重醫(yī)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)題

1、1、實(shí)驗(yàn)室生物安全、實(shí)驗(yàn)室生物安全(Labaty(Labatybiosafety):biosafety):實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實(shí)驗(yàn)室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害，符合相差法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等對實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任的要求。2、生物安全防護(hù)基本要求、生物安全防護(hù)基本要求實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)（biosafetyprotectionflabaties）實(shí)驗(yàn)對象：致病的微生物及其毒素綜合措施：實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、個(gè)體防

2、護(hù)設(shè)施、工作及操作程序和規(guī)程等確保：實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對象侵染，周圍環(huán)境的生物安全。實(shí)驗(yàn)室生物安全通用原則積極防止操作者在污染的環(huán)境中接觸生物危害物；主動(dòng)封閉生物危害材料產(chǎn)生之源，防止從操作部位向周圍環(huán)境釋放；盡量減少生物危害材料向周圍環(huán)境意外釋放所造成的后果。3、實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)有專職的生物安全負(fù)責(zé)人、實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)有專職的生物安全負(fù)責(zé)人實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人為實(shí)驗(yàn)室生物安全的第一責(zé)任人。生物安全等級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)所處理的微生物及其毒素的

3、危害程度分為四級。實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)要求：一級最低，四級最高。4、在主實(shí)驗(yàn)室合理設(shè)置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)、在主實(shí)驗(yàn)室合理設(shè)置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)5、各級生物防護(hù)實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn)、各級生物防護(hù)實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn)一級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL1P1）：適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL2P2）實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。在處

4、理危險(xiǎn)度2級或更高危險(xiǎn)度級別的微生物時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物危害警告標(biāo)志。三級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL3P3）：適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預(yù)防傳染的疫苗。四級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL4P4）：適用于對人體具有高度的危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。6、控制措施、控制措施安全設(shè)備和個(gè)體防護(hù)是實(shí)驗(yàn)室工作人員與致病

5、微生物及其毒素直接接觸的一級屏障。所有可能使致病微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，都必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。7、生物安全柜（、生物安全柜（BSCBSC）biosafetybiosafetycabi(cabi(概念、分級及特點(diǎn)概念、分級及特點(diǎn))具備氣流控制及高效空氣過濾裝置的操作柜，可有效降低實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的有害氣溶膠對操作者和環(huán)境的危害。(凈化排氣)根據(jù)生物安全防護(hù)水平的差異，生物安全柜可分為I、Ⅱ、Ⅲ級3種類型。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按要求分別

6、配備I、Ⅱ、Ⅲ級生物安全柜。Ⅰ級生物安全柜：外部空氣保證工作人員不受侵害，但不保證實(shí)驗(yàn)對象不受污染。Ⅱ級生物安全柜：經(jīng)高效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣既保證工作人員不受侵害，也保證實(shí)驗(yàn)對象不受污染；Ⅲ級生物安全柜：經(jīng)高效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣2、食品樣本采集種類、食品樣本采集種類大樣、中樣、小樣。大樣：一整批樣本。中樣：從樣本各部分所取得的混合樣本，一般為200g。小樣：分析用，檢樣，25g。注：檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告后，剩余樣品或同批

7、樣品不進(jìn)行微生物項(xiàng)目的復(fù)檢3、細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查法、細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查法借助顯微鏡，對細(xì)菌形態(tài)、大小、排列、結(jié)構(gòu)進(jìn)行直接觀察。在細(xì)菌檢驗(yàn)中極其重要，是細(xì)菌分類和鑒定不可缺少的組成部分。樣本中有無細(xì)菌及其大致的數(shù)量。細(xì)菌的形態(tài)、大小、排列、結(jié)構(gòu)和染色反應(yīng)性。培養(yǎng)物是否為純種。普通光學(xué)顯微鏡（0.2μm1000＝0.2mm）細(xì)菌染色樣本；弱光下用于不染色樣本活菌的運(yùn)動(dòng)情況暗視野顯微鏡（0.04μm：50倍）不染色樣本活菌的形態(tài)相差顯微鏡：活

8、體細(xì)胞的外形和運(yùn)動(dòng)方式；細(xì)胞內(nèi)部某些細(xì)微結(jié)構(gòu)及這些結(jié)構(gòu)的數(shù)量4、不染色檢查：主要用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力、不染色檢查：主要用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力有鞭毛的細(xì)菌為真正運(yùn)動(dòng)無鞭毛的細(xì)菌則為布朗運(yùn)動(dòng)(即分子運(yùn)動(dòng))染色檢查細(xì)菌染色→顯微鏡觀察。常用的細(xì)菌染料：人工合成帶苯環(huán)的染料，色基助色基單純?nèi)玖希禾K丹染料酸性染料：伊紅、酸性品紅、剛果紅等堿性染料：美藍(lán)、孔雀綠、甲紫和堿性復(fù)紅等復(fù)合染料：姬姆薩染料、瑞氏染料等5、單染色法：、單染色法：用一種染料染色，使

9、各種細(xì)菌均染成同一顏色。操作簡單，易于使用。只能顯示細(xì)菌的形態(tài)及大小。如用美藍(lán)或稀釋石炭酸復(fù)紅等6、復(fù)染色法：、復(fù)染色法：用兩種以上染料染色細(xì)菌，顯示細(xì)菌形態(tài)大小，鑒別細(xì)菌種類鑒別染色法:革蘭染色法、抗酸染色法Grams染色操作步驟：初染、媒染、脫色、復(fù)染抗酸染色法：抗酸菌：分枝桿菌分枝菌酸。一般不易著色，一旦染上色后又不易被鹽酸酒精脫色。經(jīng)過加熱和延長染色時(shí)間來促使抗酸菌著色。步驟：初染、脫色、復(fù)染7、負(fù)染色法：、負(fù)染色法：背景著色而

10、細(xì)菌本身不著色。細(xì)菌莢膜常用墨汁負(fù)染色法配合單染色法(如美藍(lán))，背景呈黑色，菌體染成藍(lán)色，莢膜不著色，包繞在菌體周圍成為一層透明的空圈。該法具有快速、經(jīng)濟(jì)、簡便易行、高度反差、分辨率高的特點(diǎn)。8、培養(yǎng)基的種類－－按物理性狀分、培養(yǎng)基的種類－－按物理性狀分液體培養(yǎng)基：增菌、作生化試驗(yàn)等半固體培養(yǎng)基：觀察細(xì)菌的動(dòng)力、分類鑒定、保存菌種及噬菌體效價(jià)滴定等。瓊脂用量為0.5%～1%固體培養(yǎng)基：主要用于分離培養(yǎng)；平板、斜面、高層及高層斜面；瓊脂用