斑馬魚仔魚和行為在環(huán)境毒理學研究中的方法探索與應用.pdf

1、斑馬魚作為一種國際通用的模式生物,在環(huán)境風險物質的生態(tài)安全性與人群健康風險的評價中發(fā)揮著重大的作用。傳統(tǒng)的毒理學實驗主要是模式生物的急性及亞急性胚胎毒理學實驗,但這些方法有很大不足之處。雖然斑馬魚行為指標作為生物毒理學標志物在理論上具有非常敏感而有應用價值的特點,但至今,很少有研究將行為指標應用于環(huán)境風險物質毒理學及藥物的藥理學研究中。本文旨在傳統(tǒng)毒理學的基礎上,構建一套相對完整的、以模式生物斑馬魚胚胎及其仔魚行為為中心的分析技術體系,

2、并將其應用到環(huán)境風險物質的神經及行為毒性研究中。首先,利用斑馬魚行為分析系統(tǒng)(Viewpoint),構建并優(yōu)化一套相對完整的斑馬魚仔魚行為指標的檢測方法及其流程；然后對正常仔魚的行為進行檢測及定量分析,得出正常培養(yǎng)條件下,健康仔魚行為的統(tǒng)計學特征和規(guī)律；然后利用上述方法對按傳統(tǒng)方法酒精暴毒后的仔魚的行為進行檢測,構建不同處理組仔魚行為參數的統(tǒng)計比較方法；最后,將上述方法推廣應用到5種全氟化合物的行為毒性檢測中,研究上述方法的相對于傳統(tǒng)指

3、標和方法的敏感性及可行性。實驗結果顯示,本研究中所建立的行為分析技術體系可以高通量、快速、準確地檢測分析仔魚的運動活力,運動頻率,對光周期刺激反應,對暗刺激反應等行為表現；進一步對正常仔魚的上述幾種行為特征做了定量統(tǒng)計,分析得出了正常仔魚各項行為指標的參數特征及統(tǒng)計學規(guī)律；酒精暴毒仔魚的行為結果顯示,在傳統(tǒng)毒理學方法的基礎上,行為指標可以更敏感的顯示出酒精對胚胎及其仔魚的行為毒性；最后一部分的方法用實驗也表明此行為分析方法可以應用到環(huán)境