固相萃取的原理方法等

1、固相萃取技術(shù)固相萃取技術(shù)■在過去的二十多年中，固相萃取作為化學分離和純化的一個強有力工具出現(xiàn)了。從痕量樣品的前處理到工業(yè)規(guī)模的化學分離，吸附劑萃取在制藥、精細化工、生物醫(yī)學、食品分析、有機合成、環(huán)境和其他領(lǐng)域起著越來越重要的作用。■固相萃取的原理固相萃取的原理在過去的二十多年中，固相萃取作為化學分離和純化的一個強有力工具出現(xiàn)了。從痕量樣品的前處理到工業(yè)規(guī)模的化學分離，吸附劑萃取在制藥、精細化工、生物醫(yī)學、食品分析、有機合成、環(huán)境和其他領(lǐng)

2、域起著越來越重要的作用。固相萃取是一個包括液相和固相的物理萃取過程。在固相萃取中，固相對分離物的吸附力比溶解分離物的溶劑更大。當樣品溶液通過吸附劑床時，分離物濃縮在其表面，其他樣品成分通過吸附劑床；通過只吸附分離物而不吸附其他樣品成分的吸附劑，可以得到高純度和濃縮的分離物。保留和洗脫在固相萃取中最通常的方法是將固體吸附劑裝在一個針筒狀柱子里，使樣品溶液通過吸附劑床，樣品中的化合物或通過吸附劑或保留在吸附劑上（依靠吸附劑對溶劑的相對吸附）

3、。“保留”是一種存在于吸附劑和分離物分子間吸引的現(xiàn)象，造成當樣品溶液通過吸附劑床時，分離物在吸附劑上不移動。保留是三個因素的作用：分離物、溶劑和吸附劑。所以，一個給定的分離物的保留行為在不同溶劑和吸附劑存在下是變化的?！跋疵摗笔且环N保留在吸附劑上的分離物從吸附劑上去除的過程，這通過加入一種對分離物的吸引比吸附劑更強的溶劑來完成。容量和選擇性吸附劑的容量是在最優(yōu)條件下，單位吸附劑的量能夠保留一個強保留分離物的總量。不同鍵合硅膠吸附劑的容量

4、變化范圍很大。選擇性是吸附劑區(qū)別分離物和其他樣品基質(zhì)化合物的能力，也就是說，保留分離物去除其他樣品化合物。一個高選擇性吸附劑是從樣品基質(zhì)中僅保留分離物的吸附劑。吸附劑選擇性是三個參數(shù)的作用：分離物的化學結(jié)構(gòu)、吸附劑的性質(zhì)和樣品基質(zhì)的組成。固相萃取的簡要過程1.一個樣品包括分離物和干擾物通過吸附劑；10ml溶劑沖洗濾膜。一般可先用甲醇等水溶性有機溶劑沖洗填料因為甲醇能潤濕吸附劑表面并滲透到非極性的硅膠鍵合相中使硅膠更容易被水潤濕之后再加入

5、水或緩沖液沖洗。加樣前應(yīng)使SPE填料保持濕潤如果填料干燥會降低樣品保留值而各小柱的干燥程度不一則會影響回收率的重現(xiàn)性。3.加樣一般可采取以下措施:(1)用0.1molL酸或堿調(diào)節(jié)使pH9離心取上層液萃取(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質(zhì)后取上清液以水或緩沖液稀釋后萃取(3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液調(diào)節(jié)pH值后萃取(4)超聲15min后加入水、緩沖液取上清液萃取。尿液樣品中的藥物濃度較高加樣前先用水或緩沖液稀釋必要時可用酸、堿水解反應(yīng)

6、破壞藥物與蛋白質(zhì)的結(jié)合然后萃取。流速應(yīng)控制為2～4mlmin流速快不利于待測物與固定相結(jié)合。4.清洗填料反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調(diào)節(jié)pH值。加入小柱的清洗液應(yīng)不超過一個小柱的容積而SPE濾膜為5～10ml。5.洗脫待測物應(yīng)選用5～10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度則可先將洗脫液揮干后再用流動相重組殘留物后進樣。體內(nèi)樣品洗脫后多含有水可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的

7、SPE填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測物再用極性較強的HPLC分析柱如C18柱分析洗脫物。若待測物可電離可調(diào)節(jié)pH值抑制樣品離子化以增強待測物在反相SPE填料中的保留洗脫時調(diào)節(jié)pH值使其離子化并用較弱的溶劑洗脫收集洗脫液后再調(diào)節(jié)pH值使其在HPLC分析中達到最佳分離效果。在洗脫過程中應(yīng)減慢流速用兩次小體積洗脫代替一次大體積洗脫回收率更高。■固相萃取技術(shù)在環(huán)境分析上的應(yīng)用固相萃取技術(shù)在環(huán)境分析上的應(yīng)用在環(huán)境污染中農(nóng)藥分析的應(yīng)用國內(nèi)外分

8、析工作者就固相萃取技術(shù)在農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用方面進行了廣泛的嘗試和探索取得了許多成功的經(jīng)驗.由于農(nóng)藥在農(nóng)作物生產(chǎn)中不僅污染作物本身對農(nóng)作物的生長環(huán)境也產(chǎn)生污染包括土壤、水體等.SPE在水體中農(nóng)藥殘留分析方面的應(yīng)用測定水體中的農(nóng)藥殘留一般采用如C18C8等非極性吸附劑通常用甲醇和水條件化以甲醇為洗脫劑.由于對水體中的農(nóng)藥殘留限量要求嚴格如歐盟規(guī)定地表水農(nóng)藥殘留量為1.0μgL，飲用水為0.1μgL我國規(guī)定生活飲用水中滴滴涕、六六六的限量分