有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)

1、有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)研究有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)研究?主要內(nèi)容1、有關(guān)物質(zhì)檢查方法建立的研發(fā)思路2、有關(guān)物質(zhì)方法的建立和方法學(xué)驗(yàn)證2.1、原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)2.2、有關(guān)物質(zhì)分析方法的選擇2.3、有關(guān)物質(zhì)分析方法的驗(yàn)證2.4、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法3、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的分析4、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)限度的制訂有關(guān)物質(zhì)檢查方法建立的研發(fā)思路有關(guān)物質(zhì)檢查方法建立的研發(fā)思路?研發(fā)思路：有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法的建立重點(diǎn)是測(cè)定方法的先進(jìn)性、準(zhǔn)確性、可行性。?⑴首先有關(guān)物質(zhì)的方

2、法選擇，對(duì)于仿制藥有EP、BP、USP等質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的藥品，首選以上的色譜條件進(jìn)行篩選，尤其關(guān)注的離子對(duì)試劑的使用。?⑵選用不同色譜條件進(jìn)行對(duì)比研究，如果方法一是等度測(cè)定的，方法二最好選用梯度色譜條件，比較兩種方法測(cè)定結(jié)果的雜質(zhì)個(gè)數(shù)及雜質(zhì)含量等。確證有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法的準(zhǔn)確性。?⑶對(duì)所篩選的方法進(jìn)行系統(tǒng)的方法學(xué)研究，比較不同檢測(cè)方法的優(yōu)劣，選擇較好的色譜條件作為本品有關(guān)物質(zhì)檢查的測(cè)定方法。?⑷對(duì)于仿制藥同時(shí)要將自制樣品與市售原研樣品進(jìn)行全面的

3、質(zhì)量比較，分析其雜質(zhì)的種類(lèi)和含量，確保自制樣品與市售原研樣品的雜質(zhì)在同一水平。?原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)?在建立有關(guān)物質(zhì)檢查方法前，需首先了解原料藥和制劑的相關(guān)理化性質(zhì)。?⑴對(duì)于原料藥，了解原料藥的基本性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。了解原料藥合成工藝過(guò)程中的起始原料、副產(chǎn)物、副產(chǎn)物產(chǎn)生的雜質(zhì)、中間產(chǎn)物或可能產(chǎn)生的降解產(chǎn)物等。結(jié)合相關(guān)已知的雜質(zhì)來(lái)確定有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的條件。?⑵對(duì)于制劑，可能影響藥物有關(guān)物質(zhì)的重要因素有輔料、劑型

4、、存儲(chǔ)條件等，主要了解輔料對(duì)有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的干擾情況，不同劑型在不同存貯條件下可能產(chǎn)生的雜質(zhì)等。對(duì)于復(fù)方制劑，同時(shí)要考慮到復(fù)方中原料的相互作用可能產(chǎn)生的雜質(zhì)等。?有關(guān)物質(zhì)分析方法的選擇有關(guān)物質(zhì)分析方法的選擇?有機(jī)雜質(zhì)的檢測(cè)方法包括化學(xué)法、光譜法、色譜法等，因藥物結(jié)構(gòu)及降解產(chǎn)物的不同采用不同的檢測(cè)方法。通過(guò)合適的分析技術(shù)將不同結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)進(jìn)行分離、檢測(cè)，從而達(dá)到對(duì)雜質(zhì)的有效控制。目前普遍采用的雜質(zhì)檢測(cè)方法主要有：?⑴高效液相色譜法（HPLC）

5、目前采用的分析方法主要以高效液相色譜法為主，為常用的分析方法。選擇不同的色譜柱對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行有效的分離。?⑵薄層色譜法(TLC)是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，但準(zhǔn)確性較低。?⑶氣相色譜法(GC)氣相色譜法主要是用于能氣化的物質(zhì)的檢測(cè)和分離。一般用于有機(jī)殘留溶劑的檢測(cè)和分離。也可用于一些能揮發(fā)的雜質(zhì)的檢測(cè)。?⑷毛細(xì)管電泳法（CE）毛細(xì)管電泳法是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，依據(jù)樣品

6、中各組分的淌度和（或）分配行為的差異而實(shí)現(xiàn)各組分分離的一種分析方法。其應(yīng)用比較廣泛，但該方法測(cè)定精密度不高，專(zhuān)屬性不穩(wěn)定，且CE儀器價(jià)格較高。?由于各種分析方法均具有一定的局限性，因此在進(jìn)行雜質(zhì)分析時(shí)，應(yīng)注意不同原理的?④系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)主要是考察主成分與雜質(zhì)的分離情況以及主峰參數(shù)信息如理論塔板數(shù)、拖尾因子、分離度等，均應(yīng)符合測(cè)定要求。?⑤精密度試驗(yàn)精密度試驗(yàn)精密度試驗(yàn)包括：重復(fù)性試驗(yàn)、中間精密度試驗(yàn)等。?⑥溶液穩(wěn)定性

