：水=55：45，流量1mLmin1。%1001??????niiiiiiAfAfw%1001????niiiiAAw

5、1.歸一化法的優(yōu)點(diǎn)是：簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，當(dāng)操作條件如進(jìn)樣量、流速等變化時(shí)，對(duì)結(jié)果影響小。但若試樣中的組分不能全部出峰，則不能應(yīng)用此法。本實(shí)驗(yàn)樣品為同系物，若各組分的相對(duì)校正因子值相近，所以可以略去。2.流動(dòng)相極性大于固定相極性的色譜稱為反相色譜，反之稱為正相色譜。本實(shí)驗(yàn)所用樣品均為極性化合物，依據(jù)“相似相溶”原則，宜選用極性固定相、非極性的流動(dòng)相，即選擇正相色譜。但是，高效液相色譜的可貴之處是它的分離效能很高，對(duì)于極性化合物往往用反相色譜也能