重醫(yī)細菌學檢驗復習題

1、1、實驗室生物安全、實驗室生物安全(Labaty(Labatybiosafety):biosafety):實驗室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實驗室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害，符合相差法規(guī)、標準等對實驗室生物安全責任的要求。2、生物安全防護基本要求、生物安全防護基本要求實驗室生物安全防護（biosafetyprotectionflabaties）實驗對象：致病的微生物及其毒素綜合措施：實驗室設計建造、個體防

2、護設施、工作及操作程序和規(guī)程等確保：實驗室工作人員不受實驗對象侵染，周圍環(huán)境的生物安全。實驗室生物安全通用原則積極防止操作者在污染的環(huán)境中接觸生物危害物；主動封閉生物危害材料產(chǎn)生之源，防止從操作部位向周圍環(huán)境釋放；盡量減少生物危害材料向周圍環(huán)境意外釋放所造成的后果。3、實驗室必須設有專職的生物安全負責人、實驗室必須設有專職的生物安全負責人實驗室負責人為實驗室生物安全的第一責任人。生物安全等級生物安全防護實驗室根據(jù)所處理的微生物及其毒素的

3、危害程度分為四級。實驗室生物安全防護要求：一級最低，四級最高。4、在主實驗室合理設置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)、在主實驗室合理設置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)5、各級生物防護實驗室特點、各級生物防護實驗室特點一級生物安全防護實驗室（BSL1P1）：適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。二級生物安全防護實驗室（BSL2P2）實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。在處

4、理危險度2級或更高危險度級別的微生物時，在實驗室門上應標有國際通用的生物危害警告標志。三級生物安全防護實驗室（BSL3P3）：適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防傳染的疫苗。四級生物安全防護實驗室（BSL4P4）：適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。6、控制措施、控制措施安全設備和個體防護是實驗室工作人員與致病

5、微生物及其毒素直接接觸的一級屏障。所有可能使致病微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，都必須在生物安全柜內進行。7、生物安全柜（、生物安全柜（BSCBSC）biosafetybiosafetycabi(cabi(概念、分級及特點概念、分級及特點)具備氣流控制及高效空氣過濾裝置的操作柜，可有效降低實驗過程中產(chǎn)生的有害氣溶膠對操作者和環(huán)境的危害。(凈化排氣)根據(jù)生物安全防護水平的差異，生物安全柜可分為I、Ⅱ、Ⅲ級3種類型。實驗室應按要求分別

6、配備I、Ⅱ、Ⅲ級生物安全柜。Ⅰ級生物安全柜：外部空氣保證工作人員不受侵害，但不保證實驗對象不受污染。Ⅱ級生物安全柜：經(jīng)高效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣既保證工作人員不受侵害，也保證實驗對象不受污染；Ⅲ級生物安全柜：經(jīng)高效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣2、食品樣本采集種類、食品樣本采集種類大樣、中樣、小樣。大樣：一整批樣本。中樣：從樣本各部分所取得的混合樣本，一般為200g。小樣：分析用，檢樣，25g。注：檢驗結果報告后，剩余樣品或同批

7、樣品不進行微生物項目的復檢3、細菌的形態(tài)結構檢查法、細菌的形態(tài)結構檢查法借助顯微鏡，對細菌形態(tài)、大小、排列、結構進行直接觀察。在細菌檢驗中極其重要，是細菌分類和鑒定不可缺少的組成部分。樣本中有無細菌及其大致的數(shù)量。細菌的形態(tài)、大小、排列、結構和染色反應性。培養(yǎng)物是否為純種。普通光學顯微鏡（0.2μm1000＝0.2mm）細菌染色樣本；弱光下用于不染色樣本活菌的運動情況暗視野顯微鏡（0.04μm：50倍）不染色樣本活菌的形態(tài)相差顯微鏡：活

8、體細胞的外形和運動方式；細胞內部某些細微結構及這些結構的數(shù)量4、不染色檢查：主要用于觀察細菌的動力、不染色檢查：主要用于觀察細菌的動力有鞭毛的細菌為真正運動無鞭毛的細菌則為布朗運動(即分子運動)染色檢查細菌染色→顯微鏡觀察。常用的細菌染料：人工合成帶苯環(huán)的染料，色基助色基單純染料：蘇丹染料酸性染料：伊紅、酸性品紅、剛果紅等堿性染料：美藍、孔雀綠、甲紫和堿性復紅等復合染料：姬姆薩染料、瑞氏染料等5、單染色法：、單染色法：用一種染料染色，使

9、各種細菌均染成同一顏色。操作簡單，易于使用。只能顯示細菌的形態(tài)及大小。如用美藍或稀釋石炭酸復紅等6、復染色法：、復染色法：用兩種以上染料染色細菌，顯示細菌形態(tài)大小，鑒別細菌種類鑒別染色法:革蘭染色法、抗酸染色法Grams染色操作步驟：初染、媒染、脫色、復染抗酸染色法：抗酸菌：分枝桿菌分枝菌酸。一般不易著色，一旦染上色后又不易被鹽酸酒精脫色。經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使抗酸菌著色。步驟：初染、脫色、復染7、負染色法：、負染色法：背景著色而

10、細菌本身不著色。細菌莢膜常用墨汁負染色法配合單染色法(如美藍)，背景呈黑色，菌體染成藍色，莢膜不著色，包繞在菌體周圍成為一層透明的空圈。該法具有快速、經(jīng)濟、簡便易行、高度反差、分辨率高的特點。8、培養(yǎng)基的種類－－按物理性狀分、培養(yǎng)基的種類－－按物理性狀分液體培養(yǎng)基：增菌、作生化試驗等半固體培養(yǎng)基：觀察細菌的動力、分類鑒定、保存菌種及噬菌體效價滴定等。瓊脂用量為0.5%～1%固體培養(yǎng)基：主要用于分離培養(yǎng)；平板、斜面、高層及高層斜面；瓊脂用