最新寄生蟲病檢測檢驗技術(shù)_第1頁
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1、1寄生蟲病檢測寄生蟲病檢測檢驗技術(shù)檢驗技術(shù)1一般檢查法11糞便的檢查糞便檢查是確定腸道寄生蟲病診斷的最主要的方法,也是屬于臨床化驗室常規(guī)檢查的方法之一。111直接涂片法此法用于檢查蟲卵、滋養(yǎng)體和包囊。為了避免遺漏,一般需連續(xù)檢查三張涂片。此法的優(yōu)點是操作簡便,迅速。缺點是陽性率較低,視野中雜質(zhì)較多,蟲卵或原蟲少時不易查到。1111生理鹽水涂片法:操作方法(1)取潔凈的載玻片一張,于中央滴1~2滴生理鹽水。(2)用便簽挑取約火柴頭大小的一

2、塊糞便(約0.1g),置鹽水中涂抹均勻,成半透明的混懸液,其厚薄以透過書上的鉛字為宜,如果太厚阻礙光線的透過,太薄則影響檢查效果(必要時加蓋玻片)。(3)先用低倍鏡觀察,從邊緣開始來回順序推動移動器,仔細(xì)尋找蟲卵。(4)找到蟲卵后,應(yīng)將蟲卵移至視野中央,辨認(rèn)是何蟲卵(必要時可換高倍鏡進一步觀察)。注意事項:(1)檢查痢疾阿米巴原蟲時,要挑取帶有膿血的糞便。(2)檢查原蟲包囊時,所取的糞便應(yīng)再少一些,糞膜涂的再薄一些,否則包囊不易找到。(

3、3)檢查原蟲滋養(yǎng)體時,要注意保溫,避免化學(xué)藥品和尿的污染,影響滋養(yǎng)體偽足的運動。(4)防止涂片變干,可隨時滴加生理鹽水。一般不用油鏡觀察。(5)某些植物細(xì)胞很像蟲卵,是要加以鑒別,植物細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)不象蟲卵那樣規(guī)則,外形多扁平,用嘴輕吹時,植物細(xì)胞往往易翻動或變形。(6)要注意蟲卵與人類酵母菌的區(qū)別,很易與包囊混淆,酵母菌為無色圓形或卵圓形小體,大小不一,內(nèi)含一個較大的透明體,其四周有狹窄的細(xì)胞漿,漿內(nèi)含有少數(shù)折光形小體和核,有時透明體

4、偏于一邊。如用蒸餾水稀釋糞便涂片,酵母菌即被裂解消失,而原蟲包囊仍存在。(7)只有雄性寄生蟲也無蟲卵,切勿隨意報告陰性結(jié)果。(8)采集的標(biāo)本要新鮮,一般不宜超過一晝夜,否則原蟲或某些蟲卵易變形或者死亡,引起誤診;采集標(biāo)本的容器要清潔,避免與化學(xué)藥物或尿混合,否則原蟲滋養(yǎng)體很快死亡,影響檢出率。1112碘液涂片法:用碘液代替生理鹽水,適用于腸道原蟲的檢查。方法(1)檢查原蟲包囊時在干凈的載玻片上滴一滴碘液,然后取少許糞便,于碘液中,涂抹均

5、勻,便可檢查。(2)檢查原蟲活滋養(yǎng)體時,可在用生理鹽水涂勻的糞膜附近滴一滴碘液,取少許3氯化鈉6.35g枸櫞酸鈉1.1g飽和氯化鈉溶液0.1ml蒸餾水100ml乙液水溶性金紅1.0g蒸餾水100ml用時將甲、乙兩液等量混合。操作方法:(1)在干凈的載玻片上加一滴生理鹽水。(2)用便簽挑取少許糞便的粘液部分,與生理鹽水混合,涂成適當(dāng)?shù)募S膜。(3)加上述混合染色液一滴,混合之,覆置蓋玻片。(4)先用低倍鏡找到,然后換高倍鏡鑒定。112濃集法

6、:用較多的糞便,將其中的蟲卵或包囊集聚在一個小范圍內(nèi),便于檢出,其陽性率比直接涂片法高;缺點是較直接涂片法復(fù)雜,時間也較長些。濃集法又分為漂浮法和沉淀法。1121漂浮法利用蟲卵和包囊的比重小于液體比重的原理使線蟲卵或包囊浮集于液面,以增加單位面積蟲卵和包囊的含量,提高檢查效果。通常用的方法有飽和鹽水漂浮法和硫酸鋅離心浮聚法。(1)飽和鹽水漂浮法:試劑的配制食鹽40g蒸餾水100ml加熱至沸,冷后取上清液使用。如每95ml內(nèi)加5ml40%

7、甲醇溶液,可起固定的作用,有利于吸蟲卵的上浮。操作方法取0.5~1g的糞便放入漂浮瓶內(nèi)(一般可用鏈霉素瓶代替)。○1加入少量的飽和鹽水(約為容器的13即可),用便簽攪拌成均勻的混懸液?!?再加入飽和鹽水至漂浮瓶口,使液面略高于瓶口而未溢出為止?!?在瓶口蓋一載玻片,靜置10~15min后,將載玻片迅速上提翻轉(zhuǎn),立即鏡檢?!?注意事項此法適用于線蟲卵的檢查,如果漂浮時間過長,可使蟲卵及包囊變形,甚至下沉?!?浮集于表面的雜質(zhì)在放置載玻片前

8、,要清除掉,否則影響檢查結(jié)果?!?(2)硫酸鋅離心浮聚法操作方法取1份糞便與10份溫水調(diào)合成混合液?!?取兩層紗布過濾于離心管內(nèi)?!?用2000~2500rmin的離心速度離心1min,棄去上層液體,再加水少許,將沉淀物○3調(diào)和,再離心,反復(fù)2~3次,至水清為止。棄去上清液,加入硫酸鋅液(比重1.180即33%的溶液)少許調(diào)勻,再加入硫酸鋅○4溶液,隨加隨調(diào)勻,使液面距管口約1cm即可。再離心沉淀1min?!?用白金耳取表面的液體于玻片

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