表面微生物檢測(cè)方法[1]

1、空氣、食品接觸面微生物檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)空氣、食品接觸面微生物檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)1、目的目的：檢測(cè)生產(chǎn)車(chē)間空氣、操作人員手部、與食品有直接接觸面的機(jī)械設(shè)備的微生物指標(biāo)，生產(chǎn)區(qū)域環(huán)境當(dāng)中病原微生物的監(jiān)控，達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，以控制食品成品的質(zhì)量。2、參照標(biāo)準(zhǔn)參照標(biāo)準(zhǔn)：中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB15979－1995、《HACCP原理與實(shí)施》、中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《公共場(chǎng)所空氣微生物檢驗(yàn)方法細(xì)菌總數(shù)測(cè)定》GBT182

2、04.1－2000、中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN016992SN017292SN017092、出入境檢驗(yàn)檢疫局二000四年《出入食品微生物檢驗(yàn)培訓(xùn)教材》中《出入食品生產(chǎn)廠(chǎng)衛(wèi)生細(xì)菌檢驗(yàn)方法》、日本東京冷凍食品檢驗(yàn)方法。3、采樣與檢測(cè)方法采樣與檢測(cè)方法：3.1空氣的采樣與測(cè)試方法3.1.1樣品采集：(1)取樣頻率：a)車(chē)間轉(zhuǎn)換不同衛(wèi)生要求的產(chǎn)品時(shí)，在加工前進(jìn)行采樣，以便了解車(chē)間衛(wèi)生清掃消毒情況。b)全廠(chǎng)統(tǒng)一放長(zhǎng)假后，車(chē)間生產(chǎn)前，

3、進(jìn)行采樣。c)產(chǎn)品檢驗(yàn)結(jié)果超內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)及時(shí)對(duì)車(chē)間進(jìn)行采樣，如有檢驗(yàn)不合格點(diǎn)，整改后再進(jìn)行采樣檢驗(yàn)。d)實(shí)驗(yàn)性新產(chǎn)品，按客戶(hù)規(guī)定頻率采樣檢驗(yàn)。e)正常生產(chǎn)狀態(tài)的采樣，每周一次。（2）采樣方法在動(dòng)態(tài)下進(jìn)行，室內(nèi)面積不超過(guò)30m2，在對(duì)角線(xiàn)上設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外點(diǎn)位置距墻1m；室內(nèi)面積超過(guò)30m2，設(shè)東、西、南、北、中五點(diǎn)，周?chē)?點(diǎn)距墻1m。采樣時(shí)，將含平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的平板鹽水的采樣管內(nèi)送檢。b)工人手：被檢人五指并攏，用浸濕生理

4、鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來(lái)回涂擦10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。（3）采樣注意事項(xiàng)：擦拭時(shí)棉簽要隨時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)，保證擦拭的準(zhǔn)確性。對(duì)每個(gè)擦拭點(diǎn)應(yīng)詳細(xì)記錄所在分場(chǎng)的具體位置、擦拭時(shí)間及所擦拭環(huán)節(jié)的消毒時(shí)間3.2.2細(xì)菌大腸菌群的檢測(cè)培養(yǎng):樣液稀釋?zhuān)簩⒎庞忻薨舻脑嚬艹浞终駬u。此液為1：10稀釋液。如污染嚴(yán)重，可十倍遞增稀釋?zhuān)?ml1：10樣液加9ml無(wú)菌生理鹽水中，混勻，此液為1：1

5、00稀釋液。3.2.2.1細(xì)菌總數(shù)：（1）以無(wú)菌操作，選擇1～2個(gè)稀釋度各取1ml樣液分別注入到無(wú)菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿（平行樣），將已融化冷至45℃左右的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾入平皿，每皿約15ml，充分混合。（2）待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，置36℃1℃培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)。（3）結(jié)果報(bào)告：報(bào)告每25cm2食品接觸面中或每只手的菌落數(shù)3.2.2.2大腸菌群：（1）平板法:a)以無(wú)菌操作，選擇1～2個(gè)稀釋度各取1ml樣液分別注入到無(wú)菌

6、平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿（平行樣），將已融化冷至45℃左右的去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基傾入平皿，每皿約15ml，充分混合。待瓊脂凝固后再覆蓋一層培養(yǎng)基，約35ml。b)待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，置36℃1℃培養(yǎng)24h后計(jì)數(shù)。c)結(jié)果計(jì)算：以平板上出現(xiàn)紫紅色菌落的個(gè)數(shù)乘以稀釋倍數(shù)得出。d)結(jié)果報(bào)告：報(bào)告每25cm2食品接觸面中或每只手的菌落數(shù)（2）試管法:a)以無(wú)菌操作，選擇3個(gè)稀釋度各取1ml樣液分別接種到BGLB肉湯培養(yǎng)基中，每個(gè)稀釋度