有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)

1、有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)研究有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)研究?主要內(nèi)容1、有關(guān)物質(zhì)檢查方法建立的研發(fā)思路2、有關(guān)物質(zhì)方法的建立和方法學(xué)驗(yàn)證2.1、原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)2.2、有關(guān)物質(zhì)分析方法的選擇2.3、有關(guān)物質(zhì)分析方法的驗(yàn)證2.4、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法3、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的分析4、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)限度的制訂有關(guān)物質(zhì)檢查方法建立的研發(fā)思路有關(guān)物質(zhì)檢查方法建立的研發(fā)思路?研發(fā)思路：有關(guān)物質(zhì)檢測方法的建立重點(diǎn)是測定方法的先進(jìn)性、準(zhǔn)確性、可行性。?⑴首先有關(guān)物質(zhì)的方

2、法選擇，對于仿制藥有EP、BP、USP等質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的藥品，首選以上的色譜條件進(jìn)行篩選，尤其關(guān)注的離子對試劑的使用。?⑵選用不同色譜條件進(jìn)行對比研究，如果方法一是等度測定的，方法二最好選用梯度色譜條件，比較兩種方法測定結(jié)果的雜質(zhì)個(gè)數(shù)及雜質(zhì)含量等。確證有關(guān)物質(zhì)測定方法的準(zhǔn)確性。?⑶對所篩選的方法進(jìn)行系統(tǒng)的方法學(xué)研究，比較不同檢測方法的優(yōu)劣，選擇較好的色譜條件作為本品有關(guān)物質(zhì)檢查的測定方法。?⑷對于仿制藥同時(shí)要將自制樣品與市售原研樣品進(jìn)行全面的

3、質(zhì)量比較，分析其雜質(zhì)的種類和含量，確保自制樣品與市售原研樣品的雜質(zhì)在同一水平。?原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)?在建立有關(guān)物質(zhì)檢查方法前，需首先了解原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)。?⑴對于原料藥，了解原料藥的基本性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。了解原料藥合成工藝過程中的起始原料、副產(chǎn)物、副產(chǎn)物產(chǎn)生的雜質(zhì)、中間產(chǎn)物或可能產(chǎn)生的降解產(chǎn)物等。結(jié)合相關(guān)已知的雜質(zhì)來確定有關(guān)物質(zhì)檢測的條件。?⑵對于制劑，可能影響藥物有關(guān)物質(zhì)的重要因素有輔料、劑型

4、、存儲(chǔ)條件等，主要了解輔料對有關(guān)物質(zhì)檢測的干擾情況，不同劑型在不同存貯條件下可能產(chǎn)生的雜質(zhì)等。對于復(fù)方制劑，同時(shí)要考慮到復(fù)方中原料的相互作用可能產(chǎn)生的雜質(zhì)等。?有關(guān)物質(zhì)分析方法的選擇有關(guān)物質(zhì)分析方法的選擇?有機(jī)雜質(zhì)的檢測方法包括化學(xué)法、光譜法、色譜法等，因藥物結(jié)構(gòu)及降解產(chǎn)物的不同采用不同的檢測方法。通過合適的分析技術(shù)將不同結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)進(jìn)行分離、檢測，從而達(dá)到對雜質(zhì)的有效控制。目前普遍采用的雜質(zhì)檢測方法主要有：?⑴高效液相色譜法（HPLC）

5、目前采用的分析方法主要以高效液相色譜法為主，為常用的分析方法。選擇不同的色譜柱對雜質(zhì)進(jìn)行有效的分離。?⑵薄層色譜法(TLC)是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，但準(zhǔn)確性較低。?⑶氣相色譜法(GC)氣相色譜法主要是用于能氣化的物質(zhì)的檢測和分離。一般用于有機(jī)殘留溶劑的檢測和分離。也可用于一些能揮發(fā)的雜質(zhì)的檢測。?⑷毛細(xì)管電泳法（CE）毛細(xì)管電泳法是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動(dòng)力，依據(jù)樣品

6、中各組分的淌度和（或）分配行為的差異而實(shí)現(xiàn)各組分分離的一種分析方法。其應(yīng)用比較廣泛，但該方法測定精密度不高，專屬性不穩(wěn)定，且CE儀器價(jià)格較高。?由于各種分析方法均具有一定的局限性，因此在進(jìn)行雜質(zhì)分析時(shí)，應(yīng)注意不同原理的?④系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)主要是考察主成分與雜質(zhì)的分離情況以及主峰參數(shù)信息如理論塔板數(shù)、拖尾因子、分離度等，均應(yīng)符合測定要求。?⑤精密度試驗(yàn)精密度試驗(yàn)精密度試驗(yàn)包括：重復(fù)性試驗(yàn)、中間精密度試驗(yàn)等。?⑥溶液穩(wěn)定性

