高效液相法測(cè)人參皂苷

1、以測(cè)Re、Rg1為例1色譜條件的選擇1.1采用C18（4.6mm250mm，5um）1.2流動(dòng)相乙腈(A)水(B)，20:801.3流速1.0mLmin1.4波長(zhǎng)的選擇（203nm）以人參皂苷對(duì)照溶液在200~300nm范圍進(jìn)行光譜掃描測(cè)定結(jié)果人參皂苷在nm波長(zhǎng)處有最大特征吸收選擇nm作為人參皂苷的測(cè)定波長(zhǎng)。1.5溫度301.6進(jìn)樣量10ul2溶液制備2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱取干燥的人參皂苷Re對(duì)照品5.790mg人參皂苷Rg1對(duì)照

2、品6.325mg，置于50mL的容量瓶中，加入甲醇進(jìn)行溶解并稀釋至刻度，搖勻，后靜置，即得對(duì)照品溶液(其中含有人參皂苷Rg10.1235mgmL，人參皂苷Re0.1028mgmL)。2.2供試品溶液的制備取樣品2g，至于具塞錐形瓶中，加甲醇5ml超聲10min離心15min，轉(zhuǎn)速為2500rmin，取上清液過(guò)濾，甲醇定容至5ml。加5ml水飽和正丁醇萃取兩次，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)眉状级ㄈ葜?ml。2.3陰性樣品溶液的制備取缺少人參

3、的其他藥材，制成缺8回收率試驗(yàn)精密吸取5份已知含量的樣品20mL置于50mL的容量瓶中，各瓶中分別精密加入標(biāo)準(zhǔn)混合的儲(chǔ)備液5.0、5.0、7.0、7.0、9.0、9.0mL，加流動(dòng)相稀釋至刻度照1項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，平均加樣回收率為%，RSD為%。9樣品含量測(cè)定取3批樣品，按照2.2項(xiàng)下方法配制成供試品溶液，精密吸取10uL溶液，按照1色譜條件進(jìn)行測(cè)定，同時(shí)按照外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算3批供試品的含量測(cè)定。組分色譜柱流動(dòng)相流速溫度1Rb1

4、Rb2RcRdReRg1F1F2Rg3Rh1Rh2CKPPD250mm4.6mm，5um水（A）—乙氰（B）0(77%）→13(77%）→33(56%）→38(32%）→45(32%）→55(0%）60(0%）→63(77%）1.0mlmin252Rg1Re250mm4.6mm，5um二元梯度洗脫，需兩個(gè)高壓泵0.1molLKH2PO4（A），為乙腈∶水=75∶25，PH=3.5（B）1.0mlmin383Rg1200mm4.6mm，5

5、um乙腈水(20:80)1.0mlmin室溫4Rg1、Re、Rf、Rg2、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd150mm4.6mm，5um乙腈(A)水(B)0(18%)→24(22%)→26(26%)→30(32%)→50(33.5%)→55(38%)1.0mlmin355Rg1Rb1250mm4.6mm，5um乙腈(A)水(B)10(81%)→35(8171%)→50(71%)1.2mlmin306Rg1150mm4.6mm，5um乙腈