7、試驗(yàn)溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)考察樣品在配制溶劑中的雜質(zhì)與主峰的穩(wěn)定性，取一定濃度的樣品溶液，分別于不同時(shí)間取樣測(cè)定雜質(zhì)與主峰的峰面積，以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)表示不同時(shí)間測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性。判斷結(jié)果：結(jié)果RSD%≤2.0%，在測(cè)定時(shí)間內(nèi)的樣品溶液穩(wěn)定性良好。?⑦耐用性試驗(yàn)?zāi)陀眯栽囼?yàn)?zāi)陀眯栽囼?yàn)是指測(cè)定條件發(fā)生小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。一般系統(tǒng)變化條件：分別考察流動(dòng)相比例變化5％、流動(dòng)相pH值變化0.2、柱溫變化5℃、檢測(cè)波長(zhǎng)變化5nm、流速相對(duì)

8、值變化20％以及采用三根不同批號(hào)的色譜柱進(jìn)行測(cè)定時(shí)，儀器色譜行為的變化，每個(gè)條件下各測(cè)試兩次?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達(dá)到基線(xiàn)分離；各條件下的雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在0.1％以?xún)?nèi)。特殊樣品如果色譜條件變化比較敏感的，可適當(dāng)降低變化范圍。?耐用性試驗(yàn)部分還包括樣品萃?。ㄌ崛。┓€(wěn)健性：可理解為提取方法的重復(fù)性良好。即提取方法的確定驗(yàn)證試驗(yàn)。?有關(guān)物

9、質(zhì)雜質(zhì)的定量方法有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法?有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法根據(jù)雜質(zhì)與主成分的最大吸收波長(zhǎng)及校正因子來(lái)確定。若雜質(zhì)與主峰的吸收波長(zhǎng)基本一致，則一般采用自身對(duì)照法或峰面積歸一化法；若雜質(zhì)與主峰的吸收波長(zhǎng)差異范圍較小，校正因子在0.9～1.1之間，則可采用不加校正因子的主成分自身對(duì)照法；超出該范圍，校正因子在0.2～5.0范圍以?xún)?nèi)時(shí)，采用主成分自身對(duì)照法的定量方式，須用校正因子進(jìn)行校正；若雜質(zhì)與主峰的吸收波長(zhǎng)相差較大，校正因子在0.2～5

10、.0范圍以外時(shí)，不能通過(guò)校正因子校正，則要采用外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定。?①外標(biāo)法（雜質(zhì)對(duì)照品法）外標(biāo)法（雜質(zhì)對(duì)照品法）?外標(biāo)法定量比較準(zhǔn)確，采用外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定時(shí)，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的方法學(xué)研究。?A檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇測(cè)定方法參照紫外可見(jiàn)分光光度法（中國(guó)藥典2010版二部附錄ⅣA）進(jìn)行測(cè)定，或采用HPLC法，DAD檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定。同時(shí)考察輔料干擾等。?B標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性關(guān)系應(yīng)在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)測(cè)定?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋?zhuān)蚍?/p>

11、別精密稱(chēng)樣，制備一系列被測(cè)物質(zhì)濃度系列進(jìn)行測(cè)定，至少制備5個(gè)濃度。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線(xiàn)性，用最小二乘法進(jìn)行線(xiàn)性回歸。?有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)的定量方法?C精密度試驗(yàn)精密度試驗(yàn)儀器精密度試驗(yàn)主要是考察測(cè)定方法在所用的試驗(yàn)儀器測(cè)定結(jié)果的偏差，精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。?測(cè)定方法：取一定濃度的雜質(zhì)對(duì)照品溶液，連續(xù)測(cè)定次數(shù)至少6次，以峰面積的測(cè)定結(jié)果計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，考察儀器測(cè)定

12、的。?D重復(fù)性試驗(yàn)重復(fù)性試驗(yàn)重復(fù)性系指在同樣的操作條件下，在較短時(shí)間間隔內(nèi)，由同一分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度。重復(fù)性測(cè)定可在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，如制備3個(gè)不同濃度的試樣，各測(cè)定3次，或100％的濃度水平，用至少測(cè)定6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。常用的測(cè)定方法時(shí)采用100%的濃度，測(cè)定6次，計(jì)算測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。?測(cè)定方法:按含量測(cè)定的方法，分別平行稱(chēng)取6份樣品，按外標(biāo)法測(cè)定雜質(zhì)的含量，以雜質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差