禾谷鐮刀菌 基因敲除 fgacl 致病性

1、禾谷鐮刀菌論文：小麥赤霉菌禾谷鐮刀菌論文：小麥赤霉菌FgAC1FgAC1基因敲除及功能研究基因敲除及功能研究【中文摘要】小麥赤霉病是一世界性真菌病害該病由多種鐮刀菌引起禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)是引發(fā)該病的優(yōu)勢(shì)種之一。由于該病原菌侵染使得小麥嚴(yán)重減產(chǎn)除侵染小麥外它還侵染大麥、玉米、高粱等其他禾谷類作物給人類帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。不僅如此小麥赤霉菌產(chǎn)生的真菌毒素還嚴(yán)重危害人、畜的健康。近年來(lái)全球?qū)坦如牭毒_(kāi)展了

2、大量的研究工作并取得了一系列重大進(jìn)展。目前對(duì)禾谷鐮刀菌的研究逐步從傳統(tǒng)的植物病理學(xué)水平上升到功能基因組學(xué)水平上來(lái)其研究熱點(diǎn)逐漸集中在探索其致病機(jī)理和發(fā)現(xiàn)新的藥物作用靶點(diǎn)。本研究中作者采用基因敲除技術(shù)運(yùn)用同源重組原理敲除小麥赤霉菌(Fusariumgraminearum)致病相關(guān)基因FgAC1并對(duì)其功能進(jìn)行了分析。首先采用SplitMarker法構(gòu)建基因敲除盒對(duì)野生型菌株P(guān)H1原生質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)化獲得大量轉(zhuǎn)化子經(jīng)潮霉素初篩后再對(duì)轉(zhuǎn)化子進(jìn)行單孢

3、分離將分離得到的單孢子再進(jìn)行PCR檢測(cè)然后再進(jìn)行Southern雜交驗(yàn)證最終獲得兩個(gè)缺失突變株。以該基因缺失株為研究對(duì)象禾谷鐮刀菌野生型PH1菌株為對(duì)照通過(guò)菌落形態(tài)觀察、生長(zhǎng)速度測(cè)定、孢子形態(tài)觀察、...【英文摘要】FusariumHeadBlight(FHB)diseaseiscausedmainlybyFusariumgraminearum.Thispathogencausesthelossofproductionnotonlywh

4、eatbutalsobarleycnsghumanyotherkindsofcerealplantsthus2.2.1小麥赤霉菌PH1菌株基因組DNA的提取——CTAB法23242.2.2質(zhì)粒pCB1003的制備24252.2.3FgAC1基因敲除盒的構(gòu)建—SplitMarker法25292.3結(jié)果與分析29312.3.1PH1菌株基因組DNA的獲得292.3.2質(zhì)粒pCB1003的獲得29302.3.3SplitMarker法構(gòu)建Fg

5、AC1基因敲除盒30312.4討論31323FgAC1基因敲除和轉(zhuǎn)化子的鑒定32423.1實(shí)驗(yàn)材料32343.1.1材料和試劑323.1.2培養(yǎng)基和主要試劑配方32333.1.3實(shí)驗(yàn)器材33343.2實(shí)驗(yàn)方法34383.2.1PH1原生質(zhì)體的制備與轉(zhuǎn)化34353.2.2敲除突變體的篩選和鑒定35383.3結(jié)果與分析38403.3.1原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化383.3.2篩選鑒定獲得2個(gè)FgAC1缺失突變體38403.4討論40424FgAC1敲除