中生菌素高效液相色譜分析技術(shù)的研究.pdf

1、中生菌素是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物防治研究所研制成功的抗生素類新生物農(nóng)藥，為淡紫灰鏈霉菌海南變種所產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素。其制劑3[％]中生菌素可濕性粉劑對(duì)農(nóng)作物致病菌如白菜軟腐菌、黃瓜角斑病菌、水稻白葉枯病菌、蘋果輪紋病菌等細(xì)菌、真菌性病害具有明顯抑菌活性。其作用機(jī)制：對(duì)細(xì)菌是抑制菌體蛋白質(zhì)的合成，導(dǎo)致菌體死亡；對(duì)真菌是使絲狀菌絲變形，抑制孢子萌發(fā)并能直接殺死孢子。能抗革蘭氏陽性及陰性細(xì)菌、分枝桿菌、酵母菌及絲狀真菌。
　　

2、中生菌素作為一類氨基糖苷類抗生素，本身無紫外吸收而不易被檢測(cè)。本研究將其與衍生化試劑OPA進(jìn)行反應(yīng)，生成具有熒光的產(chǎn)物，再以反相離子對(duì)色譜分離后，用熒光檢測(cè)器檢測(cè)。由于用到衍生化反應(yīng)及反相離子對(duì)色譜法，因此涉及到了流動(dòng)相及衍生化條件等的優(yōu)化及選擇。通過對(duì)流動(dòng)相及衍生化反應(yīng)各條件的考察，最終選擇的流動(dòng)相系統(tǒng)為“A:B＝27:73，其中A為0.5×10-3 mol·L-1己烷磺酸鈉溶液-冰醋酸(14.5:0.7)，B為甲醇”；衍生化反應(yīng)方面

3、，明確了OPA的有效期為5天；確定了1.0 mL作為OPA的最佳用量；選擇了60 ℃、5分鐘的衍生化溫度與時(shí)間；認(rèn)識(shí)到了衍生物的穩(wěn)定性較差。
　　 在對(duì)中生菌素在黃瓜上的添加回收試驗(yàn)進(jìn)行分析時(shí)，著重從樣品凈化、幾種非常規(guī)的添加方法、不同基質(zhì)等方面進(jìn)行了研究。最終僅通過“將50 mL 100 mg·L-1的中生菌素標(biāo)準(zhǔn)溶液加到20 g黃瓜空白樣品中”這一非常規(guī)添加方法測(cè)得不到30[％]的回收率，這與農(nóng)藥殘留分析所要求的回收率標(biāo)準(zhǔn)范