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文檔簡介
1、本文研究了Hg2+、Pb2+、Cd2+的毒性效應對中華哲水蚤(Calanus sinicus)總超氧化物歧化酶(T-SOD)的影響,并對重金屬影響下的中華哲水蚤線粒體COI基因做了初步研究,全文共分三個部分:
第一部分研究了Hg2+、Pb2+、Cd2+對中華哲水蚤的急性毒性效應。通過預實驗確定中華哲水蚤在實驗室的最佳馴化條件,然后進行三種重金屬離子對中華哲水蚤的96h急性毒性實驗,得出3種重金屬對中華哲水蚤的急性毒性由強至
2、弱依次為Hg2+>Cd2+>pb2+。Hg2+對中華哲水蚤96h-LC50是0.0106mg/L,Cd2+對中華哲水蚤96h-LC50是0.0551mg/L,pb2+對中華哲水蚤96h-LC50是3.7439 mg/L。
第二部分采用亞致死毒性實驗研究了3種重金屬離子Hg2+、Vb2+、Cd2+對中華哲水蚤總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的影響。實驗結果表明,隨著重金屬離子暴露時間的延長,中華哲水蚤T-SOD活性變化顯著
3、。Hg2+濃度為0.0013mg/L~0.0053mg/L時,T-SOD的活性在12h時達到最大;Pb2+濃度為0.4680mg/L、0.9360mg/L、1.8720mg/L時,T-SOD的活性分別在36h、24h、12h時達到最大。Hg2+和Pb2+對中華哲水蚤T-SOD活性的影響均表現(xiàn)為隨暴露時間延長,呈先上升后下降的趨勢。Cd2+對中華哲水蚤T-SOD活性影響呈先上升后下降,再上升再下降的趨勢,12h時0.0069 mg/L、0
4、.0138mg/L和0.0276mg/L三個濃度組T-SOD值均達到最大。
第三部分初步研究了Hg2+對中華哲水蚤線粒體COI基因的影響。通過對對照組和實驗組的中華哲水蚤進行DNA提取、目的片段PCR擴增、基因克隆和測定目的基因片段序列,對比不同濃度Hg2+對中華哲水蚤mtCOI基因堿基組成的影響。結果顯示,10μg/LHg2+處理后中華哲水蚤mtCOI基因片段的堿基序列與GenBank accessionno.AF332
5、093的序列相似度為99%,共發(fā)現(xiàn)5個變異點,分別位于第33、36、212、365和368位點上,變異類型:33位點為顛換,其余四個位點均為轉(zhuǎn)換。20μg/L Hg2+處理后中華哲水蚤mtCOI基因片段的堿基序列與GenBank accession no.AF332093的序列相似度為98%,共發(fā)現(xiàn)6個變異點,分別位于第34、50、64、365、368和705位點上,變異類型:34、365和368為轉(zhuǎn)換,50和64為缺失,705為插入。
6、40μg/L Hg2+處理后中華哲水蚤mtCOI基因片段的堿基序列與GenBank accession no.AF332093的序列相似度為98%,共發(fā)現(xiàn)8個變異點,分別位于第33、35、41、365、368、660、663和670位點上,變異類型:33為缺失,35為插入,41、663和670為顛換,365、368和660為轉(zhuǎn)換。
由本實驗的結果可知,中華哲水蚤對重金屬離子毒性非常敏感,較低濃度就會引起T-SOD的大幅變化
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