7、試驗(yàn)溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)考察樣品在配制溶劑中的雜質(zhì)與主峰的穩(wěn)定性，取一定濃度的樣品溶液，分別于不同時(shí)間取樣測定雜質(zhì)與主峰的峰面積，以相對標(biāo)準(zhǔn)偏差來表示不同時(shí)間測定結(jié)果的穩(wěn)定性。判斷結(jié)果：結(jié)果RSD%≤2.0%，在測定時(shí)間內(nèi)的樣品溶液穩(wěn)定性良好。?⑦耐用性試驗(yàn)?zāi)陀眯栽囼?yàn)?zāi)陀眯栽囼?yàn)是指測定條件發(fā)生小的變動(dòng)時(shí)，測定結(jié)果不受影響的承受程度。一般系統(tǒng)變化條件：分別考察流動(dòng)相比例變化5％、流動(dòng)相pH值變化0.2、柱溫變化5℃、檢測波長變化5nm、流速相對

8、值變化20％以及采用三根不同批號(hào)的色譜柱進(jìn)行測定時(shí)，儀器色譜行為的變化，每個(gè)條件下各測試兩次?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對值在0.1％以內(nèi)。特殊樣品如果色譜條件變化比較敏感的，可適當(dāng)降低變化范圍。?耐用性試驗(yàn)部分還包括樣品萃?。ㄌ崛。┓€(wěn)健性：可理解為提取方法的重復(fù)性良好。即提取方法的確定驗(yàn)證試驗(yàn)。?有關(guān)物

9、質(zhì)雜質(zhì)的定量方法有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法?有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法根據(jù)雜質(zhì)與主成分的最大吸收波長及校正因子來確定。若雜質(zhì)與主峰的吸收波長基本一致，則一般采用自身對照法或峰面積歸一化法；若雜質(zhì)與主峰的吸收波長差異范圍較小，校正因子在0.9～1.1之間，則可采用不加校正因子的主成分自身對照法；超出該范圍，校正因子在0.2～5.0范圍以內(nèi)時(shí)，采用主成分自身對照法的定量方式，須用校正因子進(jìn)行校正；若雜質(zhì)與主峰的吸收波長相差較大，校正因子在0.2～5

10、.0范圍以外時(shí)，不能通過校正因子校正，則要采用外標(biāo)法進(jìn)行測定。?①外標(biāo)法（雜質(zhì)對照品法）外標(biāo)法（雜質(zhì)對照品法）?外標(biāo)法定量比較準(zhǔn)確，采用外標(biāo)法進(jìn)行測定時(shí)，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的方法學(xué)研究。?A檢測波長的選擇檢測波長的選擇檢測波長的選擇測定方法參照紫外可見分光光度法（中國藥典2010版二部附錄ⅣA）進(jìn)行測定，或采用HPLC法，DAD檢測器進(jìn)行測定。同時(shí)考察輔料干擾等。?B標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系應(yīng)在設(shè)計(jì)的測定范圍內(nèi)測定?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分

11、別精密稱樣，制備一系列被測物質(zhì)濃度系列進(jìn)行測定，至少制備5個(gè)濃度。以測得的響應(yīng)信號(hào)作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。?有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法?C精密度試驗(yàn)精密度試驗(yàn)儀器精密度試驗(yàn)主要是考察測定方法在所用的試驗(yàn)儀器測定結(jié)果的偏差，精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。?測定方法：取一定濃度的雜質(zhì)對照品溶液，連續(xù)測定次數(shù)至少6次，以峰面積的測定結(jié)果計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，考察儀器測定

12、的。?D重復(fù)性試驗(yàn)重復(fù)性試驗(yàn)重復(fù)性系指在同樣的操作條件下，在較短時(shí)間間隔內(nèi)，由同一分析人員測定所得結(jié)果的精密度。重復(fù)性測定可在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果進(jìn)行評價(jià)，如制備3個(gè)不同濃度的試樣，各測定3次，或100％的濃度水平，用至少測定6次的結(jié)果進(jìn)行評價(jià)。常用的測定方法時(shí)采用100%的濃度，測定6次，計(jì)算測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。?測定方法:按含量測定的方法，分別平行稱取6份樣品，按外標(biāo)法測定雜質(zhì)的含量，以雜質(zhì)含量測定結(jié)果計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差