基因工程原理試題

1、基因工程原理練習(xí)題及其答案基因工程原理練習(xí)題及其答案一、填空題1基因工程是70年代發(fā)展起來(lái)的遺傳學(xué)的一個(gè)分支學(xué)科。2基因工程的兩個(gè)基本特點(diǎn)是：(1)分子水平上的操作分子水平上的操作，(2)細(xì)胞水平上的細(xì)胞水平上的表達(dá)表達(dá)3基因克隆中三個(gè)基本要點(diǎn)是：克隆基因的類(lèi)型克隆基因的類(lèi)型；受體的選擇；載體的選擇受體的選擇；載體的選擇4通過(guò)比較用不同組合的限制性內(nèi)切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大小的片段，可以構(gòu)建顯示該區(qū)域各限制性內(nèi)切核酸酶

2、切點(diǎn)相互位置的限制性酶切圖譜限制性酶切圖譜。5限制性內(nèi)切核酸酶是按屬名和種名相結(jié)合的原則命名的，第一個(gè)大寫(xiě)字母取自屬名的第一個(gè)字母，第二、三兩個(gè)字母取自_種名的前兩個(gè)字母，第四個(gè)字母則用株名表示。6部分酶切可采取的措施有：(1)減少酶量；(2)縮短反應(yīng)時(shí)間；(3)增大反應(yīng)體積等。7第一個(gè)分離的限制性內(nèi)切核酸酶是EcoK；而第一個(gè)用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是_Ecl。8限制性內(nèi)切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的來(lái)源不同，但識(shí)別的序列都是

3、GGCC，它們屬于異源同工酶。9DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段，具有兩種酶活性：(1)53合成酶的活性；(2)35外切核酸酶的活性。10為了防止DNA的自身環(huán)化，可用堿性磷酸酶去雙鏈DNA_5’端的磷酸基團(tuán)。11EGTA是_Ca2_離子螯合劑。12測(cè)序酶是修飾了的T7DNA聚合酶，它只有_53合成酶的活性，而沒(méi)有35外切酶的活性。13切口移位(nicktransl

4、ation)法標(biāo)記DNA的基本原理在于利用DNA聚合酶I的__5一3外切核酸酶和5一3合成酶的作用。14欲將某一具有突出單鏈末端的雙鏈DNA分子轉(zhuǎn)變成平末端的雙鏈形式，通?？刹捎胈___S1核酸酶切割或DNA聚合酶補(bǔ)平。15反轉(zhuǎn)錄酶除了催化DNA的合成外，還具有__核酸水解酶H的作用，可以將DNARNA雜種雙鏈中的_RNA_水解掉。16基因工程中有3種主要類(lèi)型的載體：質(zhì)粒DNA，病毒DNA，質(zhì)粒和病毒DNA雜合體。17就克隆一個(gè)基因(D

5、NA片段)來(lái)說(shuō)，最簡(jiǎn)單的質(zhì)粒載體也必需包括三個(gè)部分：__復(fù)制區(qū)：含有復(fù)制起點(diǎn)；選擇標(biāo)記：主要是抗性基因；克隆位點(diǎn)：便于外源DNA的插入。另外，一個(gè)理想的質(zhì)粒載體必須具有低分子量。18一個(gè)帶有質(zhì)粒的細(xì)菌在有EB的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后，一部分細(xì)胞中已測(cè)質(zhì)粒消除(或治愈)。19pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，它的復(fù)制子來(lái)不出質(zhì)粒，這種現(xiàn)象叫源于pMBl，它的四環(huán)素抗性基因來(lái)自于pSCl01，它的氨芐青霉素抗性基因來(lái)自于pSF2124(R質(zhì)粒

6、)。20YAC的最大容載能力是1000kb，BAC載體的最大容載能力是RNA制備物的克隆群則構(gòu)建了一個(gè)_cDNA文庫(kù)_。40只要知道基因組中某一特定區(qū)域的部分核苷酸組成，用_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)可以將這段DNA進(jìn)行百萬(wàn)倍的擴(kuò)增。41人工感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞在溫度為0?C時(shí)吸附DNA42?C_時(shí)攝人DNA。42目前，在重組體的篩選中，已經(jīng)發(fā)展了許多構(gòu)思巧妙、具有極高準(zhǔn)確性的篩選方法。大致可以分為：(1)遺傳學(xué)方法；(2)物理篩選法；(

7、3)核酸雜交法；(4)表達(dá)產(chǎn)物分析法等。43PCR擴(kuò)增篩選重組體是比較簡(jiǎn)便的篩選方法，它適合于_插入外源片段的種類(lèi)較多，大小又極為相似的重組體的篩選。44核酸雜交探針可分為兩大類(lèi)：DNA探針和RNA探針。其中DNA探針又分為_(kāi)__基因組DNA探針和cDNA探針。45如果用限制性內(nèi)切核酸酶切割雙鏈DNA產(chǎn)生5’突出的黏性末端，則可以用_Klenow酶填補(bǔ)的方法_進(jìn)行3’末端標(biāo)記。如果用限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA產(chǎn)生的是3’突出的黏性末端，

8、可以用__T4DNA聚合酶進(jìn)行3’末端標(biāo)記。46單鏈DNA探針的標(biāo)記可以采用下列方法：(1)用M13噬菌體載體合成單鏈DNA探針；(2)從mRNA反轉(zhuǎn)錄合成單鏈cDNA探針；(3)用不對(duì)稱(chēng)PCR合成單鏈DNA探針。47根據(jù)Nthern雜交的結(jié)果可以說(shuō)明：外源基因是否進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄_。48差示雜交(differentialhybridization)技術(shù)需要__兩種不同的細(xì)胞群體能夠表達(dá)不同的基因，即在一個(gè)群體中能夠表達(dá)一些基因，而在另一個(gè)細(xì)

9、胞群體中不能表達(dá)這些基因。49RNA分子經(jīng)凝膠電泳后按大小不同分開(kāi)，然后被轉(zhuǎn)移到一張硝酸纖維素膜(尼龍膜)上，同一放射DNA探針雜交的技術(shù)稱(chēng)__Nthern印跡_。50在__Southern印跡_技術(shù)中，DNA限制性片段經(jīng)凝膠電泳分離后，被轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜(或尼龍膜)上，然后與放射性的DNA探針雜交。51可用T4DNA聚合酶進(jìn)行平末端的DNA標(biāo)記，因?yàn)檫@種酶具有__5’?3’合成酶_和_3’?5’外切核酸酶_的活性。52根據(jù)外源片段提

10、供的遺傳表型篩選重組體，必需考慮三種因素：(1)克隆的是完整的基因；(2)使用的是表達(dá)載體；(3)不含內(nèi)含子。53Nthern印跡和Southern印跡有兩點(diǎn)根本的區(qū)別：(1)印跡的對(duì)象不同：Nthern是RNA，Southern是DNA；(2)電泳條件不同，前者是變性條件，后者是非變性條件。54放射免疫篩選的原理基于以下三點(diǎn)：(1)抗體能夠被吸附到固體支持物上；(2)同一個(gè)抗原可以同幾種抗體結(jié)合；(3)抗體能夠被標(biāo)記二、選擇題(單選或