高效液相色譜使用指南

1、e高效液相色譜知識收藏高效液相色譜知識收藏Agilent1100高壓液相色譜儀基本操作步驟Agilent1100液相基本操作步驟Agilent1100高壓液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)知識保養(yǎng)事項(xiàng)：高壓液相色譜HPLC常見故障及排除方法液相色譜柱使用及保養(yǎng)高壓液相色譜HPLC培訓(xùn)教程(一)高壓液相色譜HPLC培訓(xùn)教程(七)高效液相色譜儀中反相HPLC柱子的清潔和再生HPLC對流動(dòng)相的基本要求高效液相色譜Waters600E2487HPLC系統(tǒng)SOP

2、Waters高效液相色譜系統(tǒng)操作規(guī)程高效液相色譜儀(Agilent1100)操作注意事項(xiàng)色譜掃盲班36、VWD檢測器參數(shù)設(shè)定:●在”Wavelength”下方的空白處輸入所需的檢測波長如254nm在”Peakwidth(Responsetime)”下方點(diǎn)擊下拉式三角框選擇合適的響應(yīng)時(shí)間如0.1min(2s)。●在Timetable中可以“”一行，輸入隨時(shí)間切換的波長，如1min，波長=300nm。點(diǎn)擊ok進(jìn)入下一畫面。7、DAD檢測器參

3、數(shù)設(shè)定:●檢測波長:254nmBW=30nm參比波長=350nmBW=100nm●檢測波長：一般選擇最大吸收處的波長。樣品帶寬BW：一般選擇最大吸收值一半處的整個(gè)寬度。參比波長：一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域。參比帶寬BW：至少要與樣品信號的帶寬相等，許多情況下用100nm作為缺省值。Peakwidth（Responsetime）：其值盡可能接近要測的窄峰峰寬。Slit—狹縫窄，光譜分辨率高；寬時(shí)，噪音低。同時(shí)可以輸入采集光

4、譜方式，步長，范圍，閾值。選中所用的燈?！顸c(diǎn)擊Ok進(jìn)入下一畫面。8、RID檢測器參數(shù)設(shè)定:●色譜條件:進(jìn)樣體積:20ul。光學(xué)單元溫度:Off。極性:正。峰寬(響應(yīng)時(shí)間):4s。●“OpticalUnitTemperature”若環(huán)境溫度控制在2℃設(shè)定為Off若環(huán)境溫度不穩(wěn)定則設(shè)定光學(xué)單元溫度為高于環(huán)境溫度5度以防樣品在池中沉淀?！癙eakwidth”大多數(shù)分析設(shè)為4S，只有在高速分析下設(shè)為更短?！癆utomaticrecyclinga

5、fteranalysis”在不進(jìn)行分析時(shí)可以讓流動(dòng)相循環(huán)，節(jié)省流動(dòng)相，檢測器連續(xù)運(yùn)行，可隨時(shí)投入使用?！顸c(diǎn)擊RID圖標(biāo)，選擇RIDControl：Heater設(shè)為On，若要循環(huán)流動(dòng)相，必須將“RecyclingValve”設(shè)為ON。手動(dòng)purge參比池，將其設(shè)為On，并輸入Purge時(shí)間。9、FLD檢測器參數(shù)設(shè)定:色譜條件：●樣品：PN0101868704用甲醇稀釋為1:10。●進(jìn)樣體積：5ul?！裰鶞叵?30℃。EX=246nmEM=

6、317nmPMT=10?！耥憫?yīng)時(shí)間=4s.停止時(shí)間：出峰完畢?！馝xcitationA:激發(fā)波長:200700nm步長為1nm或Zeroder?！馝mission:發(fā)射波長:280900nm步長為1nm或Zeroder?！馪MT:大多數(shù)應(yīng)用適當(dāng)?shù)脑O(shè)定值為10若高濃度樣品峰被切平頭則減少PMT值?！瘛癙eakwidth”：大多數(shù)應(yīng)用設(shè)為4s，只有快速分析采用小的設(shè)定值。●MultiEx：多波長及光譜（激發(fā)）?！馦ultiEm：多波長及光譜

7、（發(fā)射）?！裢瑫r(shí)可以輸入范圍Range、步長step、采集光譜。10、在“Runtimechecklist”中選中“Dataacquisition”，單擊Ok。11、單擊“Method”菜單，選中“Savemethodas”，輸入一方法名，如“test”，單擊Ok。12、從菜單“View”中選中”O(jiān)nlinesignal”選中Windows1然后單擊Change鈕將所要繪圖的信號移到右邊的框中點(diǎn)擊Ok.(如同時(shí)檢測二個(gè)信號則重復(fù)12選中