基因工程簡介

1、,,第2節(jié) 基因工程及其應(yīng)用,,,轉(zhuǎn)基因獼猴（左）和普通獼猴外觀上沒有什么區(qū)別。,中國首例轉(zhuǎn)基因獼猴,在紫外線照射下，轉(zhuǎn)基因獼猴（左）通體呈現(xiàn)綠色，這是由它體內(nèi)的綠色熒光蛋白所致。,,,綠色熒光蛋白基因,,,基因工程：又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。,原 理：,操作水平：,結(jié) 果：,一、基因工程

2、,基因重組,DNA分子水平,定向改造生物性狀的新技術(shù),定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人類所需要的品種。,想一想需要做哪些關(guān)鍵工作？,水母體細(xì)胞,綠色熒光蛋白基因,獼猴受精卵,,,(目的基因）,(受體細(xì)胞）,想一想需要做哪些關(guān)鍵工作？,水母體細(xì)胞,綠色熒光蛋白基因,,,,獼猴受精卵,(目的基因）,(受體細(xì)胞）,想一想需要做哪些關(guān)鍵工作？,,,水母體細(xì)胞,綠色熒光蛋白基因,獼猴受精卵,(目的基因）,(受體細(xì)胞）,培育轉(zhuǎn)基因獼猴的關(guān)鍵步驟：,

3、基因的“針線”,基因的運載體,基因的“剪刀”,,,1、基因的剪刀—限制性內(nèi)切酶 （簡稱限制酶）,二、基因操作的工具,限制酶是在生物體(主要是微生物)內(nèi)的一種酶，能將外來的DNA切斷，由于這種切割作用是在DNA分子內(nèi)部進行的，故名限制性內(nèi)切酶。,,,例：大腸桿菌的一種EcoRI限制酶識別 GAATTC序列，并在G和A之間切開。,模型構(gòu)建1,使用Ec

4、oRI 剪切目的基因,,,,,黏性末端,,,,,思考：用同一種限制酶剪切2個不同的DNA， 是否具有相同的黏性末端？,,CAGGAATTCTAG,AATGAATTCGTC,GTCCTTAAGATC,,TTACTTAAGCAG,,,特點：一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點上切割DNA分子。,（專一性）,,,需要運輸工具——運載體,目的基因怎樣才能導(dǎo)入受體細(xì)胞？,常用的運載體： 1）細(xì)菌的質(zhì)粒

5、 2）噬菌體或某些動植物病毒,2、基因工程的工具——運載體,,,大腸桿菌的質(zhì)粒,運載體應(yīng)該具有什么特點呢?,？,1.能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存。2.具有限制酶切割位點， 便與外源基因相連。3.具有標(biāo)記基因，便于進行篩選。,將目的基因和運載體結(jié)合，需要如何處理質(zhì)粒？,用同種限制酶切割質(zhì)粒,,,3、基因的針線──DNA連接酶,DNA連接酶的作用是：將互補配對的兩個黏性末端連接起來，使之成為一個完整的DNA分子。,模型構(gòu)建

6、2,使用DNA連接酶制作重組DNA分子,甲片段,重組DNA分子,,,使用DNA連接酶制作重組DNA分子,,,,,四個基本步驟：,（三）基因操作的基本步驟,1）提取目的基因2）目的基因與運載體結(jié)合3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4）目的基因的檢測和表達(dá),設(shè)計實驗：如何培育能生產(chǎn)胰島素的大腸桿菌。,,,對應(yīng)訓(xùn)練：,,⒈要使目的基因與對應(yīng)的載體重組，所需的兩種酶是（ ）?、傧拗泼浮?②連接酶?、劢庑?④還原酶　　?。?/p>

7、．①②　 Ｂ．③④　 Ｃ．①④ Ｄ．②③,Ａ,2．分析下圖，下列有關(guān)工具酶功能的敘述，不正確的是(   )  A．切斷a處的酶為限制酶 B．連接a處的酶為DNA連接酶 C．切斷b處的酶為解旋酶 D．連接b處的酶為RNA聚合酶,D,3.實施基因工程的第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來，這要利用限制性內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能識別ＤＮ

8、Ａ分子的ＧＡＡＴＴＣ順序，切點在Ｇ和Ａ之間，這是利用了酶的（　 ）Ａ．高效性　　　 Ｂ．專一性　　?。茫鄻有浴　　　。模呋钚砸资芡饨缬绊?Ｂ,4.基因工程的正確操作步驟是（　 ）①使目的基因與運載體結(jié)合　?、趯⒛康幕?qū)胧荏w細(xì)胞?、蹤z測目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求④提取目的基因Ａ． ③②④① 　?。拢?②④①③　　　　?。茫?④①②③ 　?。模?③④①②,Ｃ,,,5.采用基因工程的方法培

9、育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是（　 ）①將毒素蛋白注射到棉受精卵中　?、?將編碼毒素蛋白的ＤＮＡ序列，注射到棉受精卵中?、蹖⒕幋a毒素蛋白的ＤＮＡ序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入 細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，在進行組織培養(yǎng)④將編碼毒素蛋白的ＤＮＡ序列，與細(xì)菌質(zhì)粒重組， 注射到棉的子房并進入受精卵中 Ａ．①②　　 Ｂ. ②③ 　　 Ｃ. ③④