糞便細(xì)菌學(xué)規(guī)范

1、糞便細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)操作規(guī)范糞便細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)操作規(guī)范實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查是細(xì)菌培養(yǎng)，沙門氏菌、志賀氏菌、鄰單胞菌實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查是細(xì)菌培養(yǎng)，沙門氏菌、志賀氏菌、鄰單胞菌和氣單胞菌、副溶血性弧菌、致瀉性大腸桿菌作為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)培養(yǎng)和氣單胞菌、副溶血性弧菌、致瀉性大腸桿菌作為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)培養(yǎng)的主要腹瀉病原菌。的主要腹瀉病原菌。一、標(biāo)本采集與運(yùn)送：、標(biāo)本采集與運(yùn)送：1標(biāo)本采集標(biāo)本采集（1）標(biāo)本采集盡可能在發(fā)病早期和應(yīng)用抗菌藥物治療之前。在不同）標(biāo)本采集盡可能在發(fā)

2、病早期和應(yīng)用抗菌藥物治療之前。在不同的時(shí)間采集的時(shí)間采集2~3份標(biāo)本可以提高致病菌的分離率。份標(biāo)本可以提高致病菌的分離率。（2）自然排便采集糞便標(biāo)本時(shí)，取有膿血、粘液、組織碎片部分的）自然排便采集糞便標(biāo)本時(shí)，取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便糞便1～3g。液體糞便則取絮狀物，一般取。液體糞便則取絮狀物，一般取1～3ml，直接裝入糞便，直接裝入糞便容器或保存液或運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。容器或保存液或運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。（3）直腸拭子采集糞便標(biāo)本，

3、檢查帶菌者時(shí)可以采取肛拭（棉拭先）直腸拭子采集糞便標(biāo)本，檢查帶菌者時(shí)可以采取肛拭（棉拭先用保存液或增菌培養(yǎng)基濕潤(rùn)）用保存液或增菌培養(yǎng)基濕潤(rùn)），深入肛門內(nèi)，深入肛門內(nèi)7~10cm除采樣，不能及除采樣，不能及時(shí)接種時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本放入保存液內(nèi)。時(shí)接種時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本放入保存液內(nèi)。(4)容器應(yīng)清潔、帶蓋、廣口的（不宜使用紙盒）容器應(yīng)清潔、帶蓋、廣口的（不宜使用紙盒）、送檢的標(biāo)本中不、送檢的標(biāo)本中不能加入防腐劑。能加入防腐劑。2標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本運(yùn)送（1）糞

4、便標(biāo)本應(yīng)盡快送檢，室溫條件下不能超過）糞便標(biāo)本應(yīng)盡快送檢，室溫條件下不能超過2h。如不能及時(shí)。如不能及時(shí)送檢可加入送檢可加入pH7.0的磷酸鹽甘油或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，但不宜超過的磷酸鹽甘油或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，但不宜超過24h。使用改良使用改良CaryBlair培養(yǎng)基時(shí)，不能運(yùn)送培養(yǎng)志賀氏菌的標(biāo)本。培養(yǎng)基時(shí)，不能運(yùn)送培養(yǎng)志賀氏菌的標(biāo)本。（2）直腸拭子采集的標(biāo)本必須置入運(yùn)送培養(yǎng)基或）直腸拭子采集的標(biāo)本必須置入運(yùn)送培養(yǎng)基或GN肉湯中送檢，肉湯中送檢，轉(zhuǎn)運(yùn)

5、時(shí)間不宜超過轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間不宜超過2h。1腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)對(duì)患者糞便標(biāo)本進(jìn)行腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)，包括沙門氏菌、志賀氏對(duì)患者糞便標(biāo)本進(jìn)行腹瀉病原菌常規(guī)培養(yǎng)，包括沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉性大腸桿菌、鄰單胞菌、氣單胞菌，致病性弧菌。此外，菌、致瀉性大腸桿菌、鄰單胞菌、氣單胞菌，致病性弧菌。此外，也包括可引起菌群失調(diào)的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和酵母菌。也包括可引起菌群失調(diào)的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和酵母菌。糞便標(biāo)本至少應(yīng)接

6、種血平皿、糞便標(biāo)本至少應(yīng)接種血平皿、HE（XLD或SS）、EMB（或（或MAC或中國(guó)蘭）等培養(yǎng)基。沿海地區(qū)還需增加或中國(guó)蘭）等培養(yǎng)基。沿海地區(qū)還需增加TCBS瓊脂培養(yǎng)基。瓊脂培養(yǎng)基。補(bǔ)充說明：補(bǔ)充說明：（1）SS培養(yǎng)基對(duì)部分志賀氏菌有抑制作用。培養(yǎng)基對(duì)部分志賀氏菌有抑制作用。（2）常用的腸道選擇性培養(yǎng)基（如）常用的腸道選擇性培養(yǎng)基（如SS等）對(duì)氣單胞菌、鄰單胞菌等）對(duì)氣單胞菌、鄰單胞菌有抑制作用，初次分離時(shí)應(yīng)接種血平皿和有抑制作用，初次

7、分離時(shí)應(yīng)接種血平皿和MAC。（3）若用）若用EMB（伊紅美蘭）（伊紅美蘭）、MAC（麥康凱）等培養(yǎng)基培養(yǎng)后，（麥康凱）等培養(yǎng)基培養(yǎng)后，未檢出常見致病菌，但感染性腹瀉癥狀明顯，可重新采集糞便標(biāo)本未檢出常見致病菌，但感染性腹瀉癥狀明顯，可重新采集糞便標(biāo)本接種接種GN肉湯，肉湯，35℃培養(yǎng)培養(yǎng)46h，再轉(zhuǎn)種，再轉(zhuǎn)種HE（腸道瓊脂）等培養(yǎng)基，（腸道瓊脂）等培養(yǎng)基，進(jìn)一步分離培養(yǎng)。進(jìn)一步分離培養(yǎng)。（4）如懷疑沙門氏菌感染，可先用）如懷疑沙門氏菌感

8、染，可先用SF肉湯（亞硒酸鹽增軍液）肉湯（亞硒酸鹽增軍液），以提高檢出率。以提高檢出率。（5）正常人體腸道內(nèi)可以存在金黃色葡萄球菌，因此只有每克糞便）正常人體腸道內(nèi)可以存在金黃色葡萄球菌，因此只有每克糞便細(xì)菌數(shù)達(dá)到細(xì)菌數(shù)達(dá)到105CFU時(shí)才有臨床意義。時(shí)才有臨床意義。（6）氣單胞菌能夠在常規(guī)的鑒別培養(yǎng)基如）氣單胞菌能夠在常規(guī)的鑒別培養(yǎng)基如MAC和EMB上生長(zhǎng)，上生長(zhǎng)，但選擇性培養(yǎng)基更有助于檢出氣單胞菌。選擇性培養(yǎng)基：每但選擇性培養(yǎng)基